艾滋病合并慢性乙型肝炎感染患者对拉米夫定耐药的研究CSCD

目的了解拉米夫定（3TC）治疗艾滋病（AIDS）/慢性乙型肝炎（CHB）合并感染患者对3TC的耐药情况。方法收集广州市第八人民医院2005年至2010年接受含3TC方案治疗的AIDS/CHB合并感染患者的资料,检测患者抗病毒治疗前和治疗12个月、24个月、36个月、48个月和60个月时HBV DNA含量,对HBV DNA阳性患者,扩增HBV逆转录酶区,分析HBV变异情况。结果185例患者符合入选标准,治疗前均未发现3TC耐药。治疗过程中,有29例患者检出3TC耐药,其中7例患者在两个不同的随访点检出耐药。29例患者中,有9例治疗前HBV DNA阴性,3例患者是治疗12个月时检出耐药。与非耐药患者相比,耐药患者HBeAg阳性的比例更高（65.5%比33.3%,P＝0.001）,基线HBV DNA水平更高（7.49拷贝/ml比6.59拷贝/ml,P＝0.017）,使用3TC时间明显延长（40个月比26.5个月,P〈0.001）。3TC耐药模式有四种：rtM204I （n＝7）、rtL180M （n＝2）、rtL180M＋rtM204V/I（n＝23）和rtL80V＋rtM204I （n＝4）。结论本地区AIDS/CHB合并感染患者对3TC耐药率低。治疗前HBV DNA阴性患者亦可较早出现耐药。     

代谢综合征对结直肠管状绒毛状腺瘤的影响因素分析

目的分析结直肠管状绒毛状腺瘤与代谢综合征的关系。 方法收集2017年6月至2020年12月南方医科大学附属惠阳医院经手术病理确诊的271例患者。其中管状腺瘤患者203例，管状绒毛状腺瘤患者68例。比较结直肠管状腺瘤与管状绒毛状腺瘤患者纤维结肠内镜检查的基本情况，结直肠息肉一般特征、数目、病理，以及代谢综合征相关指标水平等。采用Logistic多因素回归分析山田分型、最大息肉直径、代谢综合征相关指标与结直肠管状绒毛状腺瘤的关系。 结果累计息肉数目最多部位、最大息肉好发部位、病理为管状绒毛状腺瘤/管状腺瘤好发部位均为乙状结肠。结直肠管状腺瘤与管状绒毛状腺瘤患者山田分型、最大息肉直径、血清甘油三酯水平差异均有统计学意义（P均<0.01），而高血压、脂肪肝、空腹血糖受损或糖尿病情况及总胆固醇水平、血清尿酸水平、癌胚抗原水平差异均无统计学意义（P>0.05）。Logistic多因素回归分析结果显示，山田分型及最大息肉直径与结直肠管状绒毛状腺瘤有关联[Wald χ²=5.756，Exp（B）=2.494，P=0.016；Wald χ²=23.173，Exp（B）=12.842，P<0.001]，而血清甘油三酯水平与结直肠管状绒毛状腺瘤无关联。 结论与结直肠管状腺瘤患者相比，代谢综合征与结直肠管状绒毛状腺瘤发病并无直接关联，但息肉直径大小及山田分型与结直肠管状绒毛状腺瘤发病有关联。     

外源性EGR1瞬时表达对骨肉瘤细胞细胞周期和凋亡的影响

目的: 获得人早期生长反应1(EGR1)基因,并在人骨肉瘤细胞中瞬时表达,研究该基因在人骨肉瘤细胞中的作用,并探讨其可能的作用机制。方法: 以人胎盘组织为模板,巢式PCR(nest PCR)扩增获得EGR1全长基因,克隆入真核表达载体pcDNA3.1(-),酶切、PCR鉴定并测序正确后,命名为pcDNA-EGR1。脂质体法将重组载体转染人骨肉瘤细胞U2OS,实时荧光定量PCR(qPCR)和免疫印迹检测目的基因的表达; MTT法检测细胞生长和增殖情况;流式细胞仪和DAPI染色检测细胞的周期变化和凋亡情况;qPCR检测细胞中与细胞周期、凋亡相关基因的表达变化情况;短发夹RNA(shRNA)干扰EGR1后,检测细胞的变化情况。结果: 成功获得了人EGR1基因并构建了其重组表达载体pcDNA-EGR1。EGR1可有效地在U2OS中瞬时表达;可显著抑制细胞增殖(P<0.05),并呈一定的剂量依赖。EGR1可引起细胞周期停滞于G₀/G₁期,并促进凋亡率增加(P<0.05)。EGR1可引起细胞核出现明显的固缩和凋亡表型。EGR1可引起周期相关基因表达下调,凋亡相关基因表达则显著上调。shRNA干扰EGR1后,细胞凋亡表型和EGR1所调控的相关基因表达水平与对照组一致。结论: EGR1具有抑制骨肉瘤细胞增殖作用,能调节骨肉瘤细胞周期和凋亡相关基因的表达,从而促进细胞周期停滞和凋亡率的增加。     

人端粒酶反转录酶和绿色荧光蛋白融合基因慢病毒表达载体的构建

外源性端粒酶反转录酶的表达可重建端粒酶活性,诱导细胞永生化。 目的：采用慢病毒载体作为基因转移载体,克隆人端粒酶反转录酶的编码区全序列,同时选用绿色荧光蛋白作为目的基因表达标志物,构建人端粒酶反转录酶慢病毒表达载体。 设计、时间及地点：开放性实验,单一样本观察,于2007-06/2008-03 在暨南大学生物工程研究所及暨南大学附属第一医院中心实验室完成。 材料：pBABE-puro-hTERT质粒由Robert Weinberg教授惠赠,质粒pDONR221,pLenti6/V5-DEST,ccdB Survival,Stbl3及293FT细胞由暨南大学生物工程研究所提供。 方法：以pBABE-puro-hTERT质粒为模板聚合酶链反应法获取目的基因人端粒酶反转录酶（包含酶切位点BglⅡ、HindⅢ）,通过BP反应克隆至pDONR221,以质粒pEGFP-N1为模板,以聚合酶链反应法获取目的基因增强型绿色荧光蛋白(包含酶切位点Hind Ⅲ,Bg Ⅲ),通过酶切及连接反应形成pDONR221-hTERT-EGFP。采用LR重组酶将pDONR221-hTERT-EGFP和pLenti6/V5-DEST进行重组反应,形成pLenti6/V5-DEST-hTERT-EGFP。将pLenti6/V5-DEST- hTERT-EGFP与包装质粒混合,利用脂质体共转染293FT细胞。 主要观察指标：通过酶切、聚合酶链式反应及测序验证重组质粒pDONR221-hTERT-EGFP和pLenti6/V5-DEST- hTERT-EGFP是否构建成功。包装重组慢病毒,应用荧光显微镜观察报告基因绿色荧光蛋白在293FT细胞中的表达情况。 结果：测序发现慢病毒入门载体pDONR221包含目的基因hTERT 1 547位点存在点突变(原碱基A变成G）,通过定点突变技术成功诱变并鉴定慢病毒表达载体pLenti6/V5-DEST-hTERT-EGFP成功构建。转染后的293FT细胞在荧光显微镜下观察可见强绿色荧光。 结论：实验成功构建了人端粒酶反转录酶和绿色荧光蛋白融合基因的慢病毒表达载体,为人端粒酶反转录酶稳定转染提供快速、简洁的方法。     

黄连素配合高脂饮食控制对NAFLD大鼠肝组织PPARα mRNA及蛋白表达的影响

目的:观察黄连素对非酒精性脂肪性肝病(non-alcoholic fatty liver disease,NAFLD)大鼠肝组织过氧化物酶体增殖物激活受体α(peroxisome proliferator activated receptor alpha,PPARα)mRNA和蛋白表达的影响,探讨其作用机制。方法:66只雄性SD大鼠随机分为高脂饮食组56只和正常对照组10只。12 w时,从高脂饮食组中随机抽取6只进行肝脏病理切片,证实造模成功后,将造模组大鼠随机分为5组:黄连素高剂量组、黄连素低剂量组、东宝甘泰组、模型组、自然恢复组。除模型组继续给予高脂饲料外,其余各组均以基础饲料喂养。同时各治疗组给予相应药物灌胃,其余各组灌胃相应剂量蒸馏水。8 w后,所有大鼠腹主动脉取血及肝组织,全自动生化分析仪检测肝脂、血脂及肝功能;光镜观察肝组织病理形态变化;RT-PCR方法检测肝组织PPARαmRNA表达;免疫组织化学方法检测肝组织PPARα蛋白表达。结果:与模型组比较,药物治疗各组及自然恢复组肝脏脂变程度明显减轻;血脂、肝脂及肝功能指数显著降低(P0.01),肝组织PPARαmRNA和蛋白表达均有不同程度的上调(P0.05),尤以黄连素高剂量组最明显。结论:黄连素配合高脂饮食控制可显著促进肝组织PPARαmRNA及蛋白的表达,这可能是其防治NAFLD的重要机制之一。     

母婴HBV垂直感染与替诺福韦酯阻断治疗

综述了母婴HBV垂直感染及其发生标准预防免疫失败原因、孕期使用替诺福韦酯(TDF)来阻断其母婴垂直感染的策略等最新进展进行综述,为今后开展更多的临床研究及其防治策略提供指导意见,目的是为了更科学地进行临床管理,真正达到HBV母婴"零"传播。     

成人不明原因发热诊断新方法

 不明原因发热（fever of unknown origin, FUO）是内科临床常见的疑难病症,最早由Keefer和Leard^［1］描述,随后Petersdorf和Beeson^［2］提出FUO的概念。近30年来临床上开展细胞免疫学、分子生物学、显像诊断技术等新方法,辅助FUO的病因诊断。以下就成人FUO的诊断现状、新方法及其临床价值做一概述。     

血管紧张素转化酶2-血管紧张素(1-7)-Mas受体轴在胚胎生长发育中的重要性

我国肥胖症、高血压和2型糖尿病等代谢性疾病的发病率正在迅速增加,而且发病年龄也趋向年轻化,但对于其病因还没有统一的认识.近年来提出的"健康与疾病的发育起源(developmenta lorigins of health and disease,DOHaD)"学说,是指经历宫内不良环境的新生儿在成年期罹患心血管疾病、肾脏病和代谢综合征等诸多疾病的风险增加,且存在性别差异,但有关DOHaD的分子生物学作用机制尚不清楚.肾素-血管紧张素系统(renin-angiotensin system,RAS)是机体重要的心血管-内分泌激素系统,血管紧张素转化酶2(angiotensin-converting enzymetype2,ACE2)-血管紧张素(1-7)[Angiotensin(1-7),Ang(1-7)]-Mas受体轴是新的RAS组分,在组织器官发生与分化中发挥重要作用,参与调控胎盘血管的形成及局部活性物质的产生,可影响胎儿生长.     

孕妇HBsAg携带状态对早产发生的影响

摘要：目的探讨孕妇乙肝表面抗原阳性对早产的发生是否有影响。方法回顾性分析2009 年5 月~2011 年7 月期间188 例
HBsAg阳性孕妇的妊娠期并发症、危险因素及妊娠结局,系统抽取同期病案号末位数是1和9的HBsAg阴性孕妇265例作为对
照组。结果孕妇HBsAg阳性胎盘前置发生率明显高于HBsAg阴性孕妇(2.66% vs 0%,P=0.03);阳性组<37周的早产发生率明
显高于阴性组（12.23% vs 6.04%,P=0.02）。两组之间妊娠高血压、子痫前期、妊娠期糖尿病、糖耐量异常、胎膜早破、剖宫产和产
后出血的发生率无统计学差异(P>0.05)。两组之间新生儿体质量、身长、头围、Apgar 评分等婴儿发育指标也无显著差异(P>
0.05)。Logistic回归分析显示,孕妇HBsAg阳性、ALT升高、胎盘前置以及重度子痫前期是早产的危险因素。结论HBsAg阳
性孕妇可增加早产的风险,但它并不影响胎儿宫内生长。
     

慢性乙型肝炎患者睡眠状况分析与护理干预

目的 探讨影响慢性乙型肝炎患者睡眠的相关因素及护理干预措施.方法 通过对286例慢性乙型肝炎患者采用入院评估表的方式,面对面交流来完成,对患者入院前睡眠状况进行分析,同时进行1周的护理干预和辅助治疗.结果 多数慢性乙型肝炎患者的睡眠质量下降,其影响因素主要是心理因素、环境因素、病理生理因素、治疗护理因素、入睡习惯和方式等等.结论 经过护理干预后,慢性乙型肝炎患者的睡眠质量有一定改善.