全血磷测定方法的初步研究

有关全血磷含量测定方法的文献尚未见报道。目前测定血磷(指血清无机磷)的方法仅能测知全血磷含量的一小部分,用的试剂较多,配制较麻烦,血清带有色素、脂肪或血红蛋白等对测定结果有所影响。本法可避免上述因素的影响,平均回收率为98.8%,变异系数为5.2～6.1%,检测限为0.1μg/2ml,仅用2μl血样,操作简便快速,不需特殊设备,适     

介入治疗移植肾动脉狭窄的疗效观察

目的　评价介入治疗移植肾动脉狭窄 (TRAS)的疗效。资料与方法　 2 0 0 0年 1月～ 2 0 0 2年 11月 ,采用经皮血管内成形术 (PTA)和 /或内支架治疗 2 0例TRAS患者 ,其中PTA治疗 14例次 ,内支架治疗 9例次。对治疗前后的血压、降压药物和血肌酐进行随访。结果　采用PTA治疗者 ,收缩压、舒张压、降压药物和血肌酐由术前的(15 7± 17)mmHg、(97± 7)mmHg、(1.5± 1.0 )种、(5 12± 2 96 ) μmol/L ,术后 1周降为 (137± 11)mmHg(P <0 .0 5 )、(86± 7)mmHg(P <0 .0 1)、(0 .9± 1.0 )种 (P >0 .0 5 )、(2 76± 2 2 6 ) μmol/L(P <0 .0 5 ) ,术后 6个月降为 (12 8±10 )mmHg(P <0 .0 1)、(83± 7)mmHg(P <0 .0 1)、(0 .8± 0 .9)种 (P >0 .0 5 )、(14 5± 5 5 ) μmol/L(P <0 .0 1)。采用内支架治疗者 ,收缩压、舒张压、降压药物和血肌酐由术前的 (15 4± 31)mmHg、(93± 12 )mmHg、(1.6± 1.0 )种、(338±14 2 ) μmol/L ,术后 1周降为 (134± 17)mmHg(P >0 .0 5 )、(82± 7)mmHg(P <0 .0 5 )、(0 .8± 1.0 )种 (P >0 .0 5 )、(197±76 ) μmol/L(P <0 .0 5 ) ,术后 6个月为 (132± 9)mmHg(P >0 .0 5 )、(83± 4 )mmHg(P <0 .0 5 )、(0 .5± 0 .8)种 (P >0 .0 5 )、(2 0 4± 16 9) μmol/L(P <0 .0 5 )。总     

介绍一种剥离胆囊的方法

介绍一种剥离胆囊的方法安徽省广德县人民医院（２４２２００）陈勇，陈维康我科自１９９０年以来，用吸引器内套管，利用负压划割法剥离胆囊，行胆囊切除１６８例。手术顺利，术后恢复良好，效果满意。现介绍如下。１操作方法胆囊切除术的其他操作方法，按常规进行。距肝...     

血清炎性因子在骨折延迟愈合患者富血小板血浆治疗中的变化

探讨血清炎性因子在骨折延迟愈合患者富血小板血浆治疗中的变化。方法 选取2020年4月—2021年4月我院收治的98例骨折患者,均予以富血小板血浆联合钢板内固定手术治疗,根据术后6个月内是否发生骨折延迟愈合分为延迟愈合组（37例）和正常愈合组（61例）。分别于骨折后1、4、8、12周采集患者血清样本,采用酶联免疫吸附法检测血清人可溶性细胞间粘附分子-1（sICAM-1）、人可溶性血管细胞粘附分子-1（sVCAM-1）、肿瘤坏死因子-α（TNF-α）等炎症因子水平,并绘制ROC曲线,评估其对骨折延迟愈合的预测价值。采用酶联免疫双抗体夹心法检测血清骨钙素（BGP）、Ⅰ型胶原氨基端肽原（PINP）、碱性磷酸酶（ALP）、胰岛素样生长因子-1（IGF-1）等骨生化代谢指标水平,并采用Pearson分析骨生化代谢指标与炎症因子的关系。结果 骨折1周时,两组患者血清sICAM-1、sVCAM-1、TNF-α等炎症因子水平比较差异无统计学意义（P＞0.05）;骨折4、8、12周时,延迟愈合组患者血清sICAM-1、sVCAM-1、TNF-α等炎症因子水平均高于正常愈合组（P＜0.05）,且随着时间推移,两组患者血清sICAM-1、sVCAM-1、TNF-α水平先升高后降低,但延迟愈合组炎症因子水平波动较正常愈合组更明显（P＜0.05）。骨折1周时,两组患者血清BGP、PINP、ALP、IGF-1等骨生化代谢指标水平比较差异无统计学意义（P＞0.05）,且两组各时间点血清ALP水平比较差异无统计学意义（P＞0.05）; 骨折4、8、12周时延迟愈合组患者血清BGP水平逐渐升高并高于正常愈合组,血清IGF-1水平逐渐升高但低于正常愈合组,骨折8、12周时延迟愈合组患者血清PINP水平低于正常愈合组（P＜0.05）。Pearson相关性分析结果显示,血清sICAM-1、sVCAM-1、TNF-α等炎症因子水平与血清BGP呈正相关（r=0.523,P＜0.001）,与血清IGF-1呈负相关（r=-0.467,P＜0.001）。ROC曲线分析结果显示,骨折8周时,血清炎症因子水平诊断骨折延迟愈合的曲线下面积高于0.7,提示其具有较好诊断价值,且联合检测对骨折延迟愈合诊断的灵敏度更高（P＜0.05）。结论 延迟愈合骨折患者血清sICAM-1、sVCAM-1、TNF-α等炎症因子指标水平随骨折时间增加呈现先升高后降低变化,炎症因子指标水平波动明显,且术后8周时血清炎症因子对预测骨折延迟愈合具有一定参考意义     

基于AFM形态学观察的细胞铺展机理的假想

本研究提出了细胞铺展机理的三个可能模型：“橡皮泥”模型、“钢筋混泥土”模型和“自我膨胀”模型。应用原子力显微镜观察了处于不同铺展程度、具有不同形态的人骨髓间充质干细胞的整体和局部外部形貌，并根据观察结果，初步推断“钢筋混泥土”模型可能就是细胞铺展的机理。尽管证据还不够充分，需要进一步的研究，却为今后的研究提供了可能的模型和研究手段。细胞铺展机理的解决必将进一步促进细胞生物学和生物医学工程等学科的发展。     

RT-PCR-ELISA方法检测甲肝减毒活疫苗病毒滴度的初步研究

目的 应用核酸扩增产物测定的固相杂交酶联显色法(RT-PCR-ELISA)检测甲肝减毒活疫苗病毒滴度。方法 应用RT-PCR-ELISA。将标记有生物素的寡核苷酸引物所扩增的疫苗病毒基因产物。与微孔反应板上的特异性探针进行快速杂交，通过辣根过氧化物酶标记的链亲和素进行酶联显色。读取吸光度(A值)。判断结果。应用此法检测了11批甲肝活疫苗滴度。并与常规细胞培养法(CCID50)比较。结果 本方法与细胞培养法的敏感性相仿，具有简便、快速、特异的优点。结论 RTPCR-ELISA法有望代替常规细胞培养法应用于甲肝减毒活疫苗病毒滴度的检测。     

纯化的结核杆菌多肽抗原刺激人γδT细胞的效应分析

目的：探讨从结核杆菌多肽抗原(Mtb-Ag)纯化的多肽(C主肽)对人新鲜外周血γδT细胞的促增殖效应以及对已活化扩增的T细胞再次刺激的激活效应。方法：采用不同剂量的C主肽体外刺激健康人外周血PBMC，培养10天时经流式细胞仪检测细胞表型；另外以γδT细胞活化标志分子CD69的表达为指标，分析C主肽对已被Mtb-Ag激活扩增13天的γδT细胞再次刺激的激活效应。同时以MTT法检测C主肽的再刺激对已活化扩增的γδT细胞的促增殖活性。结果：结核杆菌C主肽对人新鲜的γδT细胞具有显著扩增效应；当C主肽再刺激已经活化的γδT细胞时，可使其显著表达CD69分子，同时对γδT细胞具有显著促增殖活性。结论：结核杆菌C主肽可能是Mtb-Ag发挥特异性激活人γδT细胞的有效成分。     

单克隆抗体亲和柱纯化尿激酶的研究

尿激酶是一种纤溶酶原激活剂,由肾脏合成并释放到尿中。临床上用于治疗血栓,商品酶是从大量人尿中提取,纯化方法复杂,不易得到纯品。抗尿激酶单克隆抗体亲和柱有可能简单而有效地纯化尿激酶,为此我们采用杂交瘤技术制备了七个分泌抗尿激酶单克隆抗体的杂交瘤。它们分泌的单克隆抗体分别命名为S_(31)、S_(26)、N_(14)、N_(17-2)、N_(30)、N_(34)和N_(36)。     

抗Cyclin D1胞内抗体AD5N基因真核表达载体的构建及其对乳腺癌细胞增殖的抑制作用

目的：构建细胞核定位的抗CydinD1胞内抗体基因的真核表达载体并分析其对乳腺癌细胞增殖的抑制效应。方法：利用PCR技术和分子克隆技术，构建编码细胞核定位的抗CydinD1胞内抗体基因（AD5N）的真核表达载体pcDNA3．1-ADSN，利用脂质体介导法转染MCF-7细胞，RT-PCR、间接免疫荧光、Westernblot和流式细胞术分析该胞内抗体基因ADSN在MCF-7细胞中的表达、定位及抑瘤效应。结果：经限制性内切酶分析及序列分析发现，成功构建编码细胞核定位的抗CyclinD1胞内抗体（AD5N）基因的真核表达载体pcDNA3．1-ADSN，基因片段为855bp，编码285个氨基酸，分子量约为30kD。RT-PCR、免疫荧光及Westernblot实验结果显示，仅在转染胞内抗体基因的MCF-7细胞中存在该胞内抗体的表达，并且主要分布在细胞核区域。与野生型MCF-7细胞和转染空质粒的细胞相比，在MCF-7／pcDNA3．1-ADSN细胞中ADSN的表达可明显抑制MCF-7细胞增殖，显著诱导细胞凋亡（P〈0．01），使G0-G1期细胞周期指数增高12．64％，S期指数下降15．22％，凋亡细胞指数上升9．15％。结论：细胞核定位的抗CyclinD1胞内抗体ADSN基因的表达，可有效抑制乳腺癌细胞的增殖，阻滞细胞周期进展，并诱导细胞凋亡。     

血液透析联合低频度血液灌流治疗慢性肾脏病患者矿物质及骨代谢异常

目的:观察血液透析联合低频度血液灌流治疗慢性肾脏病(CKD)-矿物质及骨代谢(CKD-MBD)异常的疗效。方法:选取2016-01-2018-06在本院血透中心接受治疗的68例维持性规律血液透析CKD合并MBD患者,按照入院先后顺序分为对照组和观察组,对照组给予单纯血液透析(HD)治疗,观察组给予血液透析联合低频度血液灌流(HP)治疗,两组治疗疗程均为三个月。比较两组患者治疗前后肾功能指标:血肌酐(Scr)、尿素氮(BUN)、尿酸(UA),钙磷代谢指标:钙(Ca)、磷(P)、钙磷乘积,以及甲状旁腺素(iPTH)、碱性磷酸酶(ALP)和成纤维细胞生长因子23(FGF-23)等水平变化。结果:两组治疗前Scr、BUN、UA、Ca、P、钙磷乘积、iPTH、ALP及FGF-23水平均无明显差异(P0.05)。两组治疗后与同组治疗前比较:观察组治疗后肾功能指标、血P、钙磷乘积、iPTH、ALP和FGF-23水平均显著降低(P0.01或P0.05);对照组治疗后只有肾功能指标显著降低(P0.01);两组治疗后比较:观察组治疗总有效率显著高于对照组,肾功能指标、血P、iPTH、钙磷乘积、ALP、FGF-23水平显著低于对照组(P0.05),但血Ca水平比较无统计学意义(P0.05)。结论:血液透析联合低频度血液灌流能有效纠正CKD患者高磷血症及继发性甲状旁腺功能亢进(SHPT),改善MBD异常,提高透析患者生活质量及改善预后。