噬菌体展示技术筛选结核分枝杆菌PPE17蛋白的特异性结合肽

目的运用噬菌体展示技术,对结核分枝杆菌PPE17蛋白特异性结合肽进行了初步筛选。方法从结核分枝杆菌基因组中扩增PPE17基因,克隆到pET28a中,在大肠杆菌BL21中表达,Ni2+柱纯化,并用SDS-PAGE和Western blot鉴定。将纯化的PPE17蛋白包被到ELISA板中,用噬菌体7肽库进行筛选,经4轮淘选后,随机选取噬菌斑进行测序,并用DNAMAN对阳性克隆所编码的多肽氨基酸序列进行分析比较。结果成功构建并表达了PPE17抗原,获得分子量约为37kD的可溶性蛋白。从第4轮的洗脱物中,随机挑选20个噬菌斑。测序结果可翻译成8种多肽分子,其中重复6次的多肽序列为LKWGHVY。结论通过噬菌体展示技术筛选到PPE17蛋白的特异性结合肽,有望成为鉴定该抗原的小分子诊断制剂。     

氯霉素处理对急性缺氧大鼠脑线粒体氧化呼吸功能变化研究

本文通过观察氯霉素处理大鼠急性缺氧暴露后脑线粒体呼吸功能和细胞色素C氧化酶(COX)活性变化,了解线粒体基因组表达在缺氧引起线粒体呼吸功能改变中的作用。作者选取成年雄性Wistar大鼠40只(体质量140g～220g),随机分为4组：平原对照组(control,C组)、氯霉素药物处理组(medication,M组)、单纯缺氧组(hypoxia,H组)和氯霉素药物处理 缺氧组(medication hypoxia,MH组),     

医务人员锐器伤监测分析及其对策

目的 了解医务人员发生锐器伤状况,探讨有效预防对策.方法 对医院2011年8-9月1141名医务人员锐器伤发生情况进行了回顾性调查,并对照医院近9个月的上报数据进行分析.结果 共发生锐器伤73人次,人群分布以实习生和护士为主,发生率为8.33％和7.88％;科室分布以普通病房、手术室和补液室为主,分别占38.36％、19.18％和16.44％;补液配置和一次性注射器引起的锐器伤概率最大;9个月的上报结果显示,医务人员中护士上报最多,科室类型中手术室上报最多.结论 应加强医务人员职业防护培训,提高医务人员对锐器伤的正确认识,增强防护措施,以降低锐器伤的发生.     

浦东地区慢性阻塞性肺疾病急性加重患者药物流行病学调查

目的分析上海浦东地区慢性阻塞性肺疾病(COPD)急性加重期住院患者抗菌药物的药物流行病学特征,为促进临床合理用药提供参考依据。方法方便抽样上海市浦东新区某2所三级甲等医院,自2014年1月1日—2017年1月1日COPD住院患者中随机抽取3 000例,获得COPD急性加重期患者的信息,提取其抗菌药物使用的药物流行病学信息。结果 COPD急性加重期患者1 784例,其中男性920例(51.57%),女性864例(48.43%),年龄(77.5±12.4)岁;COPD急性加重期住院患者使用例次最多的抗菌药物类别为头孢菌素类,5 891例次(46.82%,5 891/12 581);使用例次最多的抗菌药物为头孢哌酮钠舒巴坦钠,875例次(6.95%,875/12 581);药物利用指数最大的为左氧氟沙星(2.06),最小的为利奈唑胺(0.49);药物利用指数接近于1的分别为头孢唑肟钠(0.91),亚胺培南/西司他丁钠(0.99),利福平(0.99),环丙沙星(1.08),比阿培南(1.10)。结论上海浦东地区COPD急性加重期住院患者抗菌药物利用较合理,但仍存在不足,还需进一步提高合理用药水平。     

三种不同方法保存的兔角膜内皮细胞形态学观察

目的 通过观察兔角膜内皮细胞形态,了解不同保存方法和不同保存时期及时间点对角膜内皮细胞活性和密度的影响.方法 采用短期湿房4 ℃保存6 h、D-X角膜中期保存液4 ℃保存3 d、长期深低温保存3个月,取3组各自限定时间的保存角膜片进行检测,分别行角膜内皮细胞茜素红和台盼蓝活性染色、光学显微镜观察及图像分析.结果 长期深低温保存后的兔角膜内皮细胞活性率、细胞密度及六边形细胞率低于前两组,细胞面积高于前2组,均具有统计学差异.结论 正确掌握3种方法,维持角膜内皮细胞生物活性,虽然深低温保存方法对角膜内皮细胞活性和密度有一定影响,但其活性率在80%以上,仍在角膜移植手术可接受的范围内.     

新型冠状病毒特异性抗体检测性能评价及临床价值

目的:评价新型冠状病毒(SARS-CoV-2)免疫球蛋白M(IgM)和免疫球蛋白G(IgG)抗体检测的诊断性能及在新型冠状病毒肺炎(COVID-19)疑似患者中的临床诊断价值.方法:本研究采用回顾性研究方法,收集2020年1月3日至2月28日在武汉市肺科医院住院患者301例,其中197例为SARS-CoV-2核酸检测阳...     

淀粉酶脂肪酶测定在急性胰腺炎诊疗中的应用

目的：通过检测血、尿淀粉酶、脂肪酶水平，明确该综合指标在急性胰腺炎诊治中的意义。方法：淀粉酶采用IFCC推荐使用的EPS－G7，脂肪酶采用目前世界上较先进的UV法，在测定标本的同时进行质控测定。结果：采用上述方法后，对胰腺炎的诊断率大大提高，达到90％，并同时对疗效观察、预后判断均有临床指导意义。结论：适时测定血、尿淀粉酶、脂肪酶水平，在急性胰腺炎的诊断、治疗、疗效观察及预后判断中均有重要的临床意义。     

经口鼻插管术并发症的教学设计与实践

目的 将建构主义理论、认知理论引入到经口鼻插管护理教学中,探讨经口鼻插管术多媒体课件和模拟场景的设计及应用.方法 整合经口鼻插管术并发症的护理教学内容,采用文字、动画、影像、模拟等多种方法表现解剖、生理、病理、护理等多学科知识难点,设计多媒体课件和模拟临床情境,对112名护理本科生进行实验性教学和60名学生进行模拟教学,并于授课前、后调查学生对相关内容的了解掌握情况和教学效果评价等.结果 应用新课件后测验成绩明显优于授课前(P＜0.01).101名(90.2%)欢迎本课件,60名参加模拟教学的学生中55名(91.7%)认为模拟教学能提高学习兴趣,有利于培养病情观察能力、应急应变能力、动手能力、运用知识的能力、发现和解决问题的能力、护理操作时的急救意识及团队协作精神.结论 经口鼻插管术并发症护理的多媒体课件具有生动形象、简洁明了、易懂易记等特点,与模拟教学结合有利于学生理解和掌握相关内容.     

RCS大鼠视网膜色素变性过程中内源性干细胞激活的初步研究

目的研究遗传性视网膜色素变性大鼠(Royal College of Surgeon's rat,RCS rat)在视网膜变性发展过程中是否有内源性视网膜干细胞(retinal stem cells,RSCs)激活.方法RCS-p (视网膜含色素的变性大鼠)按出生后视网膜变性的发展状况分为变性早期(RCS 15 d)、中期(RCS 30 d)、晚期(RCS 90 d)3个时相点,分别采用相应时期的RCS-rdy p (视网膜含色素的正常大鼠)作为对照组(control groups,C15 d,C30 d,C90 d),每组4只8眼,对各组视网膜切片进行免疫荧光组织化学(抗Chx10)实验,以鉴定视网膜干细胞;进一步采用Western blot检测各组视网膜神经上皮总蛋白中Chx10表达.结果①各正常组及变性15 d大鼠视网膜各层抗Chx10免疫荧光检测均为阴性,变性中、晚期视网膜光感受细胞层部位Chx10免疫荧光阳性;②Western blot检测各变性组视网膜神经上皮总蛋白中Chx1O均有表达,但变性中期Chx10表达显著高于早期和晚期(P＜0.05).结论 RCS大鼠变性过程中视网膜感光细胞层出现视网膜干细胞激活.     

培养大鼠视网膜神经节细胞的形态学与电生理学特性

目的比较不同培养天数大鼠视网膜神经节细胞(retinal ganglion cells,RGCs)形态学特性与电生理功能,探讨其形态与功能的最佳培养时期。方法采用出生后0dLong Evans大鼠,取视网膜培养神经节细胞,分别于培养后第1d、4d、7d3个时间点观察细胞形态,并行膜片钳全细胞记录研究其静息膜电位(resting membrane potential,RMP)和动作电位(action potential,AP)的阈值、幅度及波宽。结果共记录到53个RGCs,根据AP类型RGCs分为单峰型(39个)、瞬变型(11个)和持续型(3个),其中以单峰型为主(占73.6%)。培养1d RGCs不易诱发AP,多数细胞需增加刺激强度后方可诱发出AP;培养4d时绝大多数RGCs给予20PA的刺激即可诱发出AP;培养7d时虽较容易诱发AP,但由于此时细胞存活状态较差,部分细胞(共记录28个细胞,其中8个不能诱发AP)给予不同强度的刺激,均不能诱发出AP。不同培养时期的RGCs静息膜电位和AP的特性无显著差异。结论随着培养时间的延长RGCs形态逐渐趋于成熟,但电生理功能仍处于幼稚状态;培养4d的RGCs形态和电生理状态最好。