细胞色素P450酶、谷胱甘肽转移酶多态性及其与肿瘤的关系

肿瘤的发生机制目前尚不明确，一般认为是环境因素和遗传因素相互作用的结果，P450酶属Ⅰ相代谢酶，可代谢多种化学物和药物，并可形成致癌性的物质，人谷胱甘肽－S转移酶（GST）属Ⅱ相代谢酶，是催化谷胱甘肽（GSH）与亲电子的外淅物结合的二聚体酶，并可灭活外源物，是使它们排出体外，它们在人群中呈多态性分析，肿瘤的遗传易感性与代谢酶遗传多态性是密切相关的。通常情况下，大多数致癌物的形成，首先通过I相代谢酶的活化（如P450酶），灭活主要通过II相代谢酶（如GST酶）进行的。因此，I相代谢酶与II相代谢酶的多态性往往决定癌症的发生率及发生类型。     

硫酸镉对FL/P450 1A1细胞中人肺癌易感基因P450 1A1的影响

目的　观察重金属化合物硫酸镉 (CdSO4 )在体外对人羊膜FL/P45 0 1A1细胞内P45 01A1DNA序列的改变作用 ,了解镉化合物对肺癌易感基因的影响。方法　利用不同剂量的CdSO4 处理FL/P45 0 1A1细胞 ,其半数抑制浓度 (IC50 )为 2 4.5 5mg/ml。以 1/ 4IC50 终浓度CdSO4 处理FL/P45 0 1A1细胞 48h后提取细胞pREP 9/P45 0 1A1质粒。由于 pREP 9缺少通用序列 ,BamHI酶切 ,低熔点琼脂糖电泳分离P45 0 1A1cDNA片段。BamHI酶切 pGEM～ 3Zf( ) ,CIP处理 ,并与 2倍摩尔P45 0 1A1cDNA片段混合 ,乙醇沉淀 ,沉淀物加入 18μlTE ,加 2 μl 10倍连接酶缓冲液 ,混匀 ,加10UT4DNA连接酶 ,混匀 ,12℃保温 16～ 2 0h。凝胶电泳分析连接结果。鉴定合格连接物转化DH5α菌 ,X gal喷洒对重组子进行蓝 /白颜色筛选。选择含重组子的宿主菌进行P45 0 1A1cDNA测序。结果　在体外 ,CdSO4 未引起FL/P45 0 1A1cDNA序列改变。结论　CdSO4 对FL/P45 0 1A1细胞中肺癌易感基因P45 0 1A1cDNA没有影响     

α—溴代肉桂醛的毒性研究

用急性毒性试验、亚急性毒性试验及传统致畸试验研究了α-溴代肉桂醛(BCA)的毒性,结果表明,该物质为低毒类化学物;对皮肤和眼睛有非特异性炎性刺激作用;对SD大鼠经口亚急性毒性试验最小作用剂量为369mg/kg体重;对SD大鼠无胚胎毒性及致畸作用。     

韭黄化学成分的研究

 韭黄的乙醚提取物在SOS试验中显示有显著的抗突变活性，用GC-MS联用仪分析，计算机检索，共分离出82个组分，鉴定了其中31个主要组分。大部分为含硫化合物，如1，3-二噻烷，2-甲基氧硫杂烷己烷、二（2-烯丙基）三硫化物、二甲基二硫化物等。     

30种常用蔬菜对SOS反应的抑制作用

本文应用SOS显色试验研究了30种常用蔬菜提取物对N-甲基-N′-硝基-N-亚硝胍、苯并[a]芘和紫外线诱发的大肠杆菌SOS反应的抑制作用。结果表明,大部分蔬菜的丙酮提取物具有抑制SOS反应作用,部分蔬菜的水溶性提取物具有抑制SOS反应作用,抑制不同致突变物引起的SOS反应具有专一性。韭黄、大蒜叶、蒜瓣水溶性提取物是典型的SOS反应强抑制物。SOS显色试验结果与Ames试验结果一致。     

两种带色样品对SOS反应的影响

目的　ＳＯＳ显色试验是一种通过显色测定大肠杆菌ＳＯＳ反应强度的遗传毒性试验 ,遗传毒物可诱导大肠杆菌ＳＯＳ反应。通过本实验可了解带色样品对ＳＯＳ反应的影响。方法　 37℃活化培养大肠杆菌ＰＱ378～ 10ｈ ,转接培养 2ｈ ,加样品后培养 2ｈ ,加入Ｂ缓冲液 30 0 μｌ,混匀 ,水浴 5ｍｉｎ ,加入显色剂一定时间后测定Ａ42 0 (吸光度 )值 ,求出诱导比值 ,大于2 0时为阳性。结果　 (见表 1)。　结论　带色样品对ＳＯＳ显色试验结果影响较大 ,去除本底色也不能消除带色样品对结果的影响 ,但可通过离心减少带色样品对结果的影响表 1　带色…     

RDS合并呼吸机相关性肺炎新生儿肺部菌群多样性分析

目的研究呼吸窘迫综合征(RDS)合并呼吸机相关性肺炎(VAP)新生儿的机械通气时间与其肺部菌群多样性之间的关系。方法选择行气管插管RDS新生儿70例,根据是否并发VAP分为VAP组和对照组。气管插管第1~5天采集两组患儿痰液标本,进行细菌DNA提取、PCR扩增以及变性梯度凝胶电泳试验,比较两组患儿肺部菌群丰度以及香农-维纳指数。结果VAP组患儿机械通气时间、拔管后吸氧时间、重复插管上机率及死亡率高于对照组(P＜0.05)。VAP组30例患儿中共检出36株菌株,以革兰氏阴性菌为主(72.22%),VAP组第2~4天肺部菌群丰度和香农-维纳指数均小于对照组(P＜0.05)。结论RDS患儿机械通气过程中VAP发生率高,机械通气过程中肺部菌群多样性降低可提示VAP的发生。     

吸烟人群细胞色素P4501A1和谷胱甘肽-S-转移酶M1的基因型

采用分子流行病学的方法 ,研究吸烟人群细胞色素 P450 1 A1基因 (CYP1 A1 )和谷胱甘肽 - S-转移酶 M1基因 (GST M1 )的多态性特征 .吸烟人群与同性别及同年龄 (年龄 <2周岁 )健康人群一对一配对 .提取血液基因组 DNA. PCR扩增 CYP 1 A1Exon7位点片段和 GST M1部分片段 .限制性酶切片段长度多态性 (RELP)分析 P450 1 A1片段和GST M1片段多态性特点 .结果显示吸烟组人群中CYP 1 A1 Exon 7Val/Val型 (mm型 )人群数增高 ,并有统计学差异 .吸烟组人群中 :GST M1缺失人群数略有升高 ;CYP1 A1 wm型人群数略有升高 ;CYP 1 A1 wm型 +mm型人群数略有升高 ,但这些变化均无统计学意义     

吸烟人群细胞色素P4501A1和谷胱甘肽-S-转移酶M1的基因型

采用分子流行病学的方法,研究吸烟人群细胞色素P450 1A1基因(CYP 1A1)和谷胱甘肽-S-转移酶M1基因（GST M1）的多态性特征.吸烟人群与同性别及同年龄（年龄<2周岁）健康人群一对一配对. 提取血液基因组DNA. PCR扩增CYP 1A1 Exon 7位点片段和GST M1部分片段. 限制性酶切片段长度多态性（RELP）分析P450 1A1片段和GST M1片段多态性特点. 结果显示吸烟组人群中CYP 1A1 Exon 7 Val/Val型（mm型）人群数增高,并有统计学差异. 吸烟组人群中：GST M1缺失人群数略有升高;CYP 1A1 wm型人群数略有升高;CYP 1A1 wm型＋mm型人群数略有升高,但这些变化均无统计学意义.