组织工程化软骨分泌的可溶性因子对骨髓基质干细胞诱导作用的实验研究

目的 探讨组织工程化软骨分泌的可溶性因子是否能够单独诱导骨髓基质干细胞(bone marrow stromai cells,BMSCs)软骨分化.方法 体外培养扩增猪BMSCs、猪关节软骨细胞以及皮肤成纤维细胞,以5.0×107/ml的细胞终浓度分别接种于聚羟基乙酸/聚乳酸(PGA/PLA)支架,应用隔离池进行隔离共培养.以软骨细胞-材料复合物与BMSCs-材料复合物隔离共培养为实验组,以皮肤成纤维细胞-材料复合物与BMSCs-材料复合物隔离共培养为对照组1,以单纯BMSCs-材料复合物为对照组2.各组标本均于体外培养8周后取材,通过大体观察,组织学,以及免疫组织化学,RT-PCR等方法对新生组织进行评价.结果 隔离共培养8周后,实验组软骨细胞材料-复合物诱导的BMSCs-材料复合物形成的组织略有缩小,外观类似软骨组织,组织学检测见软骨陷窝样结构,SafraninO染色可见软骨特异性基质分泌,免疫组化显示有大量Ⅱ型胶原沉积,RT-PCR检测组织表达Ⅱ型胶原、Ⅸ型胶原、COMP、Sox9等软骨特异性基因,提示形成了较成熟软骨样组织;而对照组成纤维细胞材料复合物诱导的BMSCs-材料复合物和未经任何诱导的BMSCs-材料复合物形成的组织淡黄色,明显缩小、变薄、质地较软,组织学检测均未形成软骨陷窝样结构,主要为纤维性成分,各种软骨特异性相关检测均为阴性.结论 软骨细胞分泌的可溶性因子能够单独诱导BMSCs软骨分化,可能是软骨细胞形成的微环境中发挥诱导作用的主要因素.     

损伤性肝外胆管狭窄的诊断和治疗

目的探讨损伤性肝外胆管狭窄的诊断方法和治疗效果。方法回顾性分析2000-2009年间损伤性肝外胆管狭窄21例的临床资料。结果 B超、CT、MRCP和ERCP是确诊肝外胆管狭窄常用的诊断方法。高位狭窄12例,其中6例为修复后再狭窄;低位狭窄9例。16例施行肝胆管-空肠Roux-Y吻合术,3例施行肝胆管-十二指肠间置空肠吻合术,2例施行胆总管-十二指肠侧侧吻合术。1例术后发生吻合口胆漏,经持续低负压吸引治愈。无死亡病例。全组均随访1年以上,其中10例已5年以上,均效果良好(95.23%)。结论肝外胆管狭窄一经诊断明确,即应考虑手术治疗;若胆管有急性炎症,应在炎症得到控制1个月后尽早手术为妥;肝胆管-空肠Roux-Y吻合是最常用的手术。     

儿童膝关节周围骨肉瘤的保肢治疗

儿童骨肉瘤保肢手术因术后肢体不等长及关节功能不理想等问题是骨肉瘤保肢术的难点.本院自1998年1月至2006年12月采用保肢手术治疗儿童膝关节周围骨肉瘤患者29例,取得良好效果,现报告如下.     

HBeAg阳性慢性乙型肝炎患者HBV基因型和亚型与肿瘤坏死因子α的关系

目的探讨福建部分地区HBeAg阳性慢性乙型肝炎(CHB)患者HBV基因型、亚型的分布与血清肿瘤坏死因子α(TNF-α)水平及其基因启动子区-238、-308位点基因多态性的关系。方法选取福建部分地区203例HBeAg阳性CHB患者,采用HBV基因分型(B、C基因型)荧光定量PCR法检测HBV基因型或HBVS基因为直接测序法检测HBV基因型、亚型;聚合酶链反应-限制性片段长度多态性分析(PCR-RFLP)的方法检测TNF-α-238及-308位点基因多态性,酶联免疫吸附试验(ELISA)测定血清TNF-α水平,并对结果进行统计分析。结果 HBV基因型B、C分别占58.6%、41.4%,其中150例HBVS基因为直接测序,Ba亚型81例,Ce亚型69例;B基因型患者平均年龄和体重指数(BMI)小于C型(P=0.020)。HBV基因型B、C的TNF-α水平、TNF-α-238和-308位点基因多态性的分布无统计学差异(P0.05)。结论福建部分地区HBeAg阳性CHB患者HBV基因型以B型为主,其次是C型,仅见Ba和Ce亚型;B基因型患者较年轻,BMI小于C型;但HBV基因型B、C与TNF-α水平、TNF-α-238和-308位点基因多态性可能无关。     

HTK液逆行灌注可减轻肝脏隔离化疗对大鼠的损伤

目的:建立大鼠肝脏隔离灌注化疗模型;探讨在大剂量化疗药物肝脏隔离灌注过程中,HTK液经肝静脉逆行灌注对肝脏的保护及减少全身泄漏作用。方法:将75只体重300～350g的雄性SD大鼠随机分为3组,每组25只;手术建立大鼠隔离灌注化疗模型。A组经肝动脉灌注含30mg/L三氧化二砷的林格液,门静脉灌注林格液,肝静脉为流出道。B组经肝静脉灌注林格液,门静脉为流出道,余同A组。C组经肝静脉灌注4℃组氨酸-色氨酸-酮戊二酸(Histidine-Tryptophan-Ketoglutarat,HTK)液,余同B组。各组于术后1、2、3、7d各随机处死大鼠5只,进行血清肝功能及肝组织病理学检查。A组和B组大鼠术中检测体循环和肝循环中的血药浓度。结果:各组动物血清ALT和AST峰值均出现在术后第1天,其后开始下降,至术后7d恢复正常。术后第1、2、3d,3组间的血清ALT、AST均数均有显著性差异(P0.05);光镜下观察肝组织,进一步证实了上述结果。A组与B组间体循环血药浓度差异有统计学意义(P0.05),而两组间的肝循环血药浓度相类似;表明逆行隔离灌注的体循环泄漏率较顺行隔离灌注组为低。结论:低温HTK液逆行灌注可显著减轻肝脏隔离化疗对大鼠的损伤,提高手术的安全性。     

人工寰齿关节置换与Magerl经关节螺钉固定的生物力学比较

[目的]测试人工寰椎齿状突关节置换后寰枢椎的稳定性和功能,并与Magerl经关节螺钉固定进行比较.[方法]将12例新鲜的成人头颈部标本随机分为两组,第1组在齿状突切除术后使用人工寰齿关节置换;第2组在齿状突切除术后使用Magerl经关节螺钉固定.对两组的每一标本分别测定完整状态、人工关节置换术后或经关节螺钉固定后的运动范围和中性区.[结果]人工关节置换术后与完整状态相比前屈、后伸、左右侧屈的运动范围和中性区明显减小(P＜0.05),左右旋转的运动范围无显著差异(P＞0.05),中性区增大(P＜0.05).Maged经关节螺钉固定后与完整状态相比前屈、后伸、左右侧屈及左右旋转的运动范围和中性区均明显减小(P＜0.05).人工关节置换术后及Magerl经关节螺钉固定后两组在前屈、后伸及左右侧屈的ROM稳定指数和NZ稳定指数相比均无显著差异(P＞0.05).[结论]实验证实在齿状突切除后,进行自行设计的人工寰椎齿状突关节置换可取得与Magerl经关节螺钉固定相似的前屈、后伸及左右侧屈稳定性,重要的是与完整状态相比左右旋转的运动范围无显著差异,最大限度的保留了寰枢复合体重要的旋转功能,对以往齿状突切除、脊髓减压后需要使用寰枢椎融合的患者,提供了另一种术式的选择.     

三种融合方式治疗腰椎滑脱症的疗效比较

[目的]比较后外侧植骨融合、后路椎体间植骨融合、椎体间植骨+后外侧植骨融合(360°融合)治疗腰椎滑脱症的疗效.[方法]对206例腰椎滑脱症患者均采用椎弓根螺钉复位内固定,根据不同适应证选择PLF 56例,PLIF 108例,360°融合42例,观察手术时间、术中出血量、融合率等,采用Nakai标准[1]进行评估.[结果]术后随访12～60个月,PLF组手术时间(82±12.3)min,术中出血量(218±103.7)ml,融合率83.9%,末次随访时优良率89.3%;PLIF组分别为(103±15.2)min,(305+159.2)ml,98.1%,89.8%;360°融合组分别为(121±16.8)min,(387±172.4)ml,100%,88.1%.三组间手术时间、术中出血量及融合率有统计学差异,优良率无统计学差异.[结论]在合理选择适应证的情况下,PIE、PLIF及360°融合治疗腰椎滑脱症可获得相似的优良率,PLIF及360°融合均可获得较高的融合率,但手术时间长,术中出血量大.     

成肌细胞-PLGA支架复合物修复比格犬半月板损伤的实验研究

目的 探讨成肌细胞种植于聚乳酸聚乙酸共聚物（PLGA）支架上,软骨定向诱导后植入比格犬体内修复半月板缺损的可能性.方法 将来源于比格犬的成肌细胞培养传代至第4代,收集后以5.0×106细胞/cm3材料体积密度将细胞接种于PLGA支架中,含50 ng/ml软骨源性形态发生蛋白-2（CDMP-2）和20 ng/ml转化生长因子β1（TGF-β1）软骨诱导培养基培养14 d.然后将细胞-支架复合体植入24只比格犬半月板缺损模型中,术后4、8、12周取材,采用大体观察、组织学、生物化学和生物力学作为评估指标.结果 术后4、8、12周各项检测结果显示PLGA支架材料逐渐降解吸收,而成肌细胞可逐渐合成分泌新生胶原,并最终形成半月板样纤维组织,而对照各组缺损区则仅见少许纤维组织样的修复组织.结论 利用成肌细胞经体外扩增及细胞因子刺激后,以PLGA支架为载体,按一定的细胞密度复合培养后,植入关节腔内修复半月板局部缺损的方法,是一种较为可行的修复半月板损伤的方法.     

逆行交锁髓内钉结合CPM治疗股骨远端骨折

目的总结应用逆行交锁髓内钉结合CPM治疗股骨远端骨折的经验。方法62例(A型42例,C型20例)股骨远端骨折采用逆行交锁髓内钉治疗,术后24h内使用CPM锻炼,按Merchan膝关节功能评分对结果评估。结果随访62例,随访时间10~18个月,平均14个月,骨折愈合时间平均为4个月。按Merchan膝关节功能评分,优38例,良21例,可3例,优良率达95%。结论逆行交锁髓内钉具有固定牢靠、创伤小、利于膝关节早期功能锻炼等优点,适用于股骨远端骨折。     

嵌入式胰胃吻合术临床应用分析

胰十二指肠切除术(pancreaticoduodenectomy,PD)和胰部分切除术是治疗胰腺和壶腹周围恶性肿瘤及部分胰腺良性疾病的主要术式.胰漏是上述手术常见并发症之一,也是导致PD术后患者死亡的主要原因.虽然胰空肠吻合是最常用的胰消化道重建方式,但胰胃吻合作为另外一种重建方式正越来越受到关注.我们在临床实践中对现有胰胃吻合术式进行改良,设计了一种新的胰胃吻合术式-胃壁内嵌入式胰胃吻合术(inserting pancreaticogastrostomy,IPG),现将临床应用情况报告如下.