异基因骨髓移植治疗慢性粒细胞性白血病3例报告

异基因骨髓移植治疗慢性粒细胞性白血病３例报告黄志光，李夏新，李春富，钱新华，冯晓勤，赵洪宁，张肇和我科于１９９３年５月至１９９４年４月对３例慢性粒细胞性白血病患者行异基因骨髓移植，均获成功，现报道如下：材料和方法一、患者和供者的一般情况３例患者均为男...     

丁酸钠对K562细胞系γ珠蛋白基因表达的诱导作用及机制

目的:研究丁酸钠对K562细胞系γ珠蛋白基因表达和胎儿血红蛋白合成的诱导作用及机制.方法:以丁酸钠(0.5 mmoL/L)诱导72 h的K562细胞为实验组,设K562亲本细胞和SB203580(10 μmol/L)处理1 h后用丁酸钠(0.5 mmoL/L)诱导72 h 的K562细胞为阴性对照组,设羟基脲(100 μmol/L)诱导72 h的K562细胞为阳性对照.分别提取细胞总RNA 和总蛋白.采用RT-PCR、Western blotting和联苯胺染色方法检测γ珠蛋白基因、胎儿血红蛋白和p38表达及p38磷酸化水平.结果:与K562亲本细胞和SB203580处理后丁酸钠诱导的K562细胞相比,丁酸钠诱导的K562细胞中G-γ珠蛋白、A-γ珠蛋白和胎儿血红蛋白的表达均明显上调(P<0.05),p38 mRNA和蛋白水平表达均无明显变化(P>0.05),但p38蛋白磷酸化水平显著增加(P<0.05).K562亲本细胞、SB203580处理后丁酸钠诱导的K562细胞和丁酸钠诱导的K562细胞中联苯胺阳性细胞百分率分别为(3.2±0.4)%、(12.7±0.2)%和(36.3±0.8)%(P<0.05).结论:丁酸钠可以诱导K562细胞高表达γ珠蛋白基因、合成胎儿血红蛋白,p38MAPKs的激活在丁酸钠诱导K562细胞高表达γ珠蛋白基因中发挥重要作用.     

特异性小分子干扰RNA抑制K562细胞肺耐药相关蛋白表达及其功能的研究

肺耐药相关蛋白（LRP）是与多药耐药（MDR）相关的糖蛋白。在儿童白血病及成人急性髓系白血病（AML）中，LRP表达是独立的预后决定因素之一，其过度表达造成患者对化疗不敏感，提示预后不良.近年来，小分子干扰RNA（siRNA）介导的RNA干扰（RNAi）既可以特异地降解同源mRNA序列，从而有效阻止相应蛋白质的表达，并且与相应的单链反义核酸相比，siRNA造成的基因抑制效率更高、特异性更好，所需有效浓度却大大减低。国内外学者将siRNA技术应用于消减慢性粒细胞白血病bcr／abl基因以及逆转p蛋白引起的MDR等的研究，取得了良好的效果。我们设计合成了LRP特异性siRNA-LRP，并转染丁酸钠（NaB）诱导的高表达LRP的K562细胞模型（K562／N），观察siRNA-LRP抑制LRP基因和蛋白表达、消除LRP改变细胞内药物蓄积和分布作用的效果，以期为逆转LRP介导的肿瘤细胞MDR、提高难治性和复发性白血病患者疗效探索新的方法，并探讨以siRNA介导的RNAi用于肿瘤细胞MDR治疗的可行性。     

新生儿危重病例评分与新生儿急性生理学评分围产期补充Ⅱ的应用比较

目的探讨新生儿危重病例评分(NCIS)与新生儿急性生理学评分围产期补充Ⅱ(SNAPPE-Ⅱ)两种评分系统预测危重新生儿死亡放弃风险的准确度及临床实用性。方法 269例危重新生儿根据病情转归分为死亡放弃组及好转治愈组,比较两种评分系统预测死亡放弃风险的准确度。结果死亡放弃组患儿的SNAPPE-Ⅱ得分明显高于好转治愈组患儿,差异有统计学意义(P0.001),两组患儿NCIS评分的差异无统计学意义(P=0.091),而符合单项指标的患儿死亡放弃风险明显高于不符合单项指标患儿(P=0.005)。结论 SNAPPE-Ⅱ在危重新生儿死亡放弃风险的早期预测中具有更高的准确性,NCIS中单项指标对预测病情转归有指导意义。     

绞股蓝多糖对免疫功能的影响

绞股蓝多糖（２５,５０１００ｍｇ／ｋｇ,ｉｐ）能明显提高小鼠碳粒廓清速率,其Ｋ值分别为０．０５１７±０．０１１７,０．０４１９±０．０１１９,０．０５７６±０．０４８,与对照组（ＮＳ）０．０１６９±０．０１１７相比有显著差异（Ｐ＜０．０５）。能增强肝癌Ｈｅｐｓ小鼠ＮＫ细胞活性,其活性（％）分别为２１．４０±４．００,４１．１９±１１．５６,４９．６５±５．０６,除２５ｍｇ／ｋｇ剂量组外,均显著高于对照组１７．９９±２．３５（Ｐ＜０．０５）,而对肉瘤Ｓ１８０小鼠ＮＫ细胞活性无明显影响。另外对小鼠血清溶血素和Ｓ１８０小鼠脾指数有显著提高作用,但对Ｈｅｐｓ小鼠脾和胸腺指数、Ｓ１８０小鼠胸腺指数和脾淋巴细胞转化无显著作用。     

短干涉RNA特异性抑制白血病细胞中肺耐药相关蛋白基因表达

背景和目的双链RNA特异性地降解相应序列的mRNA,导致转录后水平的基因沉默。肺耐药相关蛋白的过度表达与白血病细胞多药耐药密切相关。本研究旨在探讨自行设计的LRP特异性siRNA能否发挥特异性降解LRPmR-NA、抑制蛋白质表达的作用。方法构建LRP真核表达载体pcDNA3．0／LRP。以pcDNA3．0／LRP、pEGFP-C1、二者的特异性siRNA分别组和,转染K562细胞。以RT-PCR方法和流式细胞术检测LRP mRNA和蛋白质水平的变化,以荧光显微镜检测GFP的表达的变化。结果K562细胞转染pcDNA3．0／LRP后,LRP mRNA水平明显升高,蛋白质表达由阴性转为阳性,阳性率30％;LRP特异性siRNA与pcDNA3．0／LRP共同转染K562细胞,LRP mRNA和蛋白质表达均明显降低,由阳性转为阴性;LRP特异性siRNA与pEGFP-C1共同转染K562细胞,GFP的表达与pEGFP-C1单独转染无差异;GFP特异性siRNA与pcDNA3.0共同转染K562细胞,LRP mRNA水平和蛋白质表达与pcDNA3．0／LRP单独转染无差异。结论LRP特异性siRNA在K562细胞中能够特异性地降解LRP mRNA、抑制其蛋白质表达。该研究将为利用siRNA逆转LRP引起的白血病细胞MDR奠定理论基础。     

丁酸钠诱导K562细胞红系分化基因表达谱分析

目的 分析丁酸钠(NaB)诱导K562细胞后的差异表达基因,筛选出与红系分化相关基因,探索NaB的作用机制.方法 应用Affymetrix公司的人类全基因组HG-U133 Plus 2芯片,检测0.5 mmol/L NaB诱导K562细胞48 h的珠蛋白基因变化及差异表达基因,筛选出与红系分化相关基因.应用反转录(RT)-PCR检测ε、γ、β、δ4个珠蛋白基因及2个红系分化相关基因KLF1及KLF3的表达,验证基因芯片结果 .结果 表达谱基因芯片结果分析显示:总探针组54 675个芯片中,阳性表达数23 175(42.4%),阴性表达数30693(56.1%).信号比对数值(SLR)结果显示,表达上调(SLR>1)433个,包含340个不同的基因;表达下调(SLR<-1)171个,包含144个不同的基因.生物学功能分类发现所涉及的基因主要包括参与细胞及大分子代谢、细胞信号、生物学调节、细胞发育及细胞增殖等.7个珠蛋白中ε、Aγ、Gγ、β、δ珠蛋白基因表达均上调,而α及ζ珠蛋白基因无明显改变;表达上调或下调且与红系分化相关的有ALAS2、EGR1、LMO2、RUNX1、KIT、GYPA、GATA-2、KLF1及KLF3等29个基因.RT-PCR验证基因芯片结果 可靠.结论 NaB诱导K562细胞向红系分化;NaB可能通过调节ALAS2、EGR1、LMO2、RUNX1、KIT、GYPA、GATA-2、KLF1及KLF3等与红系分化相关的基因调控γ珠蛋白合成.     

癌康冲剂抗癌作用及对免疫功能影响的实验研究

通过动物实验,研究癌康冲剂的抗癌作用和对免疫功能的影响。方法：抗癌作用现察,建立小鼠移植性肿瘤模型（Ｓ１８０、Ｕ１４和Ｈｅｐｓ）,测定其抑瘤率;免疫功能测定,采用免疫器官称重法、碳粒廊清指数、脾淋巴细胞转化、ＮＫ细胞活性和血清溶血素的测定来判断免疫功能的强弱。结果：癌康冲剂３组对Ｓ１８０、Ｕ１４和Ｈｅｐｓ均有明显的抑制作用,同时能提高免疫器官重量、碳粒廓清指数、脾淋巴细胞转化、ＮＫ细胞活性和血清溶血素的生成。结论：癌康冲剂不仅能抑制肿瘤细胞的生长,而且有提高机体免疫功能的作用,可配合放疗、化疗作为综合治疗癌症的中药制剂。     

数字减影血管造影诊断并介入治疗广泛肝动脉-门静脉分枝瘘致消化道大出血一例

患儿女 ,4岁 ,因反复血性粪便 2个月余入院。 2岁时开始出现消瘦、面色苍白 ,无皮下出血、鼻衄及血尿等。入院前2个月开始暗红色稀水样便 ,每次 5 0～ 2 0 0ｍｌ,间隔 10～ 2 0ｄ一次 ,每次经输血、止血等处理后病情缓解。入院检查 :神清 ,精神差 ,中等贫血貌 ,心肺正常。腹膨隆 ,腹壁静脉呈上行性曲张 ,全腹无明显压疼 ,肝右肋下 4ｃｍ ,质中 ,边缘锐利 ,无触痛 ,脾于左肋下 3ｃｍ。辅助检查 :ＷＢＣ :4 9× 10 9/Ｌ ,ＲＢＣ :2 84× 10 12 /Ｌ ,Ｈｂ :87ｇ/Ｌ ,红细胞比容 0 2 6 1,血小板 :6 8× 10 9/Ｌ。总胆红素 :9 93μｍｍｏｌ/Ｌ …     

丁酸类化合物诱导珠蛋白基因表达的研究

丁酸类化合物是一种４碳的短链脂肪酸,困其毒性较低,是近年来研究较为广泛的一种新的γ－珠蛋白基固诱导剂,已在体外、动物实验以及临床研究中得到证实,但其作用机制仍不清楚。组蛋白的去乙酰化作用、转录因子及信号转导机制等可能参与了亡的诱导过程;给药方式对其诱导作用亦有影响;丁酸类化合物有希望成为一种较为理想的用于治疗γ－珠蛋白基因缺陷疾病儿童患者的首选药物。