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姜黄素对肝癌细胞耐药基因表达的影响 总被引:3,自引:2,他引:1
目的:研究姜黄素对人肝癌细胞Huh7和Hep3B中耐药基因(MDR1、MRP1和DRG2)表达的影响,探讨姜黄素诱导肝癌细胞凋亡的分子作用机制.方法:以DAPI核染色法研究姜黄素对不同肝癌细胞的凋亡诱导作用.利用JC-1染料进行线粒体染色研究姜黄素对Huh7和Hep3B细胞线粒体膜电位的影响.通过半定量PCR(RT-PCR)检测姜黄素对耐药基因表达的影响.结果:姜黄素可以显著抑制Huh7细胞中耐药基因MRP1的表达.结论:姜黄素可能通过抑制耐药基因MRP1的表达诱导肝癌细胞Huh7凋亡. 相似文献
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目的克隆表达弓形虫RH株SAG3基因,为深入研究其结构及功能奠定基础。方法从弓形虫RH株基因组DNA中特异性扩增出编码SAG3基因的片段,相应酶切后克隆入原核表达载体pET-30a(+)中,构建pET-SAG3重组质粒。将pET30-SAG3重组质粒转化大肠杆菌BL21(DE3)菌株。经EcoRⅠ、Hind III酶切及测序鉴定后,异丙基硫代-β-D-半乳糖苷(IPTG)诱导表达融合蛋白,用SDS-PAGE和Western blot鉴定蛋白表达情况。结果体外扩增的SAG3基因片段与目的片段大小相符约1 155bp,成功构建了重组表达质粒pET30-SAG3,SDS-PAGE、Western blot显示SAG3-His融合蛋白的分子量大小约为50kd。结论弓形虫表面抗原SAG3基因在大肠杆菌中成功表达,为进一步研究SAG3的结构和功能奠定基础。 相似文献
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家蝇幼虫抗菌肽Defensins基因的克隆与序列分析 总被引:7,自引:0,他引:7
目的:克隆家蝇幼虫的抗菌肽defensins基因并对其进行序列分析。方法:提取家蝇幼虫总RNA,根据家蝇成虫defensins基因cDNA序列设计一对引物,RT-PCR扩增目的基因片段,T-A克隆后测序,应用相关生物信息学软件对该序列进行分析。结果:RT—PCR扩增出一条约310bp的目的片段,序列分析表明,其与家蝇成虫防御素基因同源性高达97%,核酸序列变异主要发生在信号肽区域。结论:成功克隆及分析了家蝇幼虫防御素基因全长编码区cDNA序列,为其下一步的重组表达和生物活性研究奠定了基础。 相似文献
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目的研究家蝇抗菌肽基因attacin、cecropin、defensin在家蝇幼虫体内的空间转录情况。方法采用体外转录方法合成地高辛标记的cRNA探针,通过原位杂交方法检测微生物诱导前后家蝇幼虫体内attacin、cecropin、defensin变化情况。结果在未诱导的家蝇幼虫体内,体壁、中肠组织均没有检测到attacin、cecropin和defensin转录,在脂肪体中仅检测到cecropin和defensin的弱转录信号;在诱导后的家蝇幼虫中,体壁上检测到attacin和defensin强转录信号,cecropin没有转录,脂肪体中检测到attacin、cecropin和defensin强转录信号,而在中肠组织中检测到cecropin和defensin转录,没有attacin转录。结论经微生物诱导后,家蝇幼虫体内抗菌肽基因转录水平大大提高,为进一步研究家蝇抗菌肽在机体免疫中的作用及其机制打下了基础。 相似文献
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目的 通过体外实验研究蟛蜞菊提取物(WE)对人鼻咽癌细胞株CNE-1细胞的增殖抑制作用,并进一步研究其作用机制.方法 蟛蜞菊70%乙醇提取物,通过硅胶柱梯度洗脱,100%甲醇洗脱部位即为WE.采用噻唑蓝(MTT)比色法测定WE对CNE-1细胞生长增殖的影响;采用Hoechst33528染色观察WE对细胞凋亡的影响;采用流式细胞仪技术检测WE对CNE-1细胞周期及细胞凋亡的影响;采用p38特异性抑制剂SB203580干预的方法检测p38活性与WE处理后CNE-1细胞周期变化的关系.结果 随着WE质量浓度的增加和作用时间的延长,CNE-1细胞存活率显著降低(P<0.05).随着WE质量浓度的增加,CNE-1细胞出现明显的G2/M期阻滞.形态学观察可见WE处理CNE-1细胞48h后细胞数量减少,部分细胞细胞核发生皱缩.p38特异性抑制剂SB203580干预后,CNE-1细胞周期分布恢复正常.结论 WE通过p38蛋白使CNE-1细胞发生G2/M期阻滞,从而抑制CNE-1细胞的增殖. 相似文献
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目的检测共生菌沃尔巴克氏体(Wolbachia)在德国小蠊体内的感染情况。方法应用沃尔巴克氏体wsp基因的1对通用引物(81F,691R),通过聚合酶链反应、T—A克隆和序列测定,将所得wsp基因序列与GenBank中的已知Wolbachia品系wsp基因进行同源性分析。结果成功地从德国小蠊成虫的总DNA中扩增到一段317bp的wsp基因片段,与GenBank中的已知Wolbachia品系wsp基因同源性最高可达95%。结论沃尔巴克氏体Wolbachia共生菌可能广泛存在于德国小蠊体内,为进一步研究德国小蠊的孤雌生殖与Wolbachia的相关关系等研究奠定了基础。 相似文献