晚期扩张型心肌病患者心肌Cx43蛋白表达的研究

目的:探讨晚期扩张型心肌病(DCM)患者心肌连接蛋白43(Cx43)表达变化及其意义。方法:运用免疫组化和图像分析技术,对5例晚期DCM患者和4例因其他心脏疾病(A对照组)行心脏移植手术切除的心脏及4例机械性损伤死者(B对照组)的左心室心肌Cx43蛋白表达进行定位和定量研究。结果:DCM患者心肌Cx43蛋白表达较清晰,主要位于心肌闰盘处,呈条状、斑点或颗粒状散在分布,有的散在分布于心肌细胞侧边;A对照组表达清楚,位于心肌闰盘处,主要呈条状,少数呈斑点状散在分布,而心肌侧边分布很少;B对照组阳性着色较淡,在闰盘处呈条状分布,少有斑点状散在分布,心肌侧边几无表达。定量检测和统计分析发现,DCM组心肌Cx43蛋白表达的量低于A对照组但高于B对照组。心肌Cx43蛋白表达的平均光密度,DCM组与A对照组、B对照组相比,A对照组与B对照组相比,差异均有统计学意义(P<0.01);心肌Cx43蛋白表达的S值,DCM组、A对照组、B对照组间比较,差异均无统计学意义(P>0.05)。结论:晚期DCM患者心肌Cx43蛋白表达的数量和分布均发生改变,这种变化很可能是导致DCM患者发生心律失常和心功能衰竭的病理基础。     

出血性脑梗死31例常见危险因素临床分析

目的 探讨出血性脑梗死(hemorrhagic infarction,HI)的危险因素.方法 收集566例急性脑梗死患者的临床资料,对其中31例HI患者的危险因素对HI形成的影响进行分析.结果 HI的发生与心房纤颤病史、梗死面积、溶栓、抗凝及血糖水平有关.结论 大面积脑梗死、脑栓塞、溶栓、抗凝以及梗死后高血糖是HI发生...     

结缔组织生长因子诱导人肾小管上皮细胞向间充质细胞转化的实验研究

目的 探讨结缔组织生长因子(CTGF)对肾小管上皮细胞向间充质细胞转化的影响.方法 体外培养的人肾小管上皮细胞(HK-2),按是否用CTGF处理将其分为实验组和对照组.直接免疫荧光法、间接免疫化学检测培养72 h后肾小管上皮细胞E-cadherin、波形蛋白、α-平滑肌肌动蛋白((α-SMA)、细胞外信号调节激酶2(ERK2)的表达;Western blot方法 在72 h检测E-cadherin、波形蛋白和ERK2的表达;Boyden小室在1、3、5 d检测细胞迁移能力的变化.结果 (1)实验组上皮细胞表型标志蛋白E-cadherin随着时间的延长而表达递减,波形蛋白表达渐增,ERK2表达上调;(2)在第1天,实验组与对照组细胞迁移能力差异无统计学意义,第3天实验组迁移至滤膜下面细胞多于对照组,第5天实验组细胞迁移数明显高于对照组[(45.0±1.1):(14.0±1.2),P<0.05].结论 在体外,人肾小管上皮细胞由CTGF刺激表现出向间充质细胞转化的特性,并且ERK2信号转导通路可能参与了对这一过程的调控效应.     

IL-10、TNF-α对慢性乙型肝炎患者树突状细胞的影响

目的 研究IL-10和TNF-α对慢性乙型肝炎患者树突状细胞的分化与功能的影响.方法 健康志愿者和慢性乙型肝炎患者各15例,取外周静脉血,分离获得外周血单个核细胞(PBMC),常规培养获得DC组.培养期间用IL-10刺激的为imDC组;TNF-α刺激的为mDC组;先后用IL-10、TNF-α刺激的为imDC+TNF-α组.各组收获细胞后分别检测反映DC成熟度的各种分子及其体外诱导的自体淋巴细胞增殖效应.结果 源于慢性乙型肝炎患者的常规培养的Dc在数量,HLA-DR、HLA-A、B、C和CD86表达,IL-12p70分泌及其诱导的淋巴细胞增殖效应,均低于健康者组(P＜0.01).源于慢性乙型肝炎患者的mDC与健康者mDC表达的HLA-DR、HLA-A、B、C和CD86比较无显著性差异;2组mDC诱导自体淋巴细胞增殖效应和分泌的IL12p70均明显增加,比较有显著性差异(P＜0.01);2组imDC的HLA-DR、HLA-A、B、C和CD86低表达,分泌的IL-12p70极低,不能强烈激活诱导淋巴细胞增殖效应,与DC组比较有显著性差异(P＜0.01).加入TNF-α刺激后HLA-A、B、C,HLA-DR,CD86仍低表达,分泌的IL-12pT0和淋巴细胞增殖效应仍较低.健康对照组、慢性乙型肝炎组的上清夜中IL-21的ELISA检测值均较低,无显著性差异.结论慢性乙型肝炎患者常规培养的DC在数量和功能上低于健康者.TNF-α可促进常规培养的DC成熟为mDC、IL-10可抑制DC成熟.慢性乙型肝炎患者的DC同健康者一样可进行有效的调控,分化成熟后功能强于健康者常规培养的DC,或可提高自体DC治疗性疫苗在不同免疫状态下的治疗效果.     

阴茎阴囊Z形皮瓣转移术治疗小儿重度隐匿阴茎

目的探讨小儿较严重、包皮细少的隐匿阴茎的手术治疗方法。方法采用阴茎阴囊转移Z形皮瓣术治疗重度隐匿阴茎67例,年龄2岁3月-6岁（平均年龄3岁9月）。结果术后阴茎出现暂时性肿胀,1—2周消失,无顽固性水肿、阴茎回缩、尿道损伤,阴茎体外形好,排尿顺畅。术后半年阴茎缝合疤痕消失。结论阴茎阴囊转移Z形皮瓣术治疗较严重的隐匿阴茎是一种并发症少、阴茎外形理想的手术方法。转移的阴囊Z形皮瓣可弥补阴茎皮肤的不足。     

可吸收肋骨钉固定治疗连枷胸62例疗效观察

肋骨骨折在胸部创伤中最常见,约占90％。大部分单纯多发性肋骨骨折通过保守治疗可以治愈,当多根多处肋骨骨折或合并严重肺损伤,导致胸壁不稳定而发生严重的呼吸、循环功能障碍时则需要手术治疗。我科于2008年7月至2009年2月期间共收治连枷胸113例,对其中62例连枷胸合并不同程度肺损伤及其它部位损伤患者采用可吸收肋骨钉固定术治疗,均取得较好效果,现总结报告如下。     

依达拉奉对急性脑梗死患者血清基质金属蛋白酶-9的影响

目的探讨依达拉奉对急性脑梗死(ACI)患者血清基质金属蛋白酶-9(MMP-9)含量的影响及意义。方法 70例ACI患者随机分为依达拉奉组(35例)和常规治疗组(35例)。依达拉奉组在常规治疗组基础上给予依达拉奉注射液30 mg加入生理盐水250 mL中静滴,1次/d,连用14 d;另选20例健康体检者作为对照组。治疗前、治疗后71、4 d检测MMP-9含量。结果 ACI患者MMP-9含量较对照组明显升高(P<0.05),依达拉奉组在治疗后7 d和14 d血清MMP-9降低,与常规治疗组比较差异有统计学意义(P<0.05)。结论依达拉奉能够降低血清MMP-9的浓度,可能是其有效治疗急性脑梗死的机制之一。     

重组腺相关病毒载体介导CTLA4Ig转染延长同种大鼠心脏移植存活时间

目的　研究重组腺相关病毒载体介导 CTLA4Ig(rAAV CTLA4Ig)全身转染对大鼠同种心脏移植的影响。方法　以BN大鼠为供者,Lewis大鼠为受者,建立心脏移植模型。实验分为两组。对照组:供、受者不给予任何处理;转染组:受者于心脏移植前30 d,通过尾静脉全身注射 1×109斑点形成单位(PFU)的 rAAV CTLA4Ig。观察移植心存活时间;ELISA法检测血清 CTLA4Ig、干扰素 γ(IFN γ)和白细胞介素 4(IL 4)水平;免疫组织化学法(SABC法)检测移植心组织中 CD4 和CD8 T细胞的浸润。对移植心存活时间明显延长的受者,用其脾细胞与供者脾细胞进行混合淋巴细胞培养,观察受者对供者的免疫反应状态。结果　转染组移植心存活时间较对照组明显延长(P<0.05);转染组血清CTLA4Ig蛋白一直维持在26.67~35.47 mg/L,移植后转染组血清 IFN γ水平下调,血清 IL 4水平上调(P<0.05);对照组出现典型的急性排斥反应表现,转染组心肌组织基本正常,间质内无炎性细胞浸润或血管外周及心肌间质内有局灶性炎性细胞浸润,未见坏死;对照组移植心组织中浸润的CD4 和CD8 T细胞数量明显高于转染组(P<0.01);转染组受者对供者的脾细胞增殖反应明显低于对照组(P<0.05)。结论　重组腺相关病毒载体可以介导 CTLA4Ig基因的持续表达,通过全身途径转染受者可以明显延长     

雷帕霉素对人肝癌裸鼠原位移植瘤生长的抑制作用

目的探讨雷帕霉素对人肝癌裸鼠原位移植瘤生长的影响及其机制。方法建立人肝癌棵鼠肝原位移植瘤模型32只,随机分为空白对照组、FK506组、雷帕霉素常规剂量组和高剂量组。用药两周后观察肿瘤体积的变化,免疫组织化学法检测肝癌组织中增殖细胞核抗原(PCNA)、血管内皮细胞生长因子(VEGF)的表达。结果对照组、FK506组、雷帕霉素常规剂量组、高剂量组平均肿瘤体积分别为:(310．15±40．16)、(605．59±116．23)、(99．19±15．27)、(151．61±27．81) mm3。与对照组相比,雷帕常规剂量组及高剂量组肿瘤体积明显缩小,PCNA、VEGF的表达均显著下调(P<0．01);FKS06组肿瘤体积与对照组相比明显增大,差异有统计学意义(P<0．01),PC- NA、VEGF的表达与对照组相比差异无统计学意义(P>0．01)。结论雷帕霉素具有显著抑制肝癌生长的作用,其机制可能是抑制了肝癌细胞的恶性增殖及VEGF的产生。     

LPS与ATP共同诱导小鼠原代腹腔巨噬细胞焦亡模型的建立

目的：探索脂多糖（LPS）和三磷酸腺苷（ATP）共同诱导小鼠原代腹腔巨噬细胞焦亡模型的最佳条件。方法：采用流式细胞仪F4/80和CD-11b染色检测巨噬细胞纯度,Annexin V-PE/7-AAD双染色法筛选出LPS和ATP共同诱导细胞焦亡的最适浓度及时间。巨噬细胞随机分为control组、LPS组、ATP组和LPS+ATP组;Western blot检测GSDMD、caspase-1、caspase-11、NLRP3、ASC、pro-IL-1β、pro-IL-18和HMGB1蛋白表达水平;ELISA检测培养上清中IL-1β和TNF-α表达水平;透射电镜（TEM）和扫描电镜（SEM）观察巨噬细胞焦亡形态。结果：巨噬细胞的纯度达到90%;500 ng/ml LPS 24 h+5 mmol/L ATP 4 h为诱导巨噬细胞焦亡的最佳组合方式;LPS+ATP组的GSDMD、caspase-1、caspase-11、NLRP3、ASC、pro-IL-1β、pro-IL-18和HMGB1的蛋白表达量明显高于对照组（P<0.05）;培养上清中IL-1β和TNF-α表达量显著高于对照组（P&...