全身型幼年类风湿性关节炎1例分析

对全身型幼年类风湿性关节炎1例分析如下. 1病历摘要 男,4岁7月龄.因反复发热10 d,咳嗽腹痛4d于2010-09-29入院.入院前10 d,患儿受凉后出现反复发热,为弛张热,最高体温39.5℃,无畏寒寒战,无抽搐呕吐,无嗜睡昏迷,曾在当地诊所就诊,给予抗生素(具体情况不详)治疗,患儿仍反复发热,为弛张热;入院前4d,患儿出现咳嗽,咳嗽为阵时咳,不伴有喉间痰响,患儿并出现腹痛,为阵时疼痛,具体部位诉说不清,无腹泻呕吐,可自行缓解,仍在当地卫生院就诊,并进行输液等治疗(具体情况不详),无明显好转,为求进一步治疗,2010-09-29到我院就诊,门诊行胸片检查提示左侧胸腔积液(少一中量),门诊以支气管肺炎,胸腔积液收入院.     

RNA干扰EGFR基因家族真核表达载体的构建

目的:构建针对表皮生长因子受体(Epidermal growth factor recepter,EGFR)家族的小分子发夹状RNA(Small hairpinRNA,shRNA)干扰质粒表达载体,为本课题下一步研究提供有力_T具.方法:选择放疗不敏感的卵巢癌细胞SKOV3中高表达的EGFR家族同源性基因为靶基因,根据shRNA的设计原则,设计实验组及对照组shRNA.体外合成2段编码短发夹RNA序列的DNA单链,退火,克隆到相应载体pGensil-1的polⅢ启动子下游.结果:经酶切和DNA测序鉴定成功构建了EGFR家族同源性基因的RNA干扰表达载体,分别命名为pGensil-1-E及pGensil-1-C.为下一步体外、体内实验奠定了基础.     

MUC1胞内段抑制剂GO-201对人肺腺癌A549放射敏感性作用研究

目的：研究MUC1胞内段（MUC1-CT）抑制剂GO-201对人肺腺癌A549细胞放射敏感性影响。方法：MTT检测不同剂量以及不同时间GO-201对肺腺癌A549细胞的增殖抑制率;克隆形成实验检测GO-201对A549细胞放射增敏作用,单击多靶模型拟合细胞存活曲线并计算Dq、D0、SF2值和放疗增敏比（sensitizing enhancing vatio,SER）;流式细胞术检测各实验组细胞活性氧水平,Western blot法检测锰超氧化物歧化酶（manganese superoxide dismutase,MnSOD）表达变化。结果：MUC1-CT抑制剂GO-201可抑制肺腺癌A549细胞的增殖,其作用24、48、72 h IC50值分别是30.79、23.32、13.60 ?滋mol/L。并且对肺腺癌A549细胞具有放射增敏作用,其放疗增敏比SER为1.14;联合照射组中,A549细胞活性氧水平明显升高（F=12.019,P=0.008）,Mn－SOD蛋白表达量明显下降（F=5.465,P=0.048）,与对照组比较差异具有统计学意义。结论：MUC1-CT抑制剂GO-201可增加人肺腺癌A549细胞的放射敏感性。     

沉默PeroxiredoxinⅠ基因增强乳腺癌细胞放射敏感性及其作用机制的实验研究

目的采用RNA干扰技术沉默过氧化物酶Ⅰ(peroxiredoxinⅠ,PrxⅠ)基因,观察乳腺癌MCF-7细胞对X线敏感性变化,探讨其作用机制。方法将PrxⅠshRNA真核表达载体pGPU6-PrxⅠ和阴性对照质粒pGPU6-HK转染入乳腺癌MCF-7细胞中,经G418稳定筛选后RT-PCR和Western blot检测PrxⅠ表达变化。6 MV X线照射6 Gy后48 h,流式细胞术检测细胞的活性氧水平、细胞周期和细胞凋亡;MTT法测定细胞增殖能力;克隆形成实验观察克隆形成率,计算Do、N、Dq、SF2及放射增敏比(sensitive enhancement ratio,SER)等放射生物学参数,Western blot法检测Rad51及γ-H2AX蛋白变化。结果获得2个稳定转染细胞株:pGPU6-HK和pGPU6-PrxⅠ。RT-PCR和Western bolt检测显示pGPU6-PrxⅠ组中PrxⅠmRNA和蛋白表达均明显抑制。6 Gy的X线照射48 h后,pGPU6-PrxⅠ及联合照射(ionizing radiation,IR)组细胞中的活性氧水平、G1期细胞和细胞凋亡明显增加,而细胞增殖能力和S期...     

皮质肌动蛋白在不同转移潜能乳腺癌细胞中的表达及意义

目的筛选不同转移潜能的乳腺癌细胞亚系,并探讨皮质肌动蛋白(cortactin)在乳腺癌细胞增殖和侵袭过程中的作用。方法经过连续人工基质膜侵袭实验后获得高、低转移潜能的乳腺癌细胞亚系,通过透射电镜观察比较两系细胞的超微结构,四甲基偶氮唑盐(MTT)法检测两系细胞增殖能力,流式细胞仪检测两系细胞周期,Transwell侵袭小室模型比较两系的迁移能力。应用免疫细胞化学法、反转录聚合酶链反应(RT-PCR)和蛋白质印迹分析法检测cortactin蛋白在两系细胞中的表达。结果利用人工基质膜侵袭实验筛选出高、低转移潜能乳腺癌细胞亚系,并且两系细胞形态上无明显差异。MTT实验显示高转移潜能细胞体外生长速度显著快于低转移潜能细胞(P0.05)。流式细胞仪检测结果显示,高转移潜能细胞亚系与低转移潜能细胞亚系相比,G0/G1期细胞前者比后者少[(52.67±3.69)%vs(64.46±2.79)%],而S期细胞前者比后者多[(30.53±6.19)%vs(24.63±2.04)%]。高转移潜能细胞亚系增殖指数(PI)高于低转移细胞亚系[(47.32±3.69)%vs(35.53±2.80)%,P0.05],侵袭能力显著强于低转移潜能细胞亚系[(61.46±7.08)vs(25.32±4.87)个/视野,P0.05]。免疫组化、RT-PCR和蛋白质印迹分析均显示在高转移潜能细胞亚系中cortactin在基因和蛋白水平的表达均高于低转移潜能细胞亚系(P0.05)。结论 Cortactin的过表达与乳腺癌的增殖和转移过程密切相关。     

苦参碱诱导Raji细胞凋亡及其对Bcl-2表达的影响

目的:观察苦参碱(Matrine,Mat)对体外人淋巴瘤Raij细胞增殖及细胞凋亡的影响,探讨 Mat 诱导 Raji 细胞凋亡的作用机制.方法:四甲基偶氮唑蓝(MTT)比色法观察Mat对Raji细胞增殖的影响;流式细胞术检测凋亡率;免疫细胞化学技术检测 Mat对Raji 细胞株 Bcl-2 蛋白表达的影响;RT-PCR法检测Bcl-2 mRNA表达.结果:不同浓度的 Mat 对 Raji 细胞均有一定的增殖抑制作用,且呈量效和时效关系;Mat能明显诱导Raji细胞凋亡;免疫细胞化学结果显示 Bcl-2 在实验组中的表达显著低于对照组.RT-PCR 显示 Bcl-2 mRNA 表达明显减弱,且随剂量增加越明显.结论:Mat 能抑制人淋巴瘤 Raji 细胞的增殖,促进细胞凋亡,其作用机制可能与下调 Bcl-2 表达有关.     

RNAi沉默EGFR基因对卵巢癌放疗敏感性的影响

目的 探讨表皮生长因子受体(EGFR)基因对卵巢癌放疗敏感性的增强作用.方法 构建针对EGFR基因序列特异性短发夹状RNA(shRNA)表达载体,应用卵巢癌SKOV3细胞建立裸鼠移植瘤模型,随机分为对照组、单纯放疗组、基因放疗组,采用6 MV X线照射裸鼠瘤组织,监测瘤体积,测量瘤质量,取瘤组织行RT-PCR、Western印迹、免疫组化、电镜检测.结果 治疗后三组瘤体积差异均显著(均P＜0.01),单纯放疗组、基因放疗组的抑瘤率分别为28.1%、46.1%,基因放疗组EGFR基因的表达明显下调,透射电镜下瘤组织凋亡、坏死最明显.结论 动物实验证实RNAi沉默EGFR基因明显提高卵巢癌的放疗敏感性.     

以阴囊肿块为首发的急性淋巴细胞白血病1例分析

对以阴囊肿块为首发的急性淋巴细胞白血病1例分析如下。 1病历摘要 男,63岁。因发现左侧阴囊肿块3＋个月余入院。入院前3＋个月,患者无意间发现左侧阴囊肿块,质韧,活动差,无压痛,皮温不高,院外治疗后症状无改善。后发现左侧阴囊肿块渐长大,并出现颌下、锁骨上下窝、腋窝、腹股沟区出现多个肿大的包块,伴间断性低热、     

靶向EGFR基因RNA干扰对人卵巢癌SKOV_3细胞增殖的抑制作用

目的 利用RNA干扰技术下调表皮生长因子受体(epidermal growth factor receptor,EGFR)基因的表达,观察其对卵巢癌SKOV3细胞增殖的影响.方法 构建针对EGFR基因的siRNA真核表达载体,转染入卵巢癌SKOV_3细胞中,并筛选稳定表达siRNA的转化克隆,RT-PCR及Western blot分别检测EGFR mRNA和蛋白表达,流式细胞仪检测细胞周期和凋亡,克隆形成实验及MTY法检测细胞克隆形成率及细胞体外的增殖情况.结果 成功构建表达质粒pGenSil-HK、pGcnSil-EGFRI和pGenSil-EGFR2,并转染SKOV,细胞,通过G418筛选后获得稳定转染克隆,RT-PCR及Western blot分析表明转染pGenSil-EGFRI、pGenSil-EGFR2后的细胞EGFR mRNA和蛋白表达均受到了明显抑制,FGFR mRNA抑制率分别为41.87%和68.07%,蛋白表达抑制率分别为45.21%和70.25%.与未转染组和pGenSil-HK组相比,pGenSil-EGFR2组细胞凋亡比例显著增加,G_1期细胞增多,而S期细胞减少(P<0.05);转染pGenSil-HK组克隆形成率为(0.82±0.03),转染pGenSil-EGFR2组克隆形成率为(0.61±0.04),二者比较差异显著(P<0.05),MTT显示细胞培养36 h后,pGenSil.EGFR2组的细胞生长均显著低于未转染组和转染pGenSil-HK组(P<0.05).结论 靶向EGFR基因RNA干扰能够阻抑卵巢癌SKOV_3细胞中的EGFR表达,诱导细胞凋亡、调控细胞周期再分布、抑制细胞增殖.     

RapidArc技术应用于早期鼻腔NK／T细胞淋巴瘤调强放疗的剂量学研究

目的：研究RapidArc技术应用于早期鼻腔NK／T细胞淋巴瘤调强放疗的剂量学特性。方法：选取10例早期鼻腔NK／T细胞淋巴瘤患者,在其CT模拟定位图像勾画靶区及危及器官,分别设计3D-CRT计划和RapidArc计划,以3D—CRT计划为参考。评估RapidArc计划计划靶体积（PTV）及危及器官的剂量学参数。结果：2种治疗计划均能满足处方剂量要求,与3D-CRT计划相比,RapidArc计划PTV的最大剂量（Dmax）减小5．49Gy（t=12．784,P=-0．000）、平均剂量（D/mean）减小1．32Gy（t=8．416,P=0．000）、适形指数cI‰变好（t=12．805,P=0．000）、适形指数C195％变好（t=10．138,P=-0．000）、均匀指数HI变好（产7．817,P=-0．000）;左视神经Dmean增加4．94Gy（t=-2．494,P=-0．034）,右视神经Dmean增加7．79Gy（t=-3．031,P=-0．014）,左眼Dmax减少5．83Gy（t=4．470,P=0．002）,右眼Dmax减少6．43Gy（t=4．756,P=-0．001）,左腮腺Dmax减少7．69Gy（t=3．076,P=0．013）,右腮腺Dmax减少6．93Gy（t=2．478,P=-0．035）。结论：早期鼻腔NK／T细胞淋巴瘤患者采用RapidArc技术可获得优于3D—CRT计划的靶区剂量分布,同时更好的保护了部分危及器官,其疗效还需进一步临床评估。