干湿化学检测氨基转移酶的方法学探讨与临床应用

目的 由于干湿化学检测结果无可比性,目前国内存在同一实验室同一检测项目有两种不同的检测结果和不同的参考区间.为解决这个问题,以湿化学为标准来校准干化学回归方程的回归参数,使干湿化学检测同一项目的 检测结果无明显差异并使用同一参考值.方法 随机收集60例临床血清标本,分别用日立7170和强生VITROS950同时测定血清ALT和AST的活性,分析参数改变前后两组结果的相关性和检测结果的一致性.结果 参数改变前两个转氨酶两种方法所得结果相关性良好(r=0.986 5和r=0.955 4),但两个转氨酶两种方法检测结果的预期偏差(SE)分别是14.378和20.566 6远大于允许偏差(EA=12).SE不在允许偏差范围内.化学参数改变后两个转氨酶两种方法所得结果相关性良好(r=0.991 9和r=0.998 8),两个转氨酶两种方法检测结果的SE分别是2.428和2.169 3,远小于EA/2.SE在允许偏差范围内.结论 化学参数改变后干化学和湿化学两种检测方法测定血清标本中的ALT和AST的活性,其结果无明显差异,具有良好的相关性,并且干湿化学可使用同一参考值,对临床疾病诊断和治疗有实际的应用价值.     

RF，抗RA33抗体，CRP，ANA与ENA联合检测在间质性肺炎及相关疾病中的临床研究

目的 了解引起间质性肺炎的发病情况及相关因素,探讨血清RF,抗RA33抗体,CRP,ANA及ENA联合检测在间质性肺炎及相关疾病诊断、治疗及预后中的作用.方法 采用ELISA法对32例间质性肺炎患者,37例类风湿性关节炎患者,30例普通肺炎患者和30例健康对照者进行抗RA33抗体的检测,间接免疫荧光法检测ANA,免疫印迹法检测ENA,免疫比浊法进行类风湿因子(RF)及CRP的检测.结果 间质性肺炎组患者RF水平与类风湿性关节炎组比较,差异非常显著(P<0.01);间质性肺炎组患者CRP水平与健康对照组比较,差异非常显著(P<0.01);间质性肺炎组患者抗RA33抗体水平与健康对照组比较,差异显著(P<0.05).各疾病组间抗RA33抗体水平比较,差异无统计学显著性意义(P>0.05);RF,抗RA33抗体,CRP及ANA诊断间质性肺炎灵敏度分别为:34.38%,25.00%,56.25%,78.13%;诊断普通肺炎灵敏度分别为:10.00%,6.67%,80.00%,16.67%;诊断类风湿性关节炎的灵敏度分别为:81.08%,32.45%,43.24%,62.16%.RF,抗RA33抗体,CRP及ANA诊断各疾病组的特异度分别为:93.33%,93.33%,90.00%,96.67%.ENA的检出率各组间均较低.结论 对间质性肺炎患者进行RF,抗RA33抗体,CRP,ANA,ENA联合检测,对于疾病的进展、病因分析、指导治疗和改善预后均具有重要实用价值.     

3种体液细胞染色方法的效果比较

目的选择简单、快速且能反映体液细胞原有结构特征的染色最佳方法。方法比较临床较为常用的苏木精-伊红(HE)染色法、巴氏染色法及瑞-姬(WG)混合染色法对650份不同体液标本进行细胞染色效果及阳性检出率。结果 WG混合染色法操作简便快速,能使体液细胞结构最大限度地保持原有状态及特征,细胞质、细胞核及核仁之间的色差大,易于区分辨认,阳性诊断符合率为99.7%、灵敏度为79.0%、总有效率达94.0%。结论经对各种体液细胞染色观察分析,WG混合染色法效果优于HE和巴氏染色法,特适用于各级检验单位体液细胞的开展。     

肾病患者尿液红细胞荧光定位方法及应用

目的：建立免疫荧光方法对尿中红细胞膜上进行荧光定位，以区别肾性与非肾性血尿．方法：以荧光标记兔抗人免疫球蛋白为抗体，采用直接免疫荧光染色法检测肾病患176例，非肾病患163例，观察尿中红细胞膜上的荧光着色程度，从而建立红细胞荧光定位检查方法，用于肾病的鉴别诊断，同时做尿沉渣形态学对比检查．结果：用荧光标记的兔抗人Ig抗体(抗IgA，IgG，IgE及IgM抗体)分别对肾病组患176例尿中红细胞上4种Ig抗体染色检查，总阳性率为97．2％(171／176)；形态学检查总阳性率为64．2％(113／176)；对非肾病患163例尿中红细胞上Ig染色检查，总阳性率为1．2％(2／163)．结论：直接免疫荧光染色法是在尿沉渣检查的基础上发展的一种新的染色法，免疫荧光染色方法特异性强，对鉴别肾性与非肾性血尿具有较高的应用价值。     

藤黄微球菌Rpf基因的克隆表达及纯化鉴定

目的:克隆藤黄微球菌Rpf基因,序列测定正确后进行融合表达纯化.方法:采用聚合酶链反应(PCR)方法,从藤黄微球菌基因组中扩增出藤黄微球菌Rpf基因,用限制性内切酶消化后插入到pUC-19克隆载体中,测序正确后再亚克隆到融合表达载体pPro-EXHT中,转化大肠杆菌DH5α,目的基因经IPTG诱导,由T7启动子调控表达了氨基端带6个连续组氨酸残基的Rpf蛋白,在变性条件下对目的蛋白进行纯化.结果:获得藤黄微球菌Rpf基因,得到融合6个组氨酸残基的藤黄微球菌Rpf蛋白,可溶性分析发现融合蛋白主要在包涵体中存在,最后在变性条件下,用Ni2 -NTA 亲和色谱柱纯化目的融合蛋白,纯化获得的融合蛋白纯度大于90%,Western-Blot证实获得的蛋白为所需要的目的蛋白.结论:构建了藤黄微球菌Rpf基因的重组表达载体,并获得了高纯度的融合表达蛋白,为以后的深入研究奠定了基础.     

尿液内毒素定量测定快速诊断革兰阴性菌尿路感染的研究

泌尿系感染是常见的感染性疾病，约占感染性疾病的20％～30％。近年来由于各种介入性诊断治疗手段、广谱抗生素的广泛使用造成的耐药菌株增加和免疫抑制剂应用致使机体抵抗力下降，导致尿路感染有逐年增加的趋势。而临床常规细菌培养所需时间较长，且易受一些不确定因素的影响，有可能延误治疗。本试验以鲎试验的动态浊度法来检测尿液内毒素含量，并与尿液细菌培养相比较，分析两种方法的一致性，了解尿液内毒素定量测定是否可以对单纯或伴有革兰阴性菌的尿路感染做出早期诊断，从而指导临床早期对症治疗，以利于患者的康复。     

养阴抗毒散对X线照射小鼠T细胞亚群及红细胞黏附功能的影响

目的: 研究小鼠急性中度骨髓型放射损伤细胞免疫功能的变化及养阴抗毒散的防护作用.方法: 以6 Gy X射线照射小鼠为动物模型,随机分为正常对照组（A）、照射组（B）及照射加中药组（C）.用流式细胞仪直接免疫荧光染色法测定外周血T淋巴细胞亚群,酵母菌红细胞花环试验法测定红细胞免疫能力.结果: 与A组比较,B,C两组小鼠CD4,CD8百分率显著减少(P<0.01);B组CD4/CD8比值明显降低(P<0.01).B组小鼠RBC-C3bR花环率第12,20,28日降低(P<0.01),RBC-IC花环率第4日和第8日升高(P<0.01);C组小鼠RBC-C3bR花环率仅在第12日下降(P<0.01),RBC-IC花环率仅在第4日升高(P<0.01);C组RBC-C3bR花环率在第4,12,20,28日均高于B组(P<0.01).结论:6 Gy X线照射可造成小鼠细胞免疫功能低下,养阴抗毒散对此有一定的防治作用.     

实验诊断学双语教学模式的探索

双语教学的概念 双语教学是指同时使用两种语言即母语与第二外语来组织、安排、实施教学活动,使学生在学习的过程中,可以通过两种语言对同一知识的描述,达到理解、思考进而掌握的目的。     

脑梗死和冠心病患者血清同型半胱氨酸改变

目的 :了解西北地区脑梗死和冠心病等心脑血管疾病患者血清同型半胱氨酸 (homocysteine,Hcy)、血脂水平的关系 .方法 :采用荧光偏振免疫分析方法 ,对 34例脑梗死患者 ,5 8例冠心病患者及 1 2 2例健康人进行血清Hcy的检测 ,同时测定其血脂水平 .结果 :脑梗死患者血清Hcy水平为(30 .5± 1 5 .4 ) μmol·L-1 ,冠心病患者血清Hcy水平为 (2 5 .5±1 3.5 ) μmol·L-1 ,与正常对照 (1 4 .2± 6 .9) μmol·L-1 比较 ,具有显著性差异 (P <0 .0 1 ) .脑梗死和冠心病患者血清Hcy水平与血脂无明显相关 (P >0 .0 5 ) .结论 :高Hcy血症是脑梗死、冠心病等心脑血管疾病独立的致病因素 ,与血脂无明显相关     

UF-100尿沉渣分析仪鉴别血尿来源

目的　探讨UF 1 0 0尿沉渣分析仪鉴别血尿来源的临床应用价值。方法　用UF 1 0 0尿沉渣分析仪对 1 5 9例肾小球性血尿和 2 1 3例非肾小球性血尿标本进行检测 ,统计红细胞各项数据 ,并将仪器红细胞提示信息与普通光学显微镜检查结果进行比较。结果　肾小球性血尿和非肾小球性血尿标本的红细胞平均前向散射强度 (RBC MFsc)分别为 5 6 .9± 1 6 .3和 1 0 1 .7± 5 .8(P <0 .0 1 )、红细胞平均前向散射光分布宽度 (RBC Fsc DW)分别为 36 .1± 1 2 .8和 1 5 .4± 6 .2 (P <0 .0 5 )、70 %红细胞前向散射光强度 (RBC P70 Fsc)分别为 5 7.8± 1 5 .8和 1 2 1 .1± 6 .2 (P <0 .0 1 ) ;红细胞提示信息与普通光学显微镜检查结果判断肾小球性血尿的敏感性分别为93.7%和 80 .5 % ,差异有显著性 (P <0 .0 1 ) ,特异性分别为 83.1 %和 87.3% ,差异无显著性 (P >0 .0 5 )。结论　UF 1 0 0尿沉渣分析仪检测方法简便、快速 ,无主观因素干扰 ,结果敏感准确、客观可靠 ,是一种有价值的鉴别肾小球性与非肾小球性血尿的过筛试验