肺炎链球菌毒力相关基因licC的活性研究

目的:克隆、表达肺炎链球菌LicC及LicC3′端25个氨基酸缺失片段(记作△LicC)基因;分析、比较目标蛋白活性,证实LicC部分缺失对其活性的影响。方法:通过基因重组技术构建重组质粒pQE80-licC、pQE80-△licC,转化大肠杆菌BL21,异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(IPTG)诱导表达,自建生物荧光技术测定酶活性。结果:成功构建重组表达载体,获得可溶性LicC和LicC截短体蛋白,活性测定表明LicC截短体活性显著低于LicC(P0.05)。结论:自建生物荧光技术测定LicC活性准确、可靠;证实LicC3′端25个氨基酸对其活性有重要影响;提示抑制LicC活性有可能成为一种有效的杀灭耐药肺炎链球菌的措施。     

藤黄微球菌Rpf及其结构域蛋白对结核分枝杆菌生长的影响

目的 表达纯化藤黄微球菌(Micrococcus luteus)复活促进因子(Rpf)及结构域(domain)蛋白,研究其对结核分枝杆菌牛长的影响.方法 诱导表达含有藤黄微球菌Rpf及其结构域基因的融合表达载体pPro-EXHT-Rpf和pPro-EXHT-Rpf domain,在变性条件下对目的 蛋白进行纯化.用不同浓度的纯化蛋白刺激不可培养状态结核分枝杆菌的生长.结果 获得藤黄微球菌Rpf及其结构域融合蛋白的纯度分别为95%和93%,相对分子质量(Mr)大小分别为30×103和12×103,蛋白质含量分别为471 mg/L和337 mg/L.Western blot证实,获得的蛋白为我们所需要的目的 蛋白.所获得的藤黄微球菌Rpf及其结构域融合蛋白能够促进不可培养状态的结核分枝杆菌的生长,而抗藤黄微球菌Rpf结构域的单克隆抗体可以明显抑制结核分枝杆菌的生长.结论 表达的藤黄微球菌Rpf及其结构域融合蛋白可以促进结核分枝杆菌的生长,而且藤黄微球菌Rpf蛋白与Rpf结构域蛋白具有一致的生物活性.     

自助报告打印系统的开发在检验工作流程中的应用

目的：开发自助报告打印系统,用于检验数据管理,简化检验工作流程。方法：在以大型数据库ORACLE为数据管理平台的LIS系统基础上,通过可视化编程语言PowerBuilder9．0编写自助报告打印系统。结果：成功实现自助报告打印系统与LIS的信息交换,打印出具有电子签名的检验报告单。结论：自助报告打印系统在医院中的应用．简化了检验报告发放流程,有效地提高了工作效率。     

近5年医院感染菌群的分布趋势及耐药性分析

目的 了解近5年内医院感染菌群分布和流行趋势及耐药现状,为医院感染的控制和指导临床合理用药提供帮助.方法 常规培养分离鉴定,应用VITEK全自动细菌鉴定分析仪和API鉴定系统鉴定菌株;药敏试验应用K-B纸片扩散法,按CLSI/NCCLS规定的标准进行.结果 从2002-2006年共分离出11 464株病原菌,感染标本主要为痰、分泌物及中段尿,3者之和占各年度的>90.00%;感染菌以铜绿假单胞菌、大肠埃希菌、不动杆菌属、肠球菌属、葡萄球菌属和白色假丝酵母菌为主,分别占各年度分离率的57.02%、64.46%、57.83%、57.49%和60.73%;大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌产ESBLs的阳性率为39.87%～61.98%,对头孢哌酮/舒巴坦和亚胺培南的耐药率分别<14.06%和<0.64%;非发酵菌对头孢哌酮/舒巴坦的耐药率<33.22%;革兰阳性球菌对万古霉素的耐药率<0.34%.结论 非发酵菌已成为现在医院感染的重要病原菌群;铜绿假单胞菌、大肠埃希菌、鲍氏不动杆菌、粪肠球菌、白色假丝酵母菌和耐甲氧西林葡萄球菌(MRS)已成为医院感染的重要流行病原菌;肠杆菌科细菌产ESBLs状况十分严重,且有明显的上升趋势;对MRS引起的重症感染应首选糖肽类抗菌药物;对产酶菌及非发酵菌引起的重症感染,最好根据感染菌群耐药表型及药敏试验结果并密切结合患者的病情,联合应用抗菌药物治疗.     

血液狼疮细胞形态学变化的观察与临床价值

目的：通过观察系统性红斑狼疮患者外周血中狼疮细胞形态学的变化,判断系统性红斑狼疮疾病严重性和活动性的临床意义。方法：采用改良血块法进行了118例系统性红斑狼疮患者狼疮细胞形态的观察,同时用系统性红斑狼疮病情活动性经典生物标记抗体,抗双链DNA抗体、抗核小体抗体及补体作对照比较。结果：狼疮细胞存在有多种典型形态及其结构异常的特殊狼疮细胞,均匀体小至笔尖大至巨核细胞出现裂隙不规则,细胞多聚集成片结构清晰可辨,有的似串葡萄、巨核细胞、双叶、多叶及降落伞等特殊形态。65例系统性红斑狼疮患者特殊型狼疮细胞的检出与抗双链DNA抗体、抗核小体抗体和SLEDAI呈显著正相关,与C3和C4水平呈明显负相关。结论：狼疮细胞特殊形态的观察,对SLE疾病的严重性和活动性判断具有更简便快速,准确可靠优于生物抗体标记法的特殊价值。     

免疫功能低下曲霉菌感染机制的实验研究

目的通过免疫力低下曲霉菌感染动物模型的建立,探讨免疫力低下曲霉菌感染机制。方法兔耳静脉大剂量注射甲泼尼龙造成动物免疫力低下,采用乳胶增强散射比浊法测定免疫功能;通过病理组织切片PAS染色,观察动物感染模型主要脏器的病理改变。结果给实验动物注射甲泼尼龙3d后,可使动物免疫指标下降(与用药前检测值相比);组织病理学结果,曲霉菌感染后,可使心、肺、肝、肾等多脏器发生病理改变,特别是肺脏和肾脏的病理改变,从而导致肺功能和肾功能的衰竭。结论曲霉菌感染可使免疫力低下动物造成多脏器的病理改变;加强免疫功能低下曲霉菌感染机制的研究,对曲霉菌感染的诊断、治疗、预防和控制具有重要的意义。     

耐甲氧西林金黄色葡萄球菌的分布及联合药物体外抗菌活性分析

目的了解110株耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)的分布及联合用药对其体外的抗菌活性,以指导临床治疗MRSA感染合理选择抗菌药物。方法常规方法培养分离细菌,用金黄色葡萄球菌乳胶试剂盒及VITEK-2细菌分析仪鉴定到种,MRSA鉴定应用乳胶凝集试剂盒;利用微量稀释法测定利奈唑胺等5种抗菌药物的物体外抗菌活性,按CLSI规定的标准进行。结果从医院感染的标本中分离获得110株MRSA,ICU分离率为36.4%;110株MRSA对利奈唑胺、万古霉素、替考拉宁均敏感;对左氧氟沙星、利福平耐药率分别为96.3%和71.8%;利福平分别与利奈唑胺、万古霉素、替考拉宁联合FIC<1的协同作用均>74.5%,左氧氟沙星分别与利奈唑胺、万古霉素、替考拉宁联合FIC<1的协同作用均<35.4%;各种联合药物间差异有统计学意义(P<0.01)。结论医院ICU是MRSA感染的重要来源,应对其加强医院感染的监测和控制;利奈唑胺、万古霉素、替考拉宁是治疗MRSA感染的首选药物,对中重度感染患者应参考药敏试验结果及患者的个体情况结合联合药物进行优化治疗。     

多重不对称PCR-电化学芯片技术检测感染性腹泻病原体的临床价值

目的 探索基于多重不对称PCR-电化学芯片技术检测感染性腹泻病原体的临床价值.方法 收集2018年10月至2019年6月该院住院及门诊腹泻患儿标本,以细菌培养鉴定和测序结果作为感染性腹泻病原体诊断的"金标准",采用多重不对称PCR-电化学芯片技术和Film Array gastrointestinal panel法(以...     

通过CRISPR/Cas9技术抑制TFDP3基因对前列腺癌PC3细胞生物学功能的影响

目的:通过CRISPR/Cas9技术构建前列腺癌PC3细胞TFDP3基因敲除的稳转株,探讨抑制TFDP3表达对PC3细胞周期、凋亡、迁移和侵袭能力的影响.方法:通过生物信息学筛选sgRNA,通过CRISPR/Cas9技术、构建抑制TFDP3基因表达的sgRNA-Cas9共转染慢病毒,感染PC3细胞后筛选获取稳转细胞株....