银杏叶提取物对儿童肾病综合征辅助治疗作用的观察

目的　观察银杏叶提取物对儿童肾病综合征辅助临床治疗的作用。方法　将 1999年 10月～ 2 0 0 3年10月收治的小儿肾病综合征 32例 ,随机分为两组。治疗组 18例 ,采用强的松加银杏叶提取物治疗 ,银杏叶提取物剂量为 4 0mgtid× 30天 ;对照组 14例仅给强的松治疗 ,1个月为 1疗程观察疗效。结果　治疗 1个月后 ,治疗组临床症状及血液生化指标等各项指标明显优于对照组 ,如 2 4h尿蛋白、血清胆固醇、甘油三酯与血浆白蛋白等指标均得到明显改善 ,与对照组比较 ,差异有显著意义 (P <0 0 5 ,或P <0 0 1)。结论　银杏叶提取物对儿童肾病综合征治疗有明显疗效 ,尤其在减轻蛋白尿 ,降低血脂 ,提高血浆蛋白等方面 ,对肾脏有保护作用 ,值得临床应用。     

福辛普利对大鼠肾小球系膜细胞增殖及转化生长因子β1表达的影响

目的观察新型血管紧张素转化酶抑制剂（angiotension—converting enzyme inhibitor，ACED——福辛普利（fosinopril，FOS）对脂多糖（lipopolysaccharide，LPS）诱导的大鼠肾小球系膜细胞（glomerular mesangial cell，GMC）增殖及转化生长因子（transforming growth factor，TGF）β1表达的影响。方法建立体外培养大鼠肾小球系膜细胞，鉴定后3～10代用于实验。实验分为5组：对照组（Ctrl组）、脂多糖刺激组（LPS组）、福辛普利高、中、低剂量组（分别为FOS1组、FOS2组和FOS3组），分别于24h和48h两个时间点甲基噻唑基四唑（methyl thiazolyl tetrazolium，MTT）比色法测定各组细胞增殖情况；于6h，12h，24h后酶联免疫测定（enzyme—linked immunosorbent—assay，ELISA）法测定细胞培养上清液中转化生长因子β1蛋白的表达量，荧光半定量RT～PCR法检测转化生长因子β1mRNA表达的变化。结果脂多糖可诱导大鼠肾小球系膜细胞增殖，福辛普利可抑制脂多糖诱导的大鼠肾小球系膜细胞增殖；正常培养的大鼠肾小球系膜细胞均有一定量的转化生长因子β1蛋白分泌和mRNA表达；LPS组在各时间点转化生长因子β1蛋白分泌和mRNA表达均高于Ctrl组（P〈0．01），而FOS1组、FOS2组、FOS3组转化生长因子β1蛋白分泌和mRNA表达均低于LPS组（P〈0．01）。结论脂多糖可诱导大鼠肾小球系膜细胞增殖。福辛普利可抑制脂多糖诱导的大鼠肾小球系膜细胞增殖。福辛普利能够从蛋白水平和mRNA水平抑制脂多糖诱导的大鼠肾小球系膜细胞转化生长因子β1的表达，为福辛普利的肾脏保护作用提供理论依据。     

甘草甜素对大鼠阿霉素肾病的保护作用

目的观察甘草甜素对大鼠阿霉素肾病肾组织层黏连蛋白(laminin,LN)的表达及尿蛋白排泄的影响,探讨甘草甜素对大鼠阿霉素肾病的发生、发展是否具有保护作用。方法18只SD雄性大鼠随机分为3组正常对照组、模型组、甘草甜素治疗组。模型组和甘草甜素治疗组大鼠采用尾静脉注射阿霉素的方法建立阿霉素肾病模型。甘草甜素治疗组予以甘草甜素灌胃8周,正常对照组和模型组大鼠予以等量生理盐水灌胃。检测各组大鼠24h尿蛋白定量及血清肾功能指标。观察各组大鼠肾组织病理学改变。采用免疫组织化学方法检测肾组织LN的表达水平。结果甘草甜素治疗组于用药第4、8周24h尿蛋白定量与同期模型组相比,均有明显改善,差异有统计学意义。甘草甜素治疗组大鼠肾组织病理学改变亦较模型组明显减轻,且肾组织LN的表达亦明显下降,差异有统计学意义。结论甘草甜素对大鼠阿霉素肾病具有一定的保护作用,可以减少尿蛋白的排泄、改善肾功能及减轻肾小球硬化的病理学改变。甘草甜素延缓肾小球硬化的进程,可能与降低肾组织LN的表达从而抑制细胞外基质的积聚相关。     

Podocin在多柔比星肾病大鼠模型中的表达及意义

目的建立多柔比星肾病（ADN）大鼠模型，观察足细胞相关分子podocin在模型不同病理时期mRNA的表达，探讨podocin分子在肾病发生发展过程中的作用。方法雄性sD大鼠48只[体质量（230&#177;20）g，月龄2～3个月]，随机分为模型组和对照组，每组24只。模型组鼠尾静脉注射多柔比星6．5mg／kg，建立ADN模型。对照组注射9g／L盐水。分别于第2、4、6、8周每组各处死大鼠6只。处死前1天收集24h尿液，检测24h尿蛋白，应用光镜和电镜观察各组肾组织病理改变，Trizol法提取肾皮质总RNA，采用实时荧光定量反转录PCR检测其各时间点肾组织podocin mRNA表达。结果模型组大鼠实验第2、4、6、8周均表现为大量蛋白尿，各时间点24h尿蛋白较对照组均明显升高（P。〈0．01），模型组大鼠肾组织病理在肾病早期表现为微小病变型，随着病情进展，第6—8周呈现局灶性节段性肾小球硬化病理表现；电镜下可见模型组随着病变进展，足细胞损伤进行性加重。在病变早期可见足突增宽、融合，晚期足突消失，核固缩等表现。模型组第2周。肾组织podocin分子mRNA表达明显升高（P〈0．01），第4周时下降，第6—8周进一步下降（Pa〈0．05）。结论Podocin分子在肾病综合征发生发展中起重要作用，podocin mRNA表达变化可能与肾病病理类型密切相关。     

银杏叶提取物对肾病患儿外周血单个核细胞中细胞因子mRNA表达的影响

目的 探讨银杏叶提取物对原发性肾病综合征（NS）患儿外周血单个核细胞（PBMC）中炎症细胞因子IL-1、IL-6、IL-8和TNF-α的mRNA表达的影响.方法 将我科2000年10月～2005年3月收治的35例小儿NS患儿随机分为两组,银杏叶组20例,采用泼尼松加银杏叶提取物治疗;激素组15例,采用常规泼尼松治疗.8周为1个疗程,疗程结束后判断疗效.分别于治疗前、后观察临床和生化指标,同时应用酶联免疫吸附试验（ELISA）检测PBMC培养上清液中IL-1、IL-6、IL-8和TNF-α的含量变化;采用原位逆转录聚合酶链反应（In Situ RT-PCR）检测PBMC中IL-1、IL-6、IL-8和TNF-α的mRNA表达情况.结果 治疗8周后,临床症状及血液生化指标明显改善;两组NS患儿PBMC上清液中IL-1、IL-6、IL-8和TNF-α的含量间差别均有显著性意义（P＜0.01）;两组NS患儿PBMC上清液中IL-1、IL-6、IL-8和TNF-α的mRNA表达量间差别亦均有显著性意义（P＜0.01）;35例患儿治疗前mRNA均呈强阳性表达,治疗后表达强度降低.结论 银杏叶提取物对PBMC中IL-1、IL-6、IL-8和TNF-α蛋白及其mRNA表达有明显的抑制作用,银杏叶提取物治疗NS安全、有效,辅助激素治疗值得临床应用.     

转化生长因子-β_1/Smad信号通路在肾小球系膜细胞的表达及血管紧张素转化酶抑制剂对其影响

目的探讨转化生长因子(transforming growth factor,TGF)-β1/Smad信号传导通路在肾小球系膜细胞(glomerular measanial cell,GMC)中的作用,观察血管紧张素转化酶抑制剂(angiotensin-converting enzyme inhibitor,ACEI)福辛普利(fosinopril,Fos)在该通路中对磷酸化Smad2/3(phosphorylationSmad2/3,P-Smad2/3)和Ⅰ型胶原蛋白(collagenⅠ,ColⅠ)表达的影响,阐明福辛普利的肾保护作用机制。方法采用经典方法进行大鼠肾小球系膜细胞复苏、培养和传代后,将其按处理方式分为3组:TGF-β1组(TGF-β15ng/mL处理);②Fos组(TGF-β15ng/mL+Fos1×10-4mol/L处理);③对照组(空白)。甲基噻唑基四唑(methyl thiazolyl tetrazolium,MTT)比色法分别检测3组肾小球系膜细胞增殖光密度(optical density,OD)值,计算细胞抑制率;间接免疫荧光法检测磷酸化Smad2/3表达情况;酶联免疫吸附测定(enzyme linkedi mmunosorbent assay,ELISA)法测定Ⅰ型胶原蛋白的变化,计算抑制率。结果各时间点肾小球系膜细胞增殖荧光强度比较,TGF-β1组明显高于对照组,Fos组低于TGF-β1组,差异有显著意义(P<0.05)。磷酸化Smad2/3在对照组仅极微量表达,TGF-β1组在刺激30min后,荧光强度显著增强,且集中于细胞核。与TGF-β1组相比,Fos组磷酸化Smad2/3表达下降,细胞荧光强度较弱,差异有显著意义(P<0.05)。对照组Ⅰ型胶原蛋白仅少量基础性分泌。与对照组相比,TGF-β1组在各时间点Ⅰ型胶原蛋白分泌量显著上升,差异有显著意义(P<0.05);与TGF-β1组比较,Fos组Ⅰ型胶原蛋白在15min和6h的表达量比较,差异无显著意义(P>0.05);在12h和24h比较,差异有显著意义(P<0.05)。结论人重组转化生长因子-β1能激活体外培养的大鼠肾小球系膜细胞磷酸化-Smads表达,并激活转化生长因子-β/Smads信号途径,该途径激活能致Ⅰ型胶原分泌增多,并能诱导肾小球系膜细胞增殖,其作用呈一定的时间依赖性关系。福辛普利能部分阻断转化生长因子-β/Smads信号传导通路在大鼠肾小球系膜细胞的激活,抑制Ⅰ型胶原分泌及肾小球系膜细胞增殖,其抑制作用呈一定的时间依赖性关系。     

儿童肾病综合征血小板参数与肾损害的分析

目的 探讨儿童肾病综合征(NS)的血小板相关参数与肾功能损害的关系.方法 选择168例NS患者作为观察组,根据估算肾小球滤过率(eGFR)分期分为3组,选健康儿童100例为对照组.检测各组血常规、肝肾功能等,采用SPSS 21.0软件进行统计分析.结果 ①观察组患儿与对照组比较,血小板总数(PLT) [(407.38±114.53)×109/L∶(312.44±120.98)×109/L]升高,血小板平均容积(MPV)[(9.36±0.83) fl∶(9.62±0.88)fl]降低,差异有统计学意义(P＜0.05);②PLT、MPV、血小板分布宽度(PDW)在肾功能3个分期比较差异无统计学意义(P＞0.05).结论 儿童NS患者的PLT、MPV较健康儿童升高.     

PLCE1 基因突变致激素耐药型肾病综合征1 例报告并文献复习

目的分析PLCE1基因突变致激素耐药型肾病综合征(SRNS)的临床特征和基因变异特点。方法回顾分析1例确诊的由PLCE1基因突变致SRNS患儿的临床资料,并复习相关文献。结果女性患儿,8岁11月龄,确诊原发性肾病综合征6年余,激素耐药型,病理为局灶节段性肾小球硬化(FSGS)。肾病综合征相关基因检测发现,患儿PLCE1基因存在2个杂合错义变异 c.577GA(p.V193I)和c.2770GA(p.G924S);Sanger 测序验证显示c.577GA(p.V193I)来自患儿母亲(杂合状态),患儿父母均无c.2770GA(p.G924S)变异,为新发变异。这2个变异均为已有报道的致病性突变。结论 PLCE1基因变异可导致常染色体遗传型SRNS。     

慢性肾衰竭20例临床特点

目的　总结慢性肾衰竭 (CRF)的临床特点 ,探讨慢性肾衰竭经济有效的治疗方法及预后。方法　收集 1994年 1月～ 2 0 0 3年 12月我科住院CRF 2 0例患儿的临床资料 ,对其病因、临床表现、治疗过程及预后进行回顾性分析。结果　引起CRF的主要疾病是慢性肾小球肾炎、肾病综合征、狼疮性肾炎和肾发育畸形等。其临床表现多为电解质紊乱、代谢性酸中毒、肾性贫血和生长发育迟缓等。原发疾病治疗主要应用激素 免疫抑制剂 ,大多数同时予重组人红细胞生成素、阿法骨化醇和钙剂等 ;采取血液透析和腹膜透析 ,采用定期持续性非卧床腹膜透析 (CAPD)患儿生存率较高。结论　CRF临床表现呈多样性 ,早期诊断、有效干预、综合治疗能取得较好疗效 ,CAPD是一种经济有效的长期治疗手段     

甘草甜素对阿霉素肾病大鼠尿蛋白的影响

目的观察甘草甜素(GL)对阿霉素肾病大鼠尿蛋白的排泄及肾功能的影响,探讨GL对阿霉素致大鼠肾损害是否具有保护作用。方法将18只SD雄性大鼠建立阿霉素肾病模型,并随机分为对照组、模型组和治疗组。治疗组在第1次注射阿霉素后开始予GL(200mg/kg)灌胃,每日1次,共8周。观察2,4,6,8周各时间点大鼠24 h尿蛋白排泄情况,检测血浆白蛋白(ALB)、尿素氮(BUN)、肌酐(Cr)、胆固醇(CH)等生化指标。结果治疗组于实验第2周即显示出良好的降尿蛋白作用,以后各时间点24 h尿蛋白定量较模型组均明显下降(P<0.01),实验8周治疗组血生化指标较模型组明显改善(P<0.01)。结论在阿霉素致大鼠肾损害的发生发展过程中,GL显示了良好的减少尿蛋白的排泄、升高血浆ALB、降低血浆CH、改善肾功能的作用,提示GL对阿霉素肾病大鼠肾损害有保护作用。