不稳定型心绞痛患者介人术后对比剂肾病的危险因素

目的探讨不稳定型心绞痛患者冠状动脉(冠脉)介入诊断及治疗术后对比剂肾病(CIN)的发生率及危险因素。方法连续入选2007年1～8月因不稳定型心绞痛入院并接受择期冠脉介入手术的患者232例。排除标准:(1)血压<120/70 mm Hg;(2)心功能(NYHA)分级>Ⅲ级。术中使用低渗非离子型对比剂碘普罗胺。介入术后24～72 h血肌酐(Scr)较基础值增高25%或44.2 μmol/L定义为CIN。分析CIN发生率与各项危险因素的相关性。结果 CIN总发生率为14.7%。冠脉钙化、术前Scr水平≥132.6 μmol/L、内生肌酐清除率(Ccr)<60 ml/min、NYHA Ⅲ级、糖尿病及年龄≥70岁的患者CIN发生率均明显增高。多变量回归分析显示,基线Scr≥132.6μmol/L、Ccr<60 ml/min、NYHA Ⅲ级与CIN的相关性最强。结论不稳定型心绞痛患者接受冠脉介入术后CIN是常见的并发症;高龄、肾功能不全、心功能不全、糖尿病及造影发现冠脉钙化是CIN发生的危险因素。     

急性乙型肝炎HBcAg特异性CTL克隆建立及初步分析

目的建立急性乙型肝炎（乙肝）患者的HBcAg特异性CD8^＋T细胞克隆。方法一例急性乙肝患者经用序列特异引物聚合酶链反应分型技术,测得其人类白细胞抗原（human leukocyte antigen,HLA）-A基因型为1101,其外周血单个核细胞采用重组HHBcAg和合成的HLA—A＊1101限制性表位肽（HBV croe88—96）刺激,并以有限稀释法对活化的T细胞进行克隆化,建立HBcAg特异性的CD8^＋T细胞克隆。用免疫荧光染色、流式细胞术以及乳酸脱氢酶释放实验鉴定所获克隆。结果获得13株HBcAg＋特异性CD8^＋咖胞克隆（6侏为Tc1,3株为Tc2,4株为Tc0）。其中12株具有明显的特异性细胞毒沂陛（37．5％-85．5％,效／靶比为2．5：1）,1株（A10株,Tc0）细胞毒活性仅为10．2％。结论应用HLA—A＊1101限制性表位肽（HBV croe88—96）刺激急性乙肝患者的外周血单个核细胞,建立了13株肽表位特异性的CD8^＋T细胞克隆,为进一步研究打下基础。     

Tom-1基因在糖尿病胰岛素抵抗患者网膜脂肪组织表达定量研究

目的探讨Tom-1基因在2型糖尿病胰岛素抵抗(T2DM-IR)患者网膜脂肪组织表达水平。方法取T2DM-IR患者与非糖尿病无IR者(对照组)网膜脂肪组织,用荧光定量RT-PCR技术测定Tom-1 mRNA的表达量。结果Tom-1 mRNA的表达量在T2DM-IR组为4440±617拷贝/百万看家基因,对照组为1360±82拷贝/百万看家基因,两者比较差异有统计学意义(P<0.05)。结论在人腹腔网膜脂肪组织中Tom-1 mRNA有表达,在T2DM-IR组呈上调表达。因此,这条基因可能与T2DM的IR有关。     

慢性HBV感染者CD8^＋ T细胞免疫反应的研究

目的观察不同慢性HBV感染者外周血CD8^＋ T细胞的细胞内毒性颗粒和细胞因子的表达水平。方法用rHBcAg作为刺激剂,采用免疫荧光染色结合流式细胞术分析慢性乙型肝炎中度、重度患者以及无症状HBV携带者外周血CD8^＋ T细胞的IFN-γ/IL-4和穿孔素/颗粒酶B表达水平。结果慢性乙型肝炎重度患者CD8^＋T细胞的穿孔素及颗粒酶B百分率显著高于正常对照（P〈0.01）和HBV携带者（P〈0.05,P〈0.01）,中度患者显著高于正常对照（P〈0.05）。2组慢性乙型肝炎IFN-γ＋/CD8^＋ T细胞（Tc1）百分率均高于正常对照和HBV携带者（P〈0.05）。HBV携带者CD8^＋T细胞的穿孔素和颗粒酶B表达以及Tc1百分率与健康对照差异无统计学意义。IL-4^＋/CD8^＋ T细（Tc2）表达各组间差异无统计学意义（P〉0.05）。结论 CD8^＋ T细胞中穿孔素/颗粒酶B表达率的增加以及Tc1细胞增加与慢性HBV感染的肝损伤有关。     

联合应用缬沙坦和雷米普利对心脑血管组织血管紧张素Ⅱ受体的影响

目的探讨小剂量联合应用血管紧张素Ⅱ1型受体阻滞剂(ARB)缬沙坦和血管紧张素转化酶抑制剂(ACEI)雷米普利对自发性高血压大鼠(SHR)体内血管紧张素Ⅱ1型受体(AT1R)和2型受体(AT2R)基因表达的影响及该方法治疗高血压的可行性。方法7～8周龄雄性SHR大鼠24只,WKY大鼠8只。SHR大鼠分成4组,每组6只。其中3组分别用缬沙坦30mg/(kg.d),雷米普利1mg/(kg.d)和缬沙坦15mg/(kg.d)+雷米普利0.5mg/(kg.d)灌胃。3月后,分别测定血压、心质量与体质量比值、血浆血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)值,血清一氧化氮(NO)值及心肌组织NO值。应用心肌胶原纤维特殊染色法及图像分析评估大鼠心肌纤维化程度。用RT-PCR方法测定各组大鼠左室心肌,主动脉及脑组织ACEmRNA、AT1RmRNA和AT2RmRNA表达情况。结果联合应用半量的缬沙坦和雷米普利比单用组更全面抑制了SHR心肌、主动脉和脑组织中AT1RmRNA和ACEmRNA的表达(AT1RmRNA:P<0.01vs雷米普利组;ACEmRNA:P<0.01vs缬沙坦组)。联合组明显提升了AT2RmRNA与AT1RmRNA比值(约为SHR组、WKY组或雷米普利组3～4倍),增高了局部心肌组织NO的含量[联合组(7.2±1.2)vsSHR组(4.7±1.2),P<0.05]。结论小剂量联合应用缬沙坦和雷米普利比单用组在高血压治疗方面获益更大。     

结核分枝杆菌RD1区rv3873基因的原核表达及其产物的细胞免疫特性初步分析

目的克隆表达结核分枝杆菌RD1区Rv3873蛋白并初步分析其细胞免疫特性。方法应用PCR技术扩增rv3873基因,插入表达载体pET30a(+),构建原核表达重组质粒pET-Rv3873,重组质粒在宿主菌BL21(DE3)诱导表达,利用表达的蛋白腹腔注射免疫小鼠,以细胞增殖和ELISPOT试验测定融合蛋白的细胞免疫应答。结果克隆的rv3873测序与已发表序列100%同源,融合蛋白大小43ku,淋巴细胞增殖实验显示该蛋白能引起小鼠T细胞免疫反应,ELISPOT实验结果表明多肽pep3873刺激特异性IFN-γ分泌细胞多于IL-4分泌细胞。结论成功地克隆表达了Rv3873蛋白,并发现该蛋白具有良好的细胞免疫特性。     

不同麻醉方式对老年肺癌患者围手术期认知功能的影响

目的探讨硬脊膜外阻滞麻醉或全身麻醉方式对老年肺癌患者围手术期认知功能的影响。方法将93例60岁以上需择期行肺癌根治术的患者根据麻醉方式分为硬脊膜外阻滞麻醉组(观察组,46例)和全身麻醉组(对照组,47例),采用简明精神状态量表(MMSE)评估患者术前1 d、术后6 h、术后1、3、7 d的认知功能,并检测患者术前10 min、术毕30 min、术后1 d及术后3 d血清S100-β蛋白水平。结果不同的麻醉方式及术后不同时间,患者的MMSE评分差异有统计学意义,且麻醉方式和术后时间之间存在交互效应;术后6 h两组患者的MMSE评分均出现明显下降趋势(观察组:P=0.000;对照组:P=0.000);对照组术后6 h及术后1 d的MMSE评分均明显低于观察组(6 h:P=0.003;术后1 d:P=0.007);观察组术后6 h发生术后认知功能障碍(POCD)的比例明显低于对照组(13.0%vs 31.9%,P=0.030)。术后不同时间患者血清S100-β蛋白水平有显著差异,术后30 min两组患者的血清S100-β蛋白水平相比术前10 min均出现明显升高(观察组:P=0.010;对照组:P=0.000),但两组间血清S100-β蛋白水平在术后不同时点无明显差异。结论硬脊膜外阻滞麻醉方式对老年肺癌患者的术后认知功能影响较轻,患者POCD发生率低,术后认知功能恢复较快。     

scFv-DEC205-Trap重组包涵体靶向抗原复性及过程的优化北大核心CSCD

目的:疫苗防治将成为金黄色葡萄球菌防控的主要方式,如何解决靶向亚单位疫苗生产中包涵体靶向抗原的复性问题,将是蛋白亚单位疫苗生产的核心问题。方法:构建靶向树突状细胞DEC205受体的金黄色葡萄球菌重组scFv-DEC205-Trap质粒进行PCR、测序鉴定,IPTG诱导表达。对表达后形成的包涵体各项溶解条件:溶液、溶解温度、溶解时间以及是否振荡进行单因素优化;对复性缓冲液的不同添加剂和稀释浓度进行条件优化,最大限度提高包涵体蛋白复性率,Western blot检测复性蛋白抗原性。结果:离心力大于400 g,离心3 min以上,96%的包涵体蛋白沉降;含8 mol/L的尿素溶液在4~40℃溶解0.5 h以上可使包涵体蛋白充分溶解;3 mol/L精氨酸的100 mmol/L Tris-HCl缓冲液稀释5倍复性率最高,抗原性好。结论:实验证明通过适宜的溶解条件和复性条件可以从表达包涵体中获得良好抗原性的重组靶向抗原。     

妊娠糖尿病孕妇HbA1c水平与血清维生素含量相关性分析

目的 探讨妊娠期糖尿病(GDM)孕妇糖化血红蛋白(HbA1c)与血清维生素水平的关系.方法 2015年12月至2017年12月选取四川省三台县人民医院定期产检的妊周28～ 30周单胎GDM孕妇197例为研究对象,选取空腹血糖(FPG)、HbA1c均正常的40例孕妇作为对照组.①检测两组FPG、HbA1c、空腹胰岛素水平(FINS)、维生素A(Vit A)、维生素E(Vit E)、维生素D(25-OH-D)水平及维生素D分型(25-OH-D2,25-OH-D3);比较两组稳态模式下胰岛素抵抗指数(HOMA-IR)、胰岛素敏感性指数(HOMA-IS)、胰岛β细胞功能指数(HOMA-β)、早相胰岛素分泌指数(△I30/△G30)等指标.②根据GDM孕妇HbA1c水平不同分为正常HbA1c组(HbA1c为0％~6％,126例)和高HbA1c组(HbA1c≥6％,71例),比较两组Vit A、Vit E、25-OH-D水平与维生素D缺乏率.③采用多元逐步回归分析评价HbA1c与FPG、FPG、VitA、Vit E、25-OH-D、HOMA-IR、HOMA-IS、HOMA-β、△I30/△G30指标相关性.结果 ①GDM组孕妇HbA1c、FINS、FPG、HOMA-IR高于对照组(=0.037、0.629、0.064、0.141,均P＜0.05),25-OH-D低于对照组(t=0.095,P＜0.01).②GDM孕妇正常HbA1c组25-OH-D水平高于高HbA1c组(t=-0.107,P＜0.01);25-OH-D分型比较,正常HbA1c组25-OH-D2,25-OH-D水平均高于高HbA1c组,且两组25-OH-D2,25-OH-D水平缺乏率比较差异均有统计学意义(x2=1.286、1.390,均P＜0.01).③多元逐步回归分析结果显示,HbA1c与HOMA-IR、FINS、FPG、25-OH-D独立相关(β=-0.297、0.084、0.150、0.316,P＜0.01).结论 GDM孕妇糖化血红蛋白水平能客观反映孕妇血糖状态,并且与25-OH-D水平相关;25-OH-D2缺乏可能导致其体内胰岛素抵抗水平增高.