炭疽杆菌致死因子LF253的制备及活性分析

目的 :制备具有生物学活性的重组致死因子253(lethal factor 253,LF253)抗原,获得纯化的目的蛋白,检测其与全分子致死因子(lethal focfor,LF)蛋白竞争性结合保护性抗原(protective antigen,PA)的能力。方法:PCR扩增致死因子LF253片段的DNA,将目的基因插入p ET-28a(+)表达载体中,利用大肠杆菌BL21(DE3)作为宿主菌,IPTG诱导重组蛋白表达,通过His标签亲和层析柱获得目的蛋白,Western blot和ELISA法检测蛋白抗原性,Biacore T-100测定重组蛋白与保护性抗原PA结合的亲和力,细胞毒性实验检测其生物学活性。结果:成功构建原核表达载体p ET-28a/LF253,诱导获得重组蛋白s LF253的表达。Western blot和ELISA检测结果证实,该重组蛋白具有良好抗原特异性;细胞毒实验结果表明,重组蛋白可在体内外中和致死毒素引起的生物学效应。结论:本研究制备的融合蛋白s LF253能够与保护性抗原PA结合,可竞争性抑制LF全分子蛋白与PA的聚合,阻断炭疽毒素的致死作用,为今后炭疽疫苗等药物的研发奠定了基础。     

基于问题学习教学法联合循证口腔医学应用于儿童口腔教学中的设想

儿童口腔医学临床实习教育时期是学生从课堂的理论知识学习到独立进行临床实际操作的过渡时期,这一时期的教育对今后能否培养出合格的儿童口腔医师十分关键,为此,引入国外先进的教学理念、教学方法是必然趋势。文章将基于问题学习教学法联合循证口腔医学如何应用于儿童口腔医学临床实习期教育做一探讨,诣在培养出高质量的儿童口腔科医师,以适应社会需求。     

抗炭疽毒素保护性抗原单克隆抗体的制备及功能分析

目的:原核表达炭疽杆菌保护性抗原PA10蛋白,制备单克隆抗体,并进行功能分析?方法:人工合成炭疽杆菌保护性抗原PA10编码基因并克隆入pUC57载体,酶切鉴定后,将PA10编码基因插入原核表达载体pColdⅡ中,测序验证正确后转化至大肠杆菌BL21(DE3),在IPTG和低温条件下诱导蛋白表达,SDS-PAGE验证产物;用HiTrap IMAC HP柱纯化重组蛋白,Western blot进一步验证?以纯化获得PA10重组蛋白为抗原,常规程序免疫BALB/c小鼠,制备单克隆抗体,并检测所制备抗体的中和活性?结果:获得的PA10重组蛋白免疫小鼠制备单克隆抗体,最终获得了4株特异性的单克隆抗体(分别命名为2G8?5A8?7B3? 9C9)?经体外炭疽毒素保护试验证实,其中1株单抗(7B3)具有较强的中和活性,其保护率可高达96%?结论:本文成功构建并表达炭疽杆菌保护性抗原PA10,制备了具有中和活性的抗PA单克隆抗体,为构建人源化的抗PA中和抗体奠定基础,从而有望用于炭疽病的治疗?     

互动式与提问式教学相结合在外科教学查房中的应用

目的：探讨互动式与提问式教学相结合在外科教学查房中应用的效果。方法：将互动式与提问式教学这两种形式有机的融合进外科教学查房中。检验其教学效果。结果：改良模式教学组临床能力的测验分数高于传统模式教学组。学生的主观评价：改良教学模式更有利于综合能力的培养。结论：互动模式与提问模式相结合的外科教学查房可以更好的培养学生的临床综合能力。     

维生素D受体基因多态性与青海地区藏族绝经后女性骨质疏松性骨折易感性的关系

目的 探讨维生素D受体（VDR）基因多态性与青海地区藏族绝经后女性骨质疏松性骨折易感的关系。方法 选取2018年2月—2020年6月青海省人民医院收治的205例藏族绝经后女性骨质疏松性骨折患者作为观察组。另选取同期该院体检的209例藏族绝经后无骨质疏松女性作为对照组。采集两组外周静脉血,TaqMan探针SNP基因型技术检测VDR BsmⅠ、ApaⅠ、TaqⅠ、FokⅠ位点多态性,分析VDR基因多态性与青海地区藏族绝经后女性骨质疏松性骨折易感的关系。结果 两组Bsml、FokⅠ位点基因型、等位基因分布比较,差异有统计学意义（P <0.05）,两组ApaⅠ、TaqⅠ位点基因型、等位基因分布比较,差异无统计学意义（P >0.05）。Bsml位点bb基因型［R=1.924（95% CI：1.735,2.203）］、Bb基因型［R=1.739（95% CI：1.602,1.867）］骨质疏松骨折患病风险度较BB基因型明显增加,b等位基因［R=2.521（95% CI：2.203,2.863）］骨质疏松骨折患病风险度较B等位基因明显增加。FokⅠ位点ff基因型［R=1.903（95% CI：1.721,2.163）］、Ff基因型［R=1.541（95% CI：1.409,1.720）］骨质疏松骨折患病风险度较FF基因明显增加,f等位基因［R=2.021（95% CI：1.813,2.363）］骨质疏松骨折患病风险度较F等位基因明显增加。观察组VDR Bsml、FokⅠ位点不同基因型患者腰椎、股骨颈、全髋骨密度值比较,差异有统计学意义（P <0.05）,ApaⅠ、TaqⅠ位点不同基因型之间腰椎、股骨颈、全髋骨密度值比较,差异无统计学意义（P >0.05）。Spearman相关性分析显示,VDR Bsml基因型与腰椎、股骨颈、全髋骨密度值呈负相关（r_s =-0.765、-0.783和-0.836,均P <0.05）,FokⅠ基因型与腰椎、股骨颈、全髋骨密度值呈负相关（r_s =-0.805、-0.751和-0.817,P <0.05）。单因素Logistic回归分析结果显示：吸烟［R=1.486（95% CI：1.209,1.825）］、运动水平［R=1.456（95% CI：1.183,1.793）］、饮食习惯［R=1.237（95% CI：1.072,1.428）］、BsmI位点多态性［R=1.654（95% CI：1.187,2.303）］、FokⅠ位点多态性［R=1.603（95% CI：1.188,2.164）］是青海地区藏族绝经后女性骨质疏松性骨折的危险因素（P <0.05）。多因素Logistic回归结果显示：未摄入足够钙制品［R=1.223（95% CI：1.021,1.464）］、BsmI位点多态性［R=1.603（95% CI：1.870,1.997）］、FokⅠ位点多态性［R=11.886（95% CI：1.169,1.764）］是青海地区藏族绝经后女性发生骨质疏松性骨折的危险因素（P <0.05）。结论 VDR Bsml、FokⅠ位点多态性可能与青海地区藏族绝经后女性骨质疏松性骨折易感有关,Bsml位点bb、FokⅠ位点ff是绝经后骨质疏松性骨折易感基因型。     

miR-95-5p靶向BMP2调控脂肪干细胞成骨分化的作用及机制

目的 研究miR-95-5p靶向骨形态发生蛋白2(BMP2)调控脂肪干细胞(ADSCs)成骨分化的作用及机制.方法 培养ADSCs并分为转染阴性对照(NC)的miR-NC组及转染miR-95-5p mimic的miR-95-5p组,成骨诱导分化后采用试剂盒检测碱性磷酸酶(ALP)活力,显微镜检测ALP染色,采用茜素红染...     

美国 INVIVO公司 TVS型监护仪维修 2例

美国 TVS型多功能监护仪是美国 INVIVO RESEARCHINC公司产品, 可监测心电、无创血压、血氧饱和度、脉搏、呼吸、体温、有创血压等参数, 其硬件电路包括有电源部分 (AB06L、 AB06W)、主处理板部分 (AB30)、矢量逻辑板 (AB06C)、矢量模拟板 (AB06C)、信号处理板 (AB06F1)、血压测试板 (AB06DJ)、有创血压板 (AB06S)、血氧饱和度测试板 (AB36)、心电测试部分 (AB06E、 AB06K)、体温和呼吸测试板 (AB06T)、偏转放大器 (AB06H)、显示器 CRT、 CRT外围电路板 (AB06J1)、高压包 (AS47)、打印驱动板 (AB06LL)及打印机 (AR41)等 .     

扶阳利水汤治疗慢性肺原性心脏病并心衰32例

扶阳利水汤治疗慢性肺原性心脏病并心衰３２例福建省人民医院（福州３５０００４）郑峰指导沈宗国１９８９～１９９３年，笔者采用自拟扶阳利水汤治疗慢性肺原性心脏病并充血性心力衰竭，临床观察３２例，取得较好疗效，现总结如下。临床资料病例选择按１９７７年全国第二...     

不行肠道准备的I期肠段切除在左半大肠癌并肠梗阻的应用

本文报道不行肠道准备的Ｉ期肠段切除吻合术左半大肠癌合并急性肠梗阻１２例，方法为：术前、术中及术后３－５天静脉滴注头孢哌酮４ｇ加灭滴灵１ｇ，不作任何肠道准备。如肠内容物多，肠腔内压力大，则将粪便挤入拟切除的肠段内。或用吸收器直接吸出，注意吻合口血运良和１层全层无张力缝合。结果良好。１２例无手术死亡，无吻合口瘘，无伤口感染发生。仅１例因低蛋白血症，贫血的老年病人伤口裂开，显示该术式是处理左半大肠癌合并     

纽邦 E100I呼吸机故障维修 4例

纽邦 E100I型呼吸机是气动电控型多功能呼吸机,它采用独特的双气路供气系统,即自主呼吸气流系统和机械呼吸气流系统。电路系统由一个 8位微处理器和其外围电路组成,完成协调整机的工作和显示、报警功能。具有辅助 /控制呼吸 (A/C)、同步间歇指令呼吸 (SIMV)、自主呼吸等主要呼吸方式。运用多种经精确定标的控制器,可实现呼吸频率、流量、吸气时间、呼气末正压 /持续气通正压和氧浓度的任意调节。可采用压力恒定、时间切换,也可采用容量限定、时间切换。因此可适用于呼吸支持,也可用于呼吸治疗。在年龄上可适用于婴幼儿到成人。在呼气相内能提供一个连续新鲜气流,从而可以减少呼吸管道内的机械死腔,同时还可达到漏气补偿。另外,通过这一气流可稀释患者呼吸管道内二氧化碳的浓度。可实现压力平台通气方式,峰压低且可调控,不易造成气压伤,对循环系统干扰小,且有利于气体进入阻力大的肺泡,得以改善通气血流的比例失调,减少肺内分流、提高氧和,特别适用于慢阴肺病人。有一全面而简单的报警系统,可对气道压力过低或过高、气源动力不足、呼吸管路联接不全以及吸气时间调节不当等提供声光报警。