2型猪链球菌中国强毒株znuA基因的原核表达及免疫学活性分析

目的克隆2型猪链球菌高亲和力锌吸收蛋白(High-affinity zinc uptake system protein,ZnuA)编码基因并进行原核表达,研究ZnuA蛋白的免疫学活性。方法采用PCR法,从2型猪链球菌中国强毒株05ZYH33基因组扩增基因znuA,构建重组表达质粒pET32a::znuA,转化E.coli BL21(DE3),筛选阳性转化子进行IPTG诱导表达,SDS-PAGE鉴定表达产物;His亲和层析柱纯化重组蛋白;Western blot检测ZnuA蛋白的免疫原性;重组蛋白免疫新西兰兔后收集多抗血清,间接ELISA检测多抗血清效价。结果构建的重组质粒在宿主菌中可高效表达,His亲和层析柱纯化获得较高纯度的重组蛋白;Western blot结果表明ZnuA蛋白具有良好的免疫原性;重组蛋白免疫新西兰兔后获得高效价的多抗血清。结论在原核系统中成功地表达了znuA基因编码的蛋白,且ZnuA重组蛋白具有良好的免疫原性,为进一步研究znuA基因在猪链球菌致病过程中的作用以及猪链球菌疫苗的开发奠定了基础。     

关于脑卒中偏瘫康复护理的研究进展

脑卒中是导致人类死亡的三大疾病之一,在我国,发病率约为120～180/10万人。现幸存的脑卒中患者中有超过80%丧失劳动能力,15%存在,重度残疾。因此,脑卒中严重威胁人类的健康和生活质量。而早期康复介入能大大改变脑卒中后遗症状况,可显著降低致残率。因此系统有效的康复护理方法,对提高脑卒中患者的生存率和降低致残率有着极其重要的意义。     

纽邦E360呼吸机的工作原理及临床应用

介绍了纽邦E360新型呼吸机的气路组成和电路部分的基本工作原理,阐述了该呼吸机在临床上的应用。对该呼吸机气路部分采用的双路伺服气体传送系统（空/氧气各为一路）、整机安全系统和电路系统等主要部分的工作原理进行了研究和技术分析,为医院设备科工程师学习和维修提供了参考。     

沈宗国应用青龙五子汤治疗慢性支气管炎经验

沈宗国教授认为慢性支气管炎（以下简称“慢支”）的致病因素以外感六淫及内生痰、饮、火、瘀为主。青龙五子汤乃小青龙汤合三子养亲汤加葶苈子、蛇床子而成,沈教授以宣肃肺气、化痰散饮为治疗大法,以青龙五子汤治疗慢性支气管炎疗效显著,深受患者肯定,值得学习和借鉴。     

CT和MRI诊断先天性成人多囊肾病的价值观察

目的 探讨计算机断层扫描(CT)和磁共振(MRI)对先天性成人多囊肾病(ADPKD)的诊断价值。方法 选取2017年1月至2020年3月本院确诊的先天性成人多囊肾病患者74例,所有患者均采用CT与MRI进行检测,以穿刺组织活检或手术结束后,以病理诊断结果 为金标准,比较两组CT、MRI影像学表现与诊断结果 。结果 ADPKD患者肾脏CT影像结果 表现为宽径范围为7.10cm～8.93cm,长径范围为16.64cm～22.07cm,平均CT值为(7.45±1.33)HU;钙化33例,结石9例,出血5例,合并多囊肝14例;MRI检查显示T₁WI呈低信号,T₂WI呈高信号时,存在数量不一、大小不等的不规则囊肿性信号影;T₁WI与T₂WI呈等信号时,囊肿壁边界清晰,肾区未有正常肾盂结构;CT与MRI联合检测的阳性检出率与灵敏度显著高于CT、MRI单项检测(P<0.05),CT与MRI联合检测的漏诊率显著低于CT、MRI单项检测(P<0.05)。结论 CT结合MRI对ADPKD具有更为精准的诊断,...     

2型猪链球菌酪氨酸激酶Cps2C基因过表达株的构建

目的 构建2型猪链球菌酪氨酸激酶Cps2C基因过表达株,为cps2C基因功能研究提供实验材料。方法 使用重叠延伸PCR技术将延伸因子TufA(又名EF-Tu,编码基因为SSU05＿0530)的启动子(命名为P0530)与cps2C基因连接为P0530cps2C片段,将P0530cps2C酶切后连接至猪链球菌-大肠埃希菌穿梭质粒pSET2,构建过表达质粒pSET2::P0530cps2C。将pSET2::P0530cps2C电转化导入S.suis 2野生毒株05ZYH33感受态细胞,抗性及组合PCR筛选得到cps2C过表达株。qRT-PCR检测过表达株cps2C基因的转录水平。结果 重叠延伸PCR成功将P0530启动子片段(300 bp)和cps2C基因片段(696 bp)拼接为P0530cps2C(996 bp),片段及载体经BamH I和EcoR I酶切后连接,成功构建出过表达质粒pSET2::P0530cps2C;将pSET2::P0530cps2C电转化导入S.suis 2 05ZYH33感受态细胞,抗性筛选及组合PCR检测结果显示cps2C过表达株构建成功。提取野生株05ZYH...     

紫苏叶提取物对3T3-L1脂肪细胞的影响

目的探讨紫苏叶提取物(Perillae folium extract,PFE)对3T3-L1脂肪细胞的影响。方法将3T3-L1脂肪细胞培养在不同浓度的PFE(100,250和500μg/ml)中,通过MTS法测定PFE的无毒性细胞浓度,通过Western blot法测定过氧化物酶体增殖物激活受体-γ(PPAR-γ)和CAAT/增强子结合蛋白α(C/EBPα)的蛋白表达水平变化,通过RT-PCR法测定PPAR-γ、C/EBPα、固醇调节元件结合蛋白1C(SREBP-1c),硬脂酰辅酶脱氢酶1(SCD1),脂肪酸合成酶(FAS),甘油-3-磷酸酰基转移酶(GPAT)和肉碱棕榈酰转移酶1(CPT1)等基因的mRNA表达水平变化。结果通过MTS法得出PFE的无毒性细胞浓度。在Western blot实验中,PPAR-γ和C/EBPα蛋白量的表达随着PFE浓度的升高而减少。在RT-PCR结果中,PPAR-γ、C/EBPα、SREBP-1c和GPAT等基因的表达随着PFE浓度的升高而减少,SCD1和FAS的基因表达水平也降低,CPT1基因的表达水平是随着PFE的浓度而逐渐增加的。此结果说明PPAR-γ和C/EBPα的基因和蛋白表达是受到抑制的。结论 PFE是通过抑制PPARγ、C/EBPα和SREBP1及其靶基因的表达影响脂肪细胞的生成及形成,调节脂肪组织脂质代谢,对以后研究肥胖症具有一定的参考意义。     

草苁蓉提取物对HepG2细胞氧化应激损伤的保护作用

  目的  探讨草苁蓉环烯醚萜苷（IGBR）对二乙基亚硝胺（DEN）诱发大鼠肝癌细胞凋亡的影响及其可能作用机制。  方法  Wistar雄性大鼠随机分为对照组和模型组、5–氟尿嘧啶（5-FU）组、IGBR组,除对照组外,其余大鼠第1天给予腹腔注射DEN 200 mg/kg 1次,自由饮用0.05 %的DEN水溶液;5-FU组大鼠腹腔注射25 mg/kg 5-FU,每周3 次;IGBR组大鼠灌胃500 mg/kg IGBR每日1次。实验第12、20、28周末分批处死动物,TUNEL法检测肝细胞凋亡,Western blot法检测肝组织中Bax、Bcl-2和丝裂原活化蛋白激酶（MAPK）、磷脂酰肌醇3激酶/蛋白激酶B（PI3K/Akt）通路相关蛋白表达。  结果  与对照组比较,模型组大鼠肝细胞凋亡指数[（12.3 ± 0.4）%]明显升高;与模型组比较,5-FU组与IGBR组大鼠肝细胞凋亡指数[分别为（22.3 ± 0.2） %、（22.2 ± 0.1） %]明显升高（P < 0.05）,5-FU组与IGBR组之间差异无统计学意义（P > 0.05）。与对照组比较,模型组大鼠肝组织中p-ERK、p-Akt表达水平下降、p-JNK、p-p38表达水平升高,ERK、p38、JNK、Akt表达无显明变化;与模型组比较,5-FU组与IGBR组大鼠肝组织中Bcl-2和p-ERK、p-Akt表达水平下降,Bax和p-JNK、p-p38表达水平升高。  结论  IGBR可通过MAPK、PI3K/Akt信号通路,调节Bax和Bcl-2表达,诱发DEN大鼠肝癌细胞凋亡。     

内镜经鼻视神经管减压术治疗无光感外伤性视神经病变的临床效果

目的 探究内镜经鼻视神经管减压术治疗无光感外伤性视神经病变的临床效果.方法 选取揭阳市人民医院2015年1月～2019年10月收治的外伤性视神经病变且视力为无光感的患者61例,依据治疗方案不同分为观察组(32例)和对照组(29例).对照组采用常规性药物治疗,基于对照组观察组采用内镜经鼻视神经管减压术治疗,比较观察两组治...     

综合医院发热门诊标准化工作体系专家共识

综合医院的发热门诊是国家公共卫生体系的重要环节。建立发热门诊的标准化工作体系,无论对于日常工作,还是应对重大呼吸道传染病流行,均有重要的指导意义。为此,山东病理生理学会组织省内外专家,根据有关文献及相关标准,并结合具体临床实践,经充分讨论形成综合医院发热门诊标准化工作体系的共识性文件。该共识提出了综合医院发热门诊的职责、设置,发热患者的就诊流程、诊疗原则以及工作人员的个人防护与职业暴露风险评估等,为发热门诊建设、管理、运行提供了切实可行的系统性指导建议。