三维培养hESCs来源视杯样组织中c-kit和SSEA-4的时空表达特点研究

目的 研究人胚胎干细胞(human embryonic stem cells,hESCs)三维培养后形成的视杯样组织中c-kit和SSEA4表达的时空特性.方法 H1人胚胎干细胞行三维培养和神经诱导分化,在分化7、14、21、30、49、70、90 d固定组织并行免疫荧光鉴定检测c-kit和SSEA-4的表达,同时在相应时间点将分化组织消化成单细胞行流式细胞仪检测验证.结果 三维培养第14天可见Rax+视泡(optic vesicle,OV)样结构,第30天形成具有内层Pax6+、外层Mitf+的双层视杯样(optic cup,OC)结构,第90天可见部分Crx+细胞.c-kit主要表达于hESCs来源OV状及OC状的神经上皮样结构中,SSEA-4早期均匀表达于整个组织,晚期则主要集中于周边部.c-kit+细胞比例呈先升高(P＜0.01)后下降(P＜0.01)趋势,并在分化14 d达40％的峰值.SSEA-4+细胞比例从分化0d至70 d持续下降(P＜0.01),直到90 d一直维持于该低水平.结论 在三维培养hESCs来源OV或OC状组织中,c-kit基因随诱导分化而激活,且主要表达于神经上皮层,呈先增高后下降趋势.SSEA-4早期高表达于整个组织,之后逐渐减少至周边部并维持于低水平状态.     

针灸治疗失眠128例临床观察

自1995年以来,笔者应用针灸治疗失眠128例,经临床观察,效果满意,现报道如下。 1 临床资料 本组128例,男性56例,女性72例;年龄最小16岁,最大68岁;其中25岁以下21例,26～34岁28例,35～46岁42例,47～54岁22例,55岁以上者15例;病程最短1个月,最长15年。 2 治疗方法 治则:镇静安神、养心醒脑。 主穴:内关、百会;配穴随证加减。 针法:患者取卧位,用75%酒精常规消毒,直刺内关穴,进针0.5～0.8寸,行平补平泻法,中等刺激,待医者手下有沉紧涩的感觉,患者穴位有酸麻、胀痛、热或触电样感觉为得气,得气后留针20min,出针时,用消毒干棉球压迫针孔片刻。隔日灸、针1次,7～10次为一疗程,疗程间隔3～5d。 灸法:针刺治疗同时行百会穴雀啄灸10min。施灸时,对准穴位,距2寸左右,以温热感为度,应使穴位皮肤微红。 3 疗效标准 参照《中药新药临床研究指导原则》“中药新药治疗失眠的临床研究指导原则”[1]所定的疗效判定标准。痊愈:睡眠时间恢复正常或夜间睡眠时间达6h以上,睡眠深沉,醒后精神充沛。显效:睡眠明显好转,睡眠时间...     

大鼠癫癎持续状态后前凋亡分子GADD153在海马中的表达

癫癎持续状态(status epilepticus,SE)可造成海马等结构的神经元选择性凋亡[1]。生长停滞、DNA损害可诱导蛋白153(growth arrest and DNAdamage-inducible protein153,GADD153),是介导内质网应激相关性凋亡的重要分子之一[2],它是否参与了SE致细胞凋亡过程,笔者未见相关报道。本研究应用氯化锂-匹罗卡品大鼠SE模型动态观察了海马GADD153mRNA的表达变化。一、材料与方法1·材料:SD大鼠由湘雅医学院动物学部提供。Trizol试剂为美国MBI公司产品,逆转录试剂盒、Taq酶、dNTP为美国Fermentas公司产品,琼脂糖为美国Promega公司产品。…     

针灸治疗失眠128例临床观察

自1995年以来,笔者应用针灸治疗失眠128例,经临床观察,效果满意,现报道如下。 1 临床资料 本组128例,男性56例,女性72例;年龄最小16岁,最大68岁;其中25岁以下21例,26～34岁28例,35～46岁42例,47～54岁22例,55岁以上者15例;病程最短1个月,最长15年。 2 治疗方法 治则:镇静安神、养心醒脑。 主穴:内关、百会;配穴随证加减。 针法:患者取卧位,用75%酒精常规消毒,直刺内关穴,进针0.5～0.8寸,行平补平泻法,中等刺激,待医者手下有沉紧涩的感觉,患者穴位有酸麻、胀痛、热或触电样感觉为得气,得气后留针20min,出针时,用消毒干棉球压迫针孔片刻。隔日灸、针1次,7～10次为一疗程,疗程间隔3～5d。 灸法:针刺治疗同时行百会穴雀啄灸10min。施灸时,对准穴位,距2寸左右,以温热感为度,应使穴位皮肤微红。 3 疗效标准 参照《中药新药临床研究指导原则》“中药新药治疗失眠的临床研究指导原则”[1]所定的疗效判定标准。痊愈:睡眠时间恢复正常或夜间睡眠时间达6h以上,睡眠深沉,醒后精神充沛。显效:睡眠明显好转,睡眠时间...     

火针配合针刺治疗带状疱疹后神经痛疗效观察

目的：寻找提高治疗带状疱疹后神经痛（PHN）临床疗效的方法。方法：将50例带状疱疹后神经痛病人随机分成2组，对照组采用常规针刺方法治疗，治疗组采用火针配合针刺治疗（简称火针组）。结果：火针组临床治愈率为44％．优于针刺组（P〈0．05）。结论：采用火针配合针灸治疗带状疱疹后神经痛可以提高疗效。     

辨证取穴针刺治疗面瘫321例临床观察

目的:辨证取穴针刺治疗面瘫321例的临床疗效评价。方法:根据中医辨证分型(风寒袭络、风热中络、风痰阻络、气虚血瘀)选穴针刺治疗面瘫后进行疗效判定,并各证型之间进行疗效比较。结果:风寒袭络型和风热中络型的表证疗效好,风痰阻络型和气虚血瘀型的里证疗效较差。结论:面瘫的证型直接影响疗效。     

三步推拿正骨手法配合针刺治疗颈椎病42例

颈椎病是因颈椎间盘退行性变、颈椎骨质增生、韧带及关节囊退行性变、肥厚等改变，刺激或压迫颈神经、神经根、脊髓、血管、交感神经和其周围软组织而引起的综合症候群。我们自2001年以来，以三步推拿正骨手法配合针刺治疗颈椎病42例，并与只采用针刺治疗颈椎病的42例患者进行疗效对比，现介绍如下。     

隔药油大面积灸治疗肩周炎疗效观察

肩周炎是针灸科常见疾病之一，其以肩周疼痛及肩关节功能障碍为特征，尤以夜间静止痛及梳头、穿衣、叉腰困难为主症。近５年，我科采用隔活络油大面积灸治疗本病，效果满意，现分析总结如下。１对象与方法１．１对象所观察的６３例患者均为门诊或住院病人，其中男１５例，女４８例，年龄２３～７８岁；病程３d～２年，其中脑卒中偏瘫所致的废用性肩周炎有６例。随机分为治疗组３５例，对照组２８例。１．２方法（１）治疗组：预先准备好３２开大小的粗草纸，折成１６cm×８cm×２cm的纸盒，盒的四角用回形针固定，待治疗时把草纸盒的底部浸…     

金莲花软胶囊治疗急性上呼吸道感染外感风热证的疗效观察

目的探讨金莲花软胶囊治疗急性上呼吸道感染外感风热证的临床疗效。方法选取2015年1月—2015年9月陕西中医药大学第二附属医院等6家医院就诊的急性上呼吸道感染外感风热证患者192例,随机分为对照组(42例)和治疗组(128例)。对照组患者口服穿心莲胶囊,3粒/次,3次/d。同时口服金莲花软胶囊模拟剂,2粒/次,3次/d。治疗组患者口服金莲花软胶囊,2粒/次,3次/d。同时口服穿心莲胶囊模拟剂,3粒/次,3次/d。两组患者连续服用3 d。观察两组的临床疗效,比较两组单项症状恶风发热、流浊涕、咳嗽的疗效。结果治疗后,对照组和治疗组综合疗效的愈显率、总有效率分别为51.11%、72.06%,91.11%、99.26%,两组愈显率、总有效率比较差异有统计学意义(P0.05)。治疗后,对照组和治疗组恶风发热、流浊涕、咳嗽单项症状的总有效率分别为82.22%、91.91%,68.18%、87.60%,68.18%、82.95%,两组比较差异均有统计学意义(P0.05)。结论金莲花软胶囊治疗急性上呼吸道感染外感风热证具有良好的临床疗效,尤其是在改善恶风发热、流浊涕、咳嗽等症状方面效果明显,具有一定的推广应用价值。