TREATMENT OF HYALINEMEMBRANE DISEASE BYHUMAN AMNIOTIC FLUIDSURFACTANT

A case of hyaline membrane disease was treated successfully with pulmonary surfactant (PS) isolated from human amniotic fluid. Dosage was 150 mg phospholipid/kg. The exogenous surfactant was instilled into the airway via a tracheal cannula. Clinical symptoms, PO2 and FiO2 improved evidently 24 hours after administration. L/S ratio and phosphatidylglycerol recovered gradually in aspirates. Lung X-ray film manifested "white lung" before instillation of surfactant and showed a striking improvement 3 days after treatment. The duration of mechanical ventilation was 6 days. During the period of recovery complications of patent ductus arteriosus and bacterial pneumonia developed. However, the patient recovered completely and was discharged 32 days after admission.     

小鼠FoxP3基因腺相关病毒的制备与鉴定

目的:构建携带小鼠FoxP3基因的重组腺相关病毒,并检测其在NIH3T3细胞的表达情况。方法:将FoxP3通过内部核糖体进入位点(IRES)与报告基因增强型绿色荧光蛋白连接,构建同时含有目的基因和报告基因的重组腺相关病毒(rAAV)表达质粒,通过磷酸钙沉淀法共转染HEK293细胞,收获并通过肝素亲和层析法纯化病毒,并对病毒纯度和滴度进行鉴定。利用携带FoxP3基因的重组病毒体外感染小鼠NIH3T3细胞,体外观察感染效率和目的基因转录情况。结果:包装成功的rAAV/FoxP3经纯化后获得了高纯度的rAAV/FoxP3,实时定量PCR检测rAAV/FoxP3的病毒滴度达到5.0×1012vg/mL,体外感染NIH3T3细胞,流式细胞术测定感染效率可达92.88%,实时PCR测定细胞内存在高水平FoxP3mRNA。结论:获得携带FoxP3-IRES-EGFP的rAAV,并可有效感染NIH3T3细胞,为进一步研究FoxP3的生物学功能提供了有效工具。     

山莨菪碱对中性粒细胞糖皮质激素受体的影响

以~3H地塞米松(Dex)为特异性配基,以一点分析法测得大白鼠腹腔中性粒细胞(PMNs)的糖皮质激素受体(GCR)位点数为5270±216/个PMN(n=18,X±SE下同);体外实验,PMNs直接与山莨菪碱(654-23×10~(-5)M)温育,对GCR无明显影响,测得位点数为4896±360/个PMNs(n=20,P>0.4);体内实验表明,给大鼠肌肉注射654-2(10mg/kg)每日两次共二天,则GCR位点数降至2740±101/个PMNs(n=18,P<0.001)。此时还测得血浆皮质酮含量明显增高(P<0.01)。提示654-2对GCR的影响可能与增加皮质激素所致的“降调节”有关。     

小儿肝的年龄解剖学研究

分六个年龄组观察了180个(男98,女82)小儿肝的形态、度量、位置及体表投影.小儿肝相对较大,右叶大于左叶,下界位置较低并逐渐上移.在右锁骨中线的肋弓下一般均可触到.小儿肝重随其年龄(身高)的增长而增长,其增长速度相对较慢,尤以Ⅶ组小儿更明显.     

生物素─链霉亲和素系统在检测巨细胞病毒抗体中的应用

本文用自制ＣＭＶ抗原和生物素－链霉亲和素系统试剂，通过最适条件的对比，建立了检测人血清中抗巨细胞病毒ＩｇＭ、ＩｇＡ类抗体的ＢＳＡ－ＥＬＩＳＡ，并与普通ＥＬＩＳＡ作比较，结果表明，ＢＳＡ－ＥＬＩＳＡ的非特异性吸附明显低于普通ＥＬＩＳＡ，与普通ＥＬＩＳＡ相比，抗体效价分别提高５和７倍，阳性率分别提高６８％和１５３．５％。在实际工作中曾用ＢＳＡ－ＥＬＩＳＡ检测临床样品１６５份，就所得结果进行分析。表明ＢＳＡ－ＥＬＩＳＡ检测ＣＭＶＩｇＭ和ＩｇＡ可提高特异性和灵敏度，值得推广应用。     

慢性肾功能不全患者外周血调节性T细胞的表达

目的：探讨慢性肾功能不全患者外周血调节性T细胞表达水平及意义。方法：采用流式细胞术测定40例慢性肾功能不全患者外周血CD4’T细胞占淋巴细胞（CD45^＋细胞）的比例及CD4^＋CD127^-Treg、CD4^＋CD25^＋CD127^-Treg占CD4^＋T细胞的比例。结果：慢性肾功能不全各组患者外周血CD4^＋CD127^-Treg占CD4^＋T细胞的比例显著低于健康对照组，而CD4^＋CD25^＋CD127^-Treg占CD4^＋T细胞的比例较健康对照组无显著性差异，代偿期患者CD4^＋T占淋巴细胞的比例跟健康对照组相比，没有统计学差异，其余各期均显著高于健康对照组。患者CD4^＋T细胞占淋巴细胞的比例，CD4^＋CD127^-Treg、CD4＋CD25^＋CD127^-Treg占CD4^＋T细胞的比例与血清BUN和Cr值之间没有相关性。结论：慢性肾功能不全患者外周血CD4^＋T细胞数量增高，CD4^＋CD127^＋Treg数量降低，免疫功能异常。     

细胞自噬调控颅内动脉瘤血管平滑肌细胞表型转化的体外研究

目的:探讨流体切应力(SS)对体外大鼠脑血管平滑肌细胞(VSMCs)表型转化的影响及相关自噬调控机制。方法:运用倒置相差显微镜和免疫细胞化学方法对大鼠VSMCs进行鉴定后,并给予15. 28 dyne/cm2流体切应力冲击VSMCs6、12、24 h。为探讨自噬在VSMCs表型转化中作用,于冲击前6 h给予自噬激动剂(Rapa)和抑制剂(3-MA)干预。实验分为control组、SS组、SS+3-MA组和SS+Rapa组。于冲击后6、12、24 h采用Real-time PCR法检测VSMCs收缩表型及合成表型的标志基因的表达水平;免疫细胞化学和免疫印迹法检测自噬标志蛋白LC-3和Beclin-1的定性定量表达。结果:与control组相比,SS组中VSMCs收缩表型标志基因α-SMA及SM-22a的表达显著下调(P0. 05);合成表型标志基因MMP-2和TNF-α的水平显著上调(P0. 05);自噬蛋白LC-3和Beclin-1的表达显著增强(P0. 05);与SS组相比,自噬抑制剂3-MA可显著逆转流体切应力诱导的VSMCs表型转化(P0. 05),与之相反,自噬激动剂Rapa可促进VSMCs的表型转化(P0. 05)。结论:流体切应力可能通过激活细胞自噬诱导体外VSMCs的表型转化,进而参与颅内动脉瘤的发生发展。     

诱变剂敏感性和肿瘤

肿瘤的发生与染色体不稳定性之间的关系是当今肿瘤基础研究的重要课题之一，众多研究显示：两之间存在着密切的关系。ＤＮＡ损伤和／或误配修复能力的缺陷引起基因组的不稳定性，而基因组不稳定性可诱发靶组织染以体上的突为事件。诱变剂敏感性间接反映ＤＮＡ损伤的修复能力，作为肿瘤易感性的独立的生物学指标，近年来已日益受研究工作的重视。本综述诱变剂敏感性与的关系。     

Rp-cAMP与缺氧神经元Bcl-2表达和细胞凋亡关系的研究

目的探讨培养神经元缺氧后蛋白激酶A(PKA)活性变化及其与神经元缺氧凋亡的关系。方法建立体外培养W istar大鼠胎鼠皮层神经元模型及培养神经元缺氧模型,用不同浓度的PKA抑制剂(Rp-cAMP),在不同的缺氧时相点观察神经元细胞膜和细胞质中PKA的活性、Bc l-2和TUNEL表达的规律。结果随着缺氧时间的延长,培养神经元细胞膜PKA的活性显著增加,Bc l-2表达降低,TUNEL荧光染色阳性率及平均荧光强度显著升高。而应用Rp-cAMP后细胞凋亡情况显著减轻。结论PKA和Bc l-2均参与了缺氧神经元凋亡;PKA抑制剂Rp-cAMP可减轻缺氧神经元凋亡,且该作用与Bc l-2表达降低有关;PKA的激活在缺氧神经元凋亡中起促发作用。     

大鼠DCs单抗和雷公藤多甙对大鼠同种异体心肺联合移植排斥反应的影响

采用改良的大鼠同种异体心肺联合移植手术，研究了大鼠树突状细胞（ＤＣｓ）单克隆抗体单独和联合雷公藤多甙片对移植排斥反应的影响，并与生理盐水对照组、雷公藤多甙片（ＴⅡ）组进行比较。结果表明：大鼠ＤＣｓ单抗单独和联合ＴⅡ两治疗组间无明显区别，但两组大鼠移植心脏存活时间明显长于生理盐水组和ＴⅡ组（Ｐ＜００１）；而且病理切片显示以慢性排斥反应改变为主。而生理盐水对照组和ＴⅡ组皆表现为急性排斥反应。提示ＤＣ单抗在治疗移植排斥反应中有实用价值。