选择素在脾切除治疗特发性血小板减少性紫癜中的意义

目的 研究特发性血小板减少性紫癜（ITP）时脾脏血管内皮细胞的活化程度,了解脾切除后选择素（selectin）水平的变化,探讨脾切除治疗的ITP的指征。方法 A组为12例激素疗效不佳,术前sE-selectin、sP-selectin/Plt水平明显高于正常的ITP病例;B组为8例肝炎后性肝硬化继发脾机能亢进病人。二组病人均行脾切除,术前、术后检测血小板（Plt）、选择素（P-selectin、L－selectin)、可溶性选择素（sE-selectin、sL-selectin、sP-selectin)。结果 A组术后获随访11例,10例反应极好,1例反应良好。术前sE-selectin水平A、B两组均高于正常,术后快速下降;A组术前sP-selectin/Plt远高于B组（7．55vs2.03fg/plt,P＝0．02）,术后1个月两组均下降至正常水平;A组sE-selectin、P-selectin、sP-selectin/Plt在术后6个月仍维持低水平。A、B两组术前和术后L-selectin、sL-selectin水平无明显差异。结论 E－selectin、P-selectin参与ITP血小板破坏的病理过程。sE-selectin、sP-selectin-Plt水平可作为术前预测ITP脾切除疗效的参考指标,高者可能手术效果较好。     

红细胞生成素受体在白血病细胞上的表达及意义

目的:探讨红细胞生成素受体(EPO-R)在白血病细胞上的表达及其意义,以及重组人EPO(rhEPO)对急性白血病细胞增殖的影响. 方法:应用独特型EPO-R单克隆抗体,通过流式细胞仪技术检测30例急性白血病(AL)患者的白血病细胞EPO-R的表达,用细胞周期DNA分析法研究rhEPO单独对AL细胞增殖的影响.结果:30例AL患者白血病细胞均有EPO-R表达,EPO-R表达率(4.6±4.2)%明显低于作为对照组,P＜0.05.18例AL患者的白血病细胞体外经rhEPO作用后未出现明显的增殖,与对照组比较,无显著性差异(P＞0.05).结论:EPO-R在AL细胞中均有表达,但表达水平较低.rhEPO体外不刺激AL细胞的增殖.EP0-R在AL中的作用、生物学特性及与预后的关系还有待于深入研究.     

清髓性和非清髓性预处理对aGVHD中Th1/Th2细胞因子的影响

目的 探讨清髓性和非清髓性预处理对血清辅助性T细胞Ⅰ／Ⅱ类（Th1／Th2）细胞因子水平的影响及其与急性移植物抗宿主病（aGVHD）严重程度的关系。方法 同种异基因骨髓移植模型SD大鼠随机分为A、B、C、D4组,A、B组大鼠接受全身照射（TBI）2．0Gy作为非清髓组,C、D组接受TBI 6．0Gy作为清髓组。TBI4h后,B、D组输注Wistar大鼠骨髓细胞作为实验组,A、C组输注生理盐水作为对照组。移植后用双抗体夹心ELISA法检测4组不同时相血清IFN-7、IL-2、IL-4、IL-10的水平。结果移植后各组大鼠血清中IFN-7、IL-2、IL-4、IL-10有不同程度的升高。D组各细胞因子高峰水平最高,其后依次为B、C、A组。各组间比较差异有显著性（P〈0．05）。临床aGVHD评分,B、D组比较差异有显著性（P〈0．05）。肝脏病理分级和结肠病理分级比较,B、D组差异均有显著性（P〈0．05）。结论 骨髓移植时采用非清髓性的预处理方案,对Th1／Th2细胞因子水平的影响较小,aGVHD的发生程度较轻。     

带状疱疹患者外周血T细胞亚群分析

用流式细胞仪检测４３例带状疱疹患者外周血Ｔ淋巴细胞亚群，与２０例正常人对照，结果，带状疱疹组ＣＤ３下降，ＣＤ４下降，ＣＤ８有升高趋势ＣＤ４／ＣＤ８有下降趋势。推测ＣＤ４降低与带状疱疹发病有直接关系。     

人脐血细胞体外扩增的实验研究和意义

目的：了解脐血造血干细胞在体外扩增培养过程中的生长分化特点,探讨脐血干细胞与体外扩增后的祖细胞混合移植的可行性以及合适的移植时机。方法：按种脐血单个核细胞（MNC）于含体积浓度为20％胎牛血清（FCS）的IMDM悬浮培养体系中,加入干细胞因子（SCF）、Flt-3配基（FL）、粒－单细胞集落刺激因子（GM－CSF）、白细胞介素－3（IL－3）、白细胞介素－6（IL－6） ,培养21d,每周半量换液,同时进行细胞计数,涂片形态学观察,粒－单系祖细胞（CFU－GM）、红细祖细胞（BFU－E）集落培养,细胞表面CD34^ 、CD33^ 、CD3^＋、CD19^＋标记和细胞增周期的动态观察。结果 培养7d时的脐血细胞,CFU－GM、BFU－E集落形成最多,之后逐渐减少,21d时已低于培养前水平。CD34^ 细胞比例在培养后7d达高峰,14d开始下降;CD33^＋细胞比例在培养后7－14d达高峰,21d时开始下降;CD3^ 、C CD19^ 细胞比例均在培养第7d时显著下降,并持续低水平至21d。培养7d后G0期细胞比例明显减少,S期细胞快速增高,至21d时仍有较高比例。培养第21d的细胞涂片见少量中、晚幼粒细胞。结论：理论上脐血干细胞与扩增后的祖细胞混合移植用于成人具有可行性,体外扩增培养7d左右是混合移植的最佳时机。     

多发性骨髓瘤患者外周血CD4~+CD25~+和CD8~+CD28~-调节性T细胞研究

目的:探讨CD4~+CD25~+和CD8~+CD28~-调节性T细胞(Tregs)在多发性骨髓瘤(MM)患者外周血中的变化及意义.方法:采用流式细胞术检测38例MM患者及20例健康对照外周血CD4~+CD25~+和CD8~+CD28~-Tregs水平.分别采用溴甲酚绿法、透射免疫比浊法测定患者血清白蛋白(Alb)、β2-微球蛋白(β2-MG).结果:初诊MM患者外周血CD4~+CD25~(+/high)、CD4~+CD25~(high)CD127~(low)及CD8~+CD28~-Tregs比率均明显升高;CD4~+CD25~(+/high)和CD4~+CD25~)(high)CD127~(low)Tregs比率在各临床分期均较对照组升高,随分期增高呈现增加趋势,且CD4~+CD25~(high)和CD4~+CD25~(high)CD127~(low)Tregs在Ⅲ期患者显著高于Ⅰ期患者;CD8~+CD28~(-Tregs)在Ⅱ、Ⅲ期显著高于正常对照,且Ⅱ期高于Ⅰ期,Ⅲ期高于Ⅱ期,逐期递增,而在Ⅰ期与对照组比较无显著差异;CD4~+CD25~(+/high)和CD4~+CD25~(high)CD127~(low)Tregs比率在进展期和稳定期均较对照组升高,但两期之间比较无明显差异,而CD8~+CD28~-Tregs在进展期高于稳定期及对照组,稳定期和对照组间比较无明显差异;CD4~+CD25~(high)Tregs和CD4~+CD25~(high)CD127~(low)Tregs比率与Alb水平均呈负相关.结论:MM患者体内存在CD4~+CD25~+Tregs和CD8~+ CD28~-Tregs异常增加,可能是MM免疫逃逸的一个重要机制,这些变化同临床分期、病情进展及预后存在一定程度相关性.     

多参数分析多发性骨髓瘤患者外周血中CD4~+CD25~+调节性T细胞的表达

目的 通过分析CD4+ CD25+ 调节性T细胞(CD4+ CD25+ regulatory T cells,CD4+ CD25+ Tress)在不同病程阶段多发性骨髓瘤(multiple myeloma,MM)患者外周血中的变化和临床意义,初步探讨MM患者的免疫抑制机制.方法 流式细胞术检测56例MM患者及30例健康志愿者外周血CD4+ CD25+、CD4+ CD25high、CD4+ CD25+ CD127low、CD4+ CD25high CD127low T细胞的比例并分析比较.结果 1)56例MM患者:化疗后组CD4+ CD25+、CD4+ CD25high、CD4+ CD25+ CD127low、CD4+ CD25high CD127low T 细胞的比例均高于正常组,差异具有显著性;初诊组的CD4+ CD25+ CD127low T细胞与正常对照组比较没有差异,但CD4+CD25+、CD4+ CD25high、CD4+ CD25high CD127lwo T细胞与正常对照组比较差异具有显著性;初诊组CD4+ CD25+T细胞的比例与化疗后组相比没有差异,但其CD4+ CD25high 、CD4+ CD25+ CD127low、CD4+ CD25high CD127low T细胞的比例均低于化疗后组,差异具有统计学意义.2)37例化疗后MM患者:稳定期与活动期的CD4+ CD25+、CD4+CD25+CD127low T细胞相比没有差异,但稳定期的CD4+ CD25high、CD4+ CD25high CD127low T细胞明显低于活动期.结论 CD4+ CD25+ Tregs在MM患者外周血中比例明显升高,且化疗可能影响其在外周血的比例;活动期MM患者CD4+ CD25+ Tregs的比例明显高于稳定期.这些提示CD4+ CD25+ Tregs可能是MM免疫抑制的一个重要原因.     

两种白血病细胞抗原负载DC的体外诱导特异性CTL应答的比较

目的: 比较树突状细胞 (DC)与白血病细胞融合及白血病细胞冻融抗原负载DC两种白血病DC疫苗诱导抗原特异性CTL应答的能力。方法: 采用羟乙基淀粉 Ficoll两步法分离外周血单个核细胞(PBMC), 通过贴壁 2h获得黏附的单核细胞, 用GM- CSF加IL- 4诱导培养 5d收获细胞。将细胞分为 4组: A组将K562细胞或原代慢性粒细胞白血病(CML)细胞在 500g/LPEG 100mL/LDMSO诱导下与DC融合; B组加入相应细胞数量的白血病细胞冻融抗原; C组将K562细胞或CML细胞与DC共培养; D组: 单独DC培养组。融合前以红色荧光染料PKH26标记K562细胞, 采用流式细胞仪(FCM)检测PKH26 /FITC 抗HLA ABC抗体双标细胞并评估融合率。培养的第 6天, 加入TNF -α诱导DC成熟, 然后分别与自体T细胞共培养, 用MTT比色法检测各组CTL对靶细胞的杀伤活性。结果: GM- CSF加IL -4和TNF- α依次诱导成熟的DC具有经典的DC的形态和表型特征, 在PEG -DMSO的介导下, DC与白血病细胞的融合率为 ( 17. 33 ~29. 94 )%。两种抗原负载方案激活的CTL均对表达K562抗原的细胞具有特异性的细胞毒作用。在效靶比相同时, 融合组诱导CTL的杀伤活性强于冻融抗原致敏DC组。结论: 与冻融抗原致敏的DC相比, DC与白血病细胞融合细胞递呈抗原的效率更高, 体外诱导的CTL特异性杀伤靶     

B细胞活化因子在部分肾移植受者外周血淋巴细胞异常高表达及可能的生物学意义

背景：B细胞活化因子(B cell activating factor belonging to TNF family, BAFF),经与其受体结合,对B细胞分化、成熟、生存和抗体分泌发挥重要作用,在T细胞应答过程中亦可能起着重要作用。BAFF信号是否在同种肾移植排斥反应过程中起作用值得探讨。 目的：分析肾移植受者外周血淋巴细胞上BAFF的表达情况及其可能的生物学作用。 设计、时间及地点：病例观察,于2006-06/2007-03在苏州大学附属第三医院泌尿外科进行。 对象：86例肾移植随访患者,男60例,女26例,年龄12~62岁。患者均为首次肾移植,血肌酐值在65~267 μmol/L。 方法：取患者外周血,以EDTA-Na2抗凝。收集部分患者的移植肾活检标本。 主要观察指标：分析外周血单个核细胞上BAFF+、BAFF-R+、CD4+、CD8+、CD4+ CD25+ CD127-/low、CD134+、CD4+ CD134+ 和CD19+ BAFF-R+的表达率,计算CD4/CD8比值;对活检组织进行病理分析和免疫组织化学分析。 结果：肾移植受者外周血单个核细胞上BAFF的表达率在0.18%~76.97%之间。将15%设为临界值,所有数据分成≥15%组和<15%组进行统计分析。在≥15%组,BAFF表达率为36.91%,与CD4/CD8比值、CD4+ CD25+ CD127-/low T细胞之间不相关。然而,BAFF+细胞数与CD134+细胞和CD4+ CD134+细胞存在显著相关性(分别为P < 0.01和 P < 0.05)。而在<15%组,各指标之间没有显著相关性。病理诊断证实慢性排斥的移植肾组织,BAFF表达于肾小管上皮细胞胞浆/胞膜。 结论：BAFF在肾移植受者外周血单个核细胞的异常高表达可能与同种肾移植排斥反应相关。     

复方新诺明的不良反应

复方新诺明由于加入抗菌增效剂,抗菌谱比新诺明广,且抗菌力增强,近年来常与抗生素联用,又因它的价格便宜,故临床应用仍较普遍,但其不良反应的报道逐渐增多,现总结如下:1 双眼后葡萄膜炎李某[1]报道一例22岁男性患者,因上呼吸道感染,口服复方新诺明,12h后出现眼前黑影游动及视力下降等症状,继续口服复方新诺明,2片/次,bid,4天后,眼部症状加重,检查视力明显下降,玻璃体混浊,诊断为双眼后葡萄膜炎,给于青霉素.地塞米松静滴,并局部使用阿托品及地塞米松眼药水等,症状缓解.当再用该药时.上述症状复现而停药.