兔骨髓基质干细胞成骨诱导及增强型绿色荧光蛋白基因腺相关病毒体外转染的研究

目的探讨重组增强型绿色荧光蛋白基因腺相关病毒(AAV-EGFP)对细胞生物学行为的影响,为组织工程寻找一种理想的病毒载体及细胞示踪标记方法。方法采用全骨髓法分离培养BMSCs,诱导培养液诱导细胞成骨转化,行细胞形态学检查、细胞表面抗原鉴定、碱性磷酸酶(ALP)染色及Von Kossa染色,评价细胞成骨情况。在此基础上转染AAV-EGFP,观察细胞形态学改变及荧光表达的时间与强度,计算转染效率,确定转染的较佳感染复数(MOI)值,MTT法描记细胞生长曲线,观察AAV载体对细胞活性的影响。结果细胞扩增迅速、形态良好、纯度较高,经诱导后呈现明显的成骨改变。实验确定AAV转染细胞的较佳MOI值为1×10~5,以此值转染AAV-EGFP后细胞荧光持续高效稳定表达(＞8周),并可随细胞有丝分裂传至子代,可以满足示踪标记的需要,AAV转染效率高,对细胞活性影响小。结论AAV长期稳定表达目的基因,是一种理想的组织工程病毒载体；基于基因转染方法高效稳定表达EGFP,可作为种子细胞良好的示踪标记方法。     

两种填充物在经皮椎体成形术中应用的临床比较

目的比较聚甲基丙烯酸酯(polymethylmethacrylate,PMMA)和锶羟磷灰石(strontium-containedhydroxyapatitece-ment,SrHAC)行经皮椎体成形术(percutaneousvertebroplasty,PVP)的临床应用。方法单椎体骨折29例,其中PMMA组16例,SrHAC组13例,对填充物注入量、术中患者血压、心率、血氧饱和度及术后疼痛、临床效果等指标进行对比。结果PMMA组平均注入量为(2.82±0.39)ml,SrHAC组为(3.75±0.52)ml,两组比较差异有显著性意义(P<0.01)。SrHAC组注入填充物时血压、心率、血氧饱和度稳定。两组VAS评分术后均较术前明显下降,差异有显著性意义(P<0.01);术后临床效果SC评价,优良率无显著性差异(P>0.05)。结论SrHAC是除PMMA外另一种可供选择的PVP填充材料。     

人骨形成蛋白4基因腺相关病毒及绿色荧光蛋白基因腺相关病毒体外诱导成骨的比较

背景:由于骨形成蛋白的释放速度与新骨生长速度不匹配,单纯应用骨形成蛋白的效果尚不理想,因此,应有合适的载体来调节骨形成蛋白的释放速度.目的:观察重组人骨形成蛋白4基因腺相关病毒及绿色荧光蛋白基因腺相关病毒诱导兔骨髓间充质干细胞向成骨方向分化的作用.方法:全骨髓法培养兔骨髓间充质干细胞,分别应用人骨形态形成蛋白4基因腺相关病毒载体及绿色荧光蛋白基因腺相关病毒转染兔骨髓间充质干细胞,设定感染复数值为5×104,观察两组细胞形态改变,分别行碱性磷酸酶染色、Von Kossa染色、茜素红染色及碱性磷酸酶含量测定,比较两组成骨活性差异.结果与结论:人骨形态形成蛋白4基因腺相关病毒组转染骨髓间充质干细胞后,细胞形态呈现典型的成骨改变,碱性磷酸酶染色及Von Kossa染色、茜素红染色均出现成骨的特征性改变.绿色荧光蛋白基因腺相关病毒组未观察到上述改变.人骨形态形成蛋白4基因腺相关病毒组碱性磷酸酶含量高于绿色荧光蛋白基因腺相关病毒组(P<0.01).提示人骨形态形成蛋白4基因腺相关病毒转染骨髓间充质干细胞后,骨髓间充质干细胞表现出更加明显的成骨活性改变.     

巧用“青蛙效应”教女

在19世纪末期,美国康奈尔大学的一位教授做了个有趣的试验：将一只青蛙丢进一口装满了沸水的大铁锅里,这对青蛙来说无异于灭顶之灾。然而,让人意想不到的是,在生死存亡之际,这只青蛙进发出无穷的力量,忍受着剧烈的疼痛,双腿一蹬,竟从开水锅里窜了出来。虽然表皮受了一点烫伤,但它幸运地活了下来。     

应用sky膨胀式椎体成形器行经皮后凸成形术--介绍一种微创脊柱外科新技术

近年来,应用球囊扩张的经皮后凸成形术已取得良好的疗效.最近,以色列Disc-O-Tech公司发明的一种新型后凸成形系统-sky膨胀式椎体成形系统(sky bone expender system)已开始应用于临床,现将这一新技术介绍如下.     

脊柱融合的进展及相关问题的探讨

自从Hibbs和Atbee于1911年首次提出脊柱融合(spinal fusion)的概念以来,脊柱融合逐渐成为脊柱外科领域的一种常规治疗手段,广泛应用于许多脊柱疾病的治疗.     

国产球囊经皮椎体成形术治疗椎体压缩骨折

目的 探讨国产球囊经皮椎体后凸成形术治疗疼痛性椎体压缩骨折的安全性及有效性：方法 2005年10月至2006年10月间应用国产球囊椎体后凸成形术治疗椎体压缩骨折26例44椎，术后观察症状改善、骨折复位及并发症情况。结果 全部病例顺利完成手术，无并发症发生。23例术后随访1～12个月，平均4．6个月。术后疼痛症状明显减轻，术后1d及1个月的VAS评分较术前差异均有统计学意义（P〈0．05）；椎体高度恢复明显，Cobb角平均矫正10．11°。结论 国产球囊经皮椎体后凸成形手术治疗疼痛性椎体压缩骨折安全、有效、经济，临床应用前景良好。     

脊柱融合动物模型的研究进展

随着对脊柱融合机理及其并发症的进一步认识以及研究逐渐深入。动物模型在脊柱外科领域的应用越来越广泛。尤其是近年，骨组织工程和基因治疗受到了极大的关注。脊柱融合实验动物模型在评价这些新兴技术方面的作用日益显著，为相关的基础与临床前期研究做出了巨大贡献。现就有关内容做一综述。     

醉酒后，胳膊受伤了

凌晨6点不到，急诊科打来电话说，有个病人酒后睡了一觉，醒来时右侧整个胳膊突然动不了了，照X光片没发现有关节脱臼或骨折，要求骨科会诊。     

Sky骨扩张器在经皮椎体后凸成形术中的临床应用

目的:探讨应用Sky骨扩张器行经皮椎体后凸成形术治疗椎体压缩性骨折的临床疗效。方法:应用Sky骨扩张器行经皮椎体后凸成形术治疗8例共9个椎体的压缩性骨折,其中骨质疏松性椎体压缩性骨折6例7个椎体,脊柱转移瘤1例(T7),椎体血管瘤1例(L1)。术前术后行VAS评分,测量手术前后各病椎椎体前缘、中线、后缘高度并进行比较和统计学分析。结果:全组均安全完成手术,平均每个椎体手术时间为42min;失血量平均每例约为20ml;平均每个椎体注入PMMA3.2ml,术前的VAS评分平均为7.8分,术后第1天平均为3.1分,术后1周为2.6分,术后1个月平均2.5分,手术前后差异有显著性(P<0.05)。术前骨折椎体前缘的平均高度为18.21mm,术后为20.52mm(P<0.01);术前骨折椎体中线的平均高度为14.23mm,术后为19.43mm(P<0.01);术前骨折椎体后缘的平均高度为23.98mm,术后为24.59mm(P>0.05)。术后CT检查发现椎体后缘少量渗漏和椎间隙骨水泥渗漏各1例,均无临床症状;1例患者出现椎体后缘渗漏,术后出现大小便功能障碍,经保守治疗后于术后5d大便功能恢复,术后1周小便功能改善。结论:应用Sky骨扩张器行经皮椎体后凸成形术治疗椎体压缩性骨折创伤小、较安全,近期疗效较好,但仍有一定的并发症发生。