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背景:以往对干细胞的研究主要集中在基因方面,但目前越来越多的证据表明,miRNA在干细胞的自我更新和分化过程中发挥着重要的调控作用。
目的:介绍miRNA的形成及其对干细胞自我更新和多向分化的影响。
方法:以“microRNA,stem cell”为检索词,应用计算机检索Elsevier数据库2000-01/2010-05文章;以“miRNA,干细胞”为检索词检索中国期刊全文数据库2000-01/2010-05文章。
结果与结论:不同组织不同细胞存在自身特异的miRNA表达谱及序列特征,这可以作为某些组织或细胞的特异性分子标志。在细胞的不同发育阶段,miRNA组成不同,决定细胞的分化方向以及分化时相,是细胞“定时”、“定向”分化的“开关”。在各种干细胞中均存在特异性的miRNA,并且在干细胞的不同分化阶段亦有特异性miRNA表达,它们是保持干细胞自我更新和多向分化特性的关键分子之一。miRNA作为一种新的调控基因表达的小分子RNA,为干细胞的研究提供了一种新的途径。 相似文献
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目的研究BMSCs成骨分化过程中环指蛋白11(ring finger protein 11,RNF11)对Akt信号通路的调节作用,为进一步阐明BMSCs成骨分化机制和用于临床治疗提供思路。方法从健康人体新鲜骨髓中分离培养BMSCs并传代,取第4代细胞经流式细胞术,成骨、成软骨和成脂诱导培养鉴定后用于实验。BMSCs成骨诱导分化培养0~14 d,通过茜素红染色和ALP染色检测其成骨分化程度,并用Western blot法检测RNF11蛋白表达。取第4代BMSCs,分为空白对照组(A组)、空载慢病毒(Lv-NC)组(B组)和敲低RNF11(Lv-ShRNF11)组(C组),成骨诱导分化培养0~14 d,采用Western blot检测RNF11蛋白表达,茜素红染色和ALP染色检测其成骨分化程度,14 d实时荧光定量PCR(real-time fluorescence quantitative PCR,qRT-PCR)检测BMSCs成骨标志物Runx2、骨钙素(osteocalcin,OCN)及骨桥蛋白(osteopontin,OPN)的mRNA相对表达量;采用Western blot检测Akt、Smad1/5/8及β-catenin信号通路蛋白相对表达量,以磷酸化前后比值表示。为研究RNF11对Akt信号通路的影响机制,取第4代BMSCs分为Lv-NC转染组(A1组)、Lv-ShRNF11转染组(B1组)和添加Akt信号通路激活剂SC79的Lv-ShRNF11转染组(C1组),14 d时采用Western blot检测RNF11和Akt信号通路蛋白相对表达量,茜素红染色、ALP染色及qRT-PCR检测成骨相关指标。结果流式细胞术及成骨、成软骨和成脂诱导培养鉴定显示分离培养细胞为BMSCs。RNF11蛋白相对表达量随成骨分化时间延长而逐渐增加(P<0.05);下调RNF11后,茜素红和ALP染色示C组相较于A、B组BMSCs成骨分化程度降低,qRT-PCR检测示Runx2、OCN、OPN mRNA相对表达量减少(P<0.05)。随成骨分化时间延长,RNF11与Akt信号通路蛋白相对表达量均上升(P<0.05)。下调RNF11后,C组相较于A、B组,其Akt信号通路蛋白相对表达量显著降低(P<0.05),而对Smad1/5/8以及β-catenin信号通路蛋白相对表达量无明显影响(P>0.05)。B1、C1组相较于A1组,其RNF11蛋白相对表达量减少(P<0.05),B1组相较于A1、C1组,其Akt信号通路蛋白相对表达量降低(P<0.05);茜素红与ALP染色示C1组BMSCs成骨分化程度稍低于A1组(P>0.05),而明显高于B1组(P<0.05);qRT-PCR检测示C1组Runx2、OCN、OPN mRNA相对表达量稍低于A1组(P>0.05),而明显高于B1组(P<0.05)。结论RNF11通过正向调控Akt信号通路激活水平促进BMSCs向成骨细胞分化。RNF11可作为提高BMSCs修复骨缺损疗效以及治疗骨代谢病的潜在靶点。 相似文献
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[目的]总结小儿葡萄球菌性烫伤样皮肤综合征的临床护理经验。[方法]选取小儿葡萄球菌性烫伤样皮肤综合征患儿37例作为研究对象,在患儿护理期间密切观察患儿症状与体征的改善情况,并适当对护理措施做出调整,观察最终护理效果及护理满意度。[结果]经护理干预,37例患儿体温恢复正常,同时皮肤糜烂位置结痂后自然脱落,患部预后无色素沉着,也无瘢痕形成,均在15.2d±3.1d出院,调查发现,患儿家属护理满意度为,较为理想。[结论]小儿葡萄球菌性烫伤样皮肤综合征患儿需要细心、全面的护理干预,通过护理过程总结经验及调整,可实现较为理想的护理效果。 相似文献
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目的 建立当归破壁饮片沸腾干燥动力学模型,测定其干燥动力学参数,比较不同温度沸腾干燥产品质量,为优化干燥工艺参数提供参考。方法 采用沸腾干燥对当归破壁饮片软材进行干燥,研究其在60、75、90 ℃条件下的干燥特性;应用Weibull函数对其干燥曲线进行拟合;根据Fick扩散定律和Arrhenius方程求算干燥过程水分有效扩散系数和活化能;运用HPLC测定不同干燥温度当归破壁饮片挥发成分含量,测定指纹图谱并计算相似度;测定物理属性指标,建立以15个物理指标(D90、粒度分布范围、粒度分布宽度、相对均齐度Iθ、松密度、振实密度、颗粒间孔隙率、压缩度、比表面积、孔体积、休止角、平板角、色度L*、a*、b*)来表征当归破壁饮片的物理质量属性和构建物理指纹图;从物理和化学属性多角度综合评价不同干燥温度对其质量的影响。结果 当归破壁饮片沸腾干燥属于降速干燥过程,温度越高,达到目标水分控制点的时间越短;沸腾干燥过程中水分比随时间变化服从Weibull函数分布(R2为0.991 1~0.999 0,χ2为9.380 5×10−5~6.030 0×10−4,RMSE为0.007 7~0.021 3);当归破壁饮片沸腾干燥的水分有效扩散系数(moisture effective diffusion coefficients,Deff)值(1.84×10−3~6.90×10−3 m2/s)和活化能(activation energy,Ea)值为39.70 kJ/mol。不同温度沸腾干燥的当归破壁饮片挥发性成分含量有一定差异,随温度升高,挥发性成分含量略有降低;HPLC指纹图谱及物理指纹图谱与对照图谱的相似度较高(相似度均>0.90)。结论 Weibull函数能较好预测当归破壁饮片沸腾干燥过程中的水分迁移规律,不同温度沸腾干燥的当归破壁饮片整体质量差异不大,指纹图谱相似度均符合要求;对指导产品生产过程中干燥工艺参数优化和提高品质具有重要意义。 相似文献
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黄芪破壁粉粒对气虚动物模型的作用及急性毒性研究 总被引:1,自引:1,他引:0
目的:观察黄芪破壁粉粒对气虚动物模型的影响,同时进行急性毒性实验以观察黄芪破壁粉粒的安全性,并与黄芪饮片进行比较。方法:采用大黄ig加限制饮食法复制小鼠气虚动物模型,观察黄芪破壁粉粒对气虚动物红细胞计数、血红蛋白含量以及负重游泳时间的影响。取KM种小鼠,随机分为正常对照组,模型对照组,黄芪饮片组(2.0 g.kg-1),生脉胶囊组(0.9 g.kg-1和黄芪破壁粉粒2.0,1.0,0.5,0.25 g.kg-14个剂量组。ig给药,连续10 d;采用最大给药量法(MTD)观察黄芪破壁粉粒的毒性。KM种小鼠60只随机分为正常对照组,黄芪破壁粉粒组和黄芪饮片组,每组各20只。然后以小鼠能耐受的最大浓度(每毫升含黄芪破壁粉粒0.4 g.mL-1)、最大容积(0.04 mL.g-1体重)ig给药2次,每隔6 h 1次。结果:黄芪破壁粉粒能够显著增加气虚动物红细胞数量,模型组(10.33±0.72)×1012/L,黄芪破壁粉粒组(11.30±0.63)×1012/L;亦能增加血红蛋白含量,模型组(15.55±0.67)g/L,黄芪破壁粉粒组(16.67±1.03)g/L;延长负重游泳时间,模型组(90.50±13.13)s,黄芪破壁粉粒组(132.80±14.90)s;黄芪破壁粉粒1日2次给药的最大给药量为32 g.kg-1体重,相当于原药材临床用量的64倍。结论:黄芪破壁粉粒对气虚证动物模型有改善作用,黄芪破壁粉粒、黄芪饮片最大给药量均为32 g.kg-1,未见对小鼠产生明显毒性反应。 相似文献
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LC-MS/MS法测定比格犬血浆中的磷酸可待因 总被引:1,自引:0,他引:1
目的建立灵敏、快速的LC-MS/MS法测定比格犬血浆中磷酸可待因浓度的方法。方法血浆样品经乙醚-二氯甲烷(60∶40)萃取后,以甲酸-10 mmol·L-1乙酸-甲醇(0.2∶62∶38)为流动相,盐酸利多卡因为内标,采用Phenomenex C18(150 mm×2 mm,3μm)色谱柱进行分离,流速0.2 mL·min-1,进样量10μL;LC-MS/MS法选择反应监测方式,定量分析的离子反应分别为m/z 300→165(磷酸可待因)和m/z 235→86(盐酸利多卡因)。结果 0.08~16 ng·mL-1磷酸可待因与峰面积的线性关系良好(r=0.9977);其最低定量下限为0.08 ng·mL-1,绝对回收率大于85%,批间和批内的变异系数小于15%。结论所用方法操作简便、快速、选择性好、灵敏度高,适用于磷酸可待因的生物等效性及药物动力学的研究。 相似文献