尼古丁对大鼠骨髓间充质干细胞软骨分化的干预作用研究

目的 从细胞水平证实尼古丁对大鼠骨髓间充质干细胞(bone mesenchymal stem cells,BMSCs)诱导分化为软骨细胞的干预作用.方法 大鼠BMSCs传代至第3代,以海藻酸钠微球生物支架进行BMSCs三维培养.加入转化生长因子β1(TGF-β1)进行诱导分化,在细胞分化过程中,分别给予0.1、1、10、100μmol/L尼古丁干预,设对照组.第28天收获细胞,采用四甲基偶氮唑蓝(MTT)法检测细胞代谢活力、阿利新蓝特殊染色检测细胞中氨基葡聚糖的含量、实时荧光定量PCR检测软骨分化标志基因(COL2A1、Aggrecan、COL1A1、COL10A1)的表达情况.结果 诱导培养28 d后,MTT法结果示不同浓度尼古丁干预后的各组细胞代谢活力与对照组细胞相比,没有明显改变;当尼古丁作用浓度分别为0、0.1、1、10和100μmol/L时,其BMSCs海藻酸钠微球的阳性染色区域占切片的百分比分别为90.1％、76.5％、64.8％、44.1％、4.5％;与对照组比较,尼古丁能显著抑制软骨诱导分化下的BMSCs细胞中Aggrecan、COL2A1的表达,同时促进COL1A1、COL10A1的表达(P均<0.05),并且存在浓度依赖性.结论 尼古丁能够明显抑制大鼠BMSCs的软骨分化,导致其软骨分化质量差.     

肌酸抑制TNF-α诱导内皮细胞黏附分子mRNA的表达

目的探讨肌酸(creatine,CR)对血管内皮细胞(endothelail cells,EC)黏附分子E-selectin和ICAM-1及其mRNA表达的影响。方法以不同浓度的CR加至培养的血管EC24h,用TNF-α诱导EC活化3h,添加或未添加腺苷A2A受体拮抗剂(ZM241385),应用ELISA测定EC的E-selectin和ICAM-1的表达水平、用RT-PCR半定量E-selectin和ICAM-1mRNA的表达。结果EC经TNF-α诱导后,黏附分子及其mRNA表达明显增加,与对照组相比,E-selectin和ICAM-1分别增加82%和32%,E-selectin和ICAM-1的mRNA分别增加53%和24%。在添加CR0.5mmol/L组,这些表达明显下调,当CR添加浓度为5mmol/L时它们的表达接近对照组水平。CR对激活的CE黏附分子表达抑制作用能因ZM241385的添加而解除(P<0.05)。结论CR抑制活化了的ECE-Selectin和ICAM-1mRNR的表达,从而下调EC的E-selectin和ICAM-1的表达以发挥抗炎作用。     

褪黑素激活Nrf2和HO-1对锰诱导纹状体氧化应激的影响

目的探讨Nrf2和HO-1在锰所致纹状体氧化应激中的作用及褪黑素(MT)对其的影响。方法小鼠82只,均分为6组,分别为对照组、低MnCl2组、中MnCl2组、高MnCl2组、MT对照组和MT+高MnCl2组。第5、6组提前皮下注射(sc)给予5 mg/kg MT,2 h后,第2、3、4和6组分别腹腔注射给予12.5、25、50和50 mg/kg MnCl2,连续2周。用流式细胞仪测定细胞内ROS,比色法检测GSH和MDA含量,免疫组化法检测Nrf2和HO-1表达,Western blotting检测Nrf2和HO-1的蛋白水平。结果与对照组相比,在各MnCl2组中ROS含量、MDA含量、Nrf2和HO-1的阳性表达及其蛋白水平均增加,GSH含量下降。而MT对照组中仅Nrf2和HO-1表达及蛋白水平均明显增加。与高MnCl2组相比,在MT+高MnCl2组ROS和MDA含量均明显下降,GSH含量、Nrf2和HO-1阳性表达及蛋白水平明显增加。结论褪黑素可拮抗锰所致的小鼠纹状体氧化应激,其机制可能与Nrf2和HO-1有关。     

N-乙酰半胱氨酸对汞致大鼠肾皮质线粒体能量代谢损伤的影响

目的通过亚急性汞染毒实验研究N-乙酰半胱氨酸(NAC)对汞所致大鼠肾皮质线粒体能量代谢的影响。方法将24只清洁级Wistar大鼠按体重随机分为分别为对照组、汞染毒组和NAC+汞染毒组,每组8只。对照组、汞染毒组大鼠腹腔注射生理盐水,NAC+汞染毒组腹腔注射0.480mmol/L的NAC,注射剂量为5ml/kg;2h后,对照组皮下注射生理盐水,汞染毒组和NAC+汞染毒组大鼠皮下注射368μmol/L的HgCl2溶液,注射剂量为5ml/kg。每天注射1次,连续注射14天。最后一次注射24h后,处死大鼠,取肾皮质,梯度离心得线粒体,测定丙二醛(MDA)含量、磷脂酶A2(PLA2)和琥珀酸脱氢酶(SDH)的活力以及线粒体膜电位。结果与对照组相比,汞染毒组大鼠肾皮质线粒体中MDA含量和PLA2活力以及膜电位升高,SDH活力下降,差异均有统计学意义(P0.05,P0.01);NAC+汞染毒组大鼠肾皮质线粒体中PLA2活力升高,差异有统计学意义(P0.05)。与汞染毒组相比,NAC+汞染毒组大鼠肾皮质线粒体中MDA含量和PLA2活力以及膜电位降低,SDH活力升高,差异均有统计学意义(P0.05,P0.01)。结论汞可导致大鼠肾皮质线粒体能量代谢的障碍;NAC预处理能降低汞所致大鼠肾皮质线粒体能量代谢的障碍。     

基于网络药理学的丹参治疗视网膜静脉阻塞作用机制研究

目的:探讨丹参治疗视网膜静脉阻塞(RVO)的作用机制。方法:采用中药系统药理学数据库与分析平台(TCMSP)检索丹参的有效化学成分,并收集其对应的作用靶点;使用GeneCards数据库检索与RVO相关的靶点;采用ClusterProfiler R软件绘制交集靶点的韦恩图;采用STRING 11.0数据库构建蛋白质-蛋白质相互作用(PPI)网络,采用Cytoscape 3.7.2软件构建"药物-活性成分-疾病-靶蛋白"相互作用网络;采用ClusterProfiler R软件对靶点进行基因本体(GO)和京都基因与基因组百科全书(KEGG)富集分析。结果:得到丹参有效成分41个、药物靶点70个、RVO靶点1705个,最终获得丹参治疗RVO的潜在作用靶点46个,KEGG通路76条。结论:丹参可能通过调控炎症反应、血管生成、凝血过程和细胞凋亡等对RVO发挥治疗作用。     

艾司洛尔与阿片类药联合应用对原发性醛固酮增多症患者手术气管插管和拔管时血流动力学的影响

 目的观察艾司洛尔与瑞芬太尼或舒芬太尼联合应用对原发性醛固酮增多症患者气管插管和拔管时血流动力学的影响。方法将48 例ASA域级择期行腹腔镜下肾上腺肿瘤切除术患者随机分为2 组：瑞芬太尼（Remif）组和舒芬太尼（Suf）组。Remif组：诱导给予瑞芬太尼0.5 μg /kg,维持给予瑞芬太尼0.1 μg·kg-1·min-1持续泵注。Suf 组诱导给予舒芬太尼0.1 μg/kg,维持给予舒芬太尼0.02 μg·kg-1·min-1持续泵注,复合七氟醚1.5%~2.5%,氧气空气比1颐1 维持,插管及拔管前5 min 均静脉注射艾司洛尔0.5 mg/kg,术中艾司洛尔10 μg·kg-1·min-1持续泵注。监测2 组患者麻醉前、插管、拔管及术中血流动力学指标。结果Remif组插管后与麻醉前比较心率无明显变化,插管后1 min 和3 min 血压明显升高（ P< 0.05）,5 min 恢复正常。拔管时心率血压无明显变化。Suf 组插管后与麻醉前比较心率无明显改变,血压明显下降（ P< 0.05）;拔管后心率、血压均无明显改变。在插管后1,3,5 min,Remif 组平均动脉压明显高于Suf 组（ P< 0.05）。结论在肾上腺肿瘤切除手术中,艾司洛尔与舒芬太尼合用更能有效抑制插管时血压波动,提供更好的血流动力学稳定性。     

牛磺酸对甲基汞染毒大鼠脑皮质Nrf2及HO-1、γ-GCS、Gpx-1表达的影响

目的研究甲基汞对大鼠脑皮质Nrf2及HO-1、γ-GCS、Gpx-1表达的影响及牛磺酸的干预作用。方法Wistar大鼠40只按体重随机分为4组,每组10只,分别为(1)对照组、(2)低剂量染甲基汞组、(3)高剂量染甲基汞组、(4)牛磺酸干预组,染毒前,1～3组大鼠只给予皮下注射生理盐水,第4组大鼠给予皮下注射1 mmol/kg牛磺酸;2 h后,第1组仍腹腔注射生理盐水,第2组大鼠腹腔注射4μmol/kg氯化甲基汞,3、4组大鼠则腹腔注射12μmol/kg氯化甲基汞溶液,每周染毒5次,隔日干预1次,连续4周。最后一次染毒24 h后,处死大鼠,分离大脑皮质,用冷原子吸收法检测汞含量,Real-time PCR和Western blotting法测定Nrf2、HO-1、γ-GCS、GPx-1的mRNA和蛋白的表达。结果与对照组比较,低、高甲基汞组中汞含量、HO-1和γ-GCS的mRNA和蛋白表达均显著升高;高甲基汞组Nrf2的mRNA和蛋白表达显著升高,Gpx-1的表达显著降低。与高甲基汞组比较,牛磺酸干预组大鼠大脑皮质中汞含量无明显差异;Nrf2、HO-1和γ-GCS的mRNA和蛋白表达明... 更多还原     

点扫描式粒子治疗患者验证分析的初步研究

目的 通过对以调强点扫描质子和碳离子技术治疗患者的验证计划测量结果分析,评估现行的计划验证方式的完善性。方法 通过分析质子和碳离子验证计划的1 734个射束照射记录,验证测量通过的标准是验证计划测量值与计算值之间的剂量差异≤3%或距离一致性（distance-to-agreement,DTA）差异≤3 mm,同时满足所有电离室的剂量偏差平均值≤3%,电离室矩阵中24个电离室中有至少22个通过此标准为验证计划通过,测量结果按照不同的测量水箱、测量房间和电离室矩阵测量深度等测量信息分类。结果 测量结果分类分析显示,验证测量通过率和测量参数存在部分相关性,质子和碳离子总的计划通过率分别为97.7% 和91.9%。对于质子射束,验证测量通过率在任意深度都较高,但对于碳离子的验证测量,验证测量通过率会随着测量深度的增加而降低。多数电离室性能稳定,不同水箱,不同治疗机房间验证通过率无明显差异。结论 用三维水箱测量到的点剂量和治疗计划系统（TPS）计算的剂量值之间有较好的一致性。当电离室矩阵在水中的测量深度>150 mm时,碳离子通过率会略差,可能由于在高剂量跌落的区域,水箱内电离室矩阵摆位的不确定性（左右和深度方向）造成,也可能是TPS散射模型对碳离子在深度>150 mm处剂量贡献评估存在不足造成,此现象仍需要做进一步研究。     

中国西部地区农村医师岗位职业能力调查研究

目的 了解西部地区农村医师职业能力现状,为开展农村医师职业能力培训和专科层次临床医学教育提供依据。方法 2012年9月-2013年2月采用分层多阶段抽样法抽取西部地区（重庆市、贵州省铜仁市和云南省楚雄市）36个农村基层卫生机构,采用自制问卷调查被抽取机构中的农村医师,调查内容包括一般情况和职业能力适应情况（工作环境适应能力、人际关系沟通协调能力、诊疗技术能力及仪器设备使用操作能力）。共调查580人,应答498人,应答率85.9%。结果 10.4%（52/498）的农村医师无任何证书。只有43.9%（208/473）的农村医师选择与患者关系好或很好。79.6%（393/494）的农村医师有转诊经历,主要原因为缺乏诊疗设备,35.9%（141/393）的农村医师因为缺乏诊疗技术转诊。农村医师经常并正确使用的诊疗仪器是血压计、听诊器、体质量身高计和血糖仪,对其他常规仪器设备能经常并正确使用的农村医师所占比例较低。67.3%（335/498）的农村医师经常使用仪器辅助诊断,另外32.7%（163/498）偶尔或从不使用。经综合评价,农村医师工作环境适应能力74.2分,人际关系沟通协调能力74.0分,诊疗技术能力69.6分,仪器设备使用操作能力31.8分。结论 西部地区农村医师学历较低,与患者沟通能力差,缺乏诊疗技术,不能正确使用诊疗设备,这严重限制了其提供医疗服务的质量。对现有的农村医师按全科医师标准进行培训或进修势在必行,在专科层次临床医学专业教育中加强对学生沟通能力培养和提高临床诊疗技术水平、基本操作技能至关重要。     

NMDAR和DR在重金属致学习记忆损伤中的研究进展

学习和记忆作为大脑的高级功能,其生物学机制十分复杂。而重金属作为污染环境的重要物质,由其中毒引起的以学习记忆损伤为主要表现的认知障碍等相关疾病的发病率在不断增长,形势不容乐观。有研究表明,在由重金属引起的学习记忆受损的过程中,N-甲基-D天冬氨酸受体（ N-methyl-D-aspartate receptor, NMDAR）和多巴胺受体（Dopamine receptor, DR）发挥了重要作用。该文就NMDAR和DR在重金属致学习记忆损伤中的研究进展作一综述。