人内皮型一氧化氮合酶结构和功能的生物信息学分析

目的运用生物信息学方法分析内皮型一氧化氮合酶(eNOS)的结构和功能。方法利用生物信息学的各种软件,分析eNOS基因启动子、基因同源性,以及其所编码蛋白的理化性质、信号肽、跨膜结构、二级结构、三级结构、翻译后修饰和蛋白质相互作用。结果 eNOS基因有14个启动子,基因同源性分析发现人与猪的eNOS基因序列接近度较高。eNOS蛋白属于亲水的不稳定蛋白,不属于分泌蛋白,且没有信号肽;二级结构以α螺旋和无规则卷曲为主,三级结构稳定可靠;N-糖基化位点和O-糖基化位点各有0和29位,磷酸化的位点有Ser:35,Thr:14,Tyr:4。eNOS蛋白可以与10个蛋白发生作用。结论 eNOS具有利于蛋白间相互作用的结构,并可在细胞膜定位,具有传递信息的功能。     

中西医治疗慢性乙型病毒性肝炎研究新进展

慢性乙型病毒性肝炎(chronic hepatitis B virus,CHB)在我国感染率高,若治疗不当或治疗不及时,都会导致病情恶化,危害患者身体健康和生命安全,影响社会经济和卫生事业发展。然而现有的医疗水平尚不能将CHB完全治愈。为此,文章收集和整理了近几年的中外文献,比较西医、中医或中西医结合治疗CHB的各自优劣。并对中西医治疗CHB研究新进展进行系统综述,为其治疗发展提供借鉴。     

肝脏类器官研究的文献计量学分析

背景：近些年,肝脏类器官的发展使其成为国际肝病研究领域的热点,但目前仍未有文献对其进行文献计量学分析。目的：基于文献计量学与可视化分析探索近20年肝脏类器官的热点趋势。方法：从Web of Science(科学网,WOS)核心合集中检索2002-01-01/2022-11-12肝脏类器官的相关文献,运行Origin、Office和CiteSpace软件进行文献计量与可视化分析,通过生成图表的方式来统计分析文献的年发文量、国家、机构、作者、期刊和关键词等内容。结果与结论：肝脏类器官研究领域近20年的发文量、被引频次、加入研究的机构和人员总体呈现上升趋势,说明该领域发展迅速关注度也逐渐升高。在该领域中,美国的发文量最多、影响力最强,虽然投入大量的时间与精力,但是在众多研究机构中美国单个研究机构的发文量并非最高;中国发文量仅次于美国,中国科学院和复旦大学是国内发文量最多的机构。荷兰乌得勒支大学是发文量最多的机构,发文量最高的作者是Clevers H,共引频次最高的文章是“Long-term culture of genome-stable bipotent stem cells from a...     

莪术醇对肝星状细胞Rho-ROCK信号通路作用的实验研究

目的：研究莪术醇对肝星状细胞Rho-ROCK信号通路的作用，以此来分析莪术醇抗肝纤维化的作用机制。方法：用莪术醇孵育HSC-T6细胞48 h后用MTT法检测细胞增殖率，用免疫印迹和RT-PCR检测Rho-ROCK信号通路上关键分子RhoA和ROCK2的表达和含量。结果：RT-PCR检测发现莪术醇高、中、低浓度对Rho-ROCK信号通路中的关键分子RhoA和ROCK2mRNA的表达较模型组有抑制作用，而且这种抑制作用有明显的剂量依赖性，差异有显著性（P<0.05）；WB检测发现莪术醇高、中、低浓度对Rho-ROCK信号通路中的关键分子RhoA和ROCK2的表达较模型组有抑制作用，而且这种抑制作用有明显的剂量依赖性，差异有显著性（P<0.05）。结论：莪术醇可以抑制Rho-ROCK信号通路的活动，达到抗肝纤维化的效果。     

以生理学精品课程建设为契机的教学探索与实践

精品课程建设是专业建设和学科建设的基础及中心环节,是提高教学质量的重要途径,是学校教学质量与教学改革工程的重要组成部分。精品课程建设是加强和促进高等学校教学质量的重要举措,其内涵是建设一流的师资队伍、一流的教学内容、一流的教学方法、一流的教材与一流的教学管理等。     

桂郁金提取物对人肝星状细胞增殖、凋亡影响的研究

目的:观察桂郁金提取物对人肝星状细胞的作用,了解其对该细胞的增殖和凋亡的影响。方法:将人肝星状细胞株(HSC-LX2)与药物孵育48h后,用MTT比色法测定细胞的增殖抑制率。用流式细胞术(ANNEXIN V-PE/7-AAD双染色法)检测细胞凋亡各阶段的情况。结果:低、中、高浓度桂郁金提取物均可抑制HSC-LX2细胞的增殖,48h的增值抑制率分别为15.4%、49.1%、58.3%;48h的IC50为45μmol/L;均可诱导细胞发生早期及晚期凋亡,48h的总凋亡细胞百分比分别为20.7%、29.8%、34.4%。结论:桂郁金提取物具有抑制HSC-LX2细胞增殖、诱导细胞发生凋亡的能力,从而可以干预肝纤维化病程;以上能力均具有剂量依赖性;且中、高剂量桂郁金提取物组以上能力明显比秋水仙碱组和复方鳖甲软肝片组强。     

桂郁金提取物对人肝星状细胞增殖、细胞周期及凋亡影响的研究

目的观察桂郁金提取物对人肝星状细胞的作用,了解其对该细胞的增殖、细胞周期和凋亡情况的影响。方法将人肝星状细胞株(HSC-LX2)与药物孵育48 h后,用MTT比色法测定细胞的增殖抑制率。用流式细胞术(PI染色法)检测各周期细胞的DNA含量及细胞凋亡的概况。结果低、中、高浓度桂郁金提取物均可抑制HSC-LX2细胞的增殖,48h的增值抑制率分别为15.4%、49.1%、58.3%;48 h的IC50为45μmol/L;均可阻止HSC-LX2细胞进入DNA合成增殖周期,并诱导HSC-LX2细胞发生早期及晚期凋亡,48 h的S期+G2/M期细胞总数百分比分别为70.1%、63.6%、50.2%;凋亡概率分别为13.9%、18.9%、23.5%。结论桂郁金提取物具有抑制HSC-LX2细胞增殖、阻止细胞进入DNA合成增殖周期、诱导细胞发生凋亡的能力,从而可以干预肝纤维化病程;以上能力均具有剂量依赖性;且中、高剂量桂郁金提取物组以上能力明显比秋水仙碱组和复方鳖甲软肝片组强。     

白花丹醌对瘦素刺激的人肝星状细胞周期及其相关蛋白表达的影响

目的 研究白花丹醌对瘦素刺激的体外培养人肝星状细胞（HSC-LX2）细胞周期及周期相关蛋白表达的影响,探讨白花丹醌抗肝纤维化的作用机制。方法 ELISA法检测HSC-LX2细胞培养上清液中自分泌瘦素水平。将HSC-LX2细胞分成对照组,瘦素组,白花丹醌2、8 μmol/L组,秋水仙碱6.25 μg/mL阳性对照组。除对照组外,其余各组细胞用瘦素100 μg/mL刺激24 h、再与药物共同培养24 h后,流式细胞仪检测HSC-LX2细胞周期,Western blotting法检测细胞周期相关蛋白cyclin D1、cyclin E1、p21的表达。结果 HSC-LX2细胞自分泌瘦素的浓度先随着培养时间的延长而递减,24 h达到低谷值,48 h后又升至6 h水平,每个时间点分泌的瘦素量无显著差异（P＞0.05）。与对照组相比,瘦素组HSC-LX2细胞增殖能力显著增强,S期和G₂/M期细胞比例显著增加;而白花丹醌2、8 μmol/L干预后,HSC-LX2细胞G₀/G₁期细胞的比例明显提高,而S期和G₂/M期细胞比例明显降低,且呈明显的浓度相关性。与对照组比较,瘦素组HSC-LX2细胞经瘦素刺激后细胞周期相关蛋白cyclin D1、cyclin E1的量显著增加,p21蛋白的表达受到抑制;白花丹醌2、8 μmol/L和秋水仙碱明显降低cyclin Dl、cyclin E1蛋白水平,增强p21蛋白表达。结论 白花丹醌可明显抑制瘦素诱导的HSC-LX2细胞增殖,该作用主要是通过抑制细胞由G₀/G₁期向S期转变而产生的,作用机制可能与其降低cyclin Dl、cyclin E1蛋白水平,增加p21蛋白表达相关。     

肝纤维化肝窦内皮细胞免疫功能改变的研究进展

正常肝脏是免疫耐受大于免疫原性的器官,肝窦内皮细胞(HSEC)在参与正常肝脏免疫耐受方面的研究是热点。在肝脏疾病中,很少有关HSEC免疫方面的研究。肝纤维化过程中,HSEC结构和功能的改变,可能造成其免疫功能的转变(免疫耐受转化为免疫应答),但HSEC免疫功能的转变,也可能影响肝纤维化的进程,研究纤维化肝脏肝窦内皮细胞(FH-SEC)免疫功能,对应用免疫手段治疗肝纤维化有重要意义。     

白花丹醌对瘦素刺激人肝星状细胞转化生长因子-β_1表达的影响

目的研究白花丹醌对瘦素刺激体外培养人HSC-LX2TGF-β1 mRNA和蛋白表达的影响。方法体外培养HSC-LX2,瘦素(leptin)刺激24h,各药物与细胞共孵育24h后,采用荧光PCR检测各组TGF-β1 mRNA的表达和免疫组织化学方法检测TGF-β1蛋白表达情况。结果与leptin组比较,白花丹醌各剂量组作用24h后,HSC-LX2细胞中TGF-β1 mRNA的水平明显降低,尤以中、高剂量组明显(P<0.01);免疫组化结果显示白花丹醌各剂量组对HSC-LX2细胞TGF-β1蛋白表达有一定的抑制作用,且作用呈剂量依赖性。结论白花丹醌抗肝纤维化作用机制之一是从mRNA和蛋白水平抑制TGF-β1表达,从而抑制HSCECM的合成,发挥抗肝纤维化作用。