抗人DR5单克隆功能抗体mDRA-6诱导Jurkat细胞凋亡的Caspase路径机制研究

目的:探讨抗人死亡受体5(DR5)功能性单克隆抗体(mDRA-6)对Jurkat细胞诱导凋亡的Caspase分子机制.方法:琼脂糖凝胶电泳检测mDRA-6作用后Jurkat细胞的DNA ladder;MTT法检测单克隆抗体(mDRA-6)对Jurkat细胞生长抑制作用的剂量.效果关系;Annexin V-FTTC/PI双染流式细胞术定量分析mDRA-6对Jurkat细胞的凋亡作用;观察Caspase-10、9、8、3等抑制剂对mDRA-6诱导细胞凋亡的抑制作用;免疫印迹技术检测凋亡信号蛋白Caspaw-10、9、8、3、Bid(tbid)、Cyto c等活化裂解的情况.结果:琼脂糖凝胶电泳显示DNA呈现明显梯状带型;mDRA-6对Jurkat细胞具有明显的生长抑制作用且呈量-效关系,Annexin V-FTTC/PI双染流式细胞术检测显示,mDRA-6在2.0 μg/ml浓度作用Jurkat细胞0.23、0.5、1、2小时,其凋亡率分别为16.17%、28.25%、69.23%、78.23%;Caspase-8抑制剂能明显抑制mDRA.6诱导的细胞凋亡,抑制率为77.85%,Caspase-3和Cas-pase-9抑制剂的抑制率分别为54.20%、8.74%,而Caspase-lO的抑制剂无抑制作用;免疫印迹技术检测显示Caspase-8、3、9均呈现随时间延长酶原逐渐减少、活化片段增加的现象,Bid激活降解为tbid,Cyto c大量释放,而Caspase-10酶原无明显改变、无活化片段出现.结论:mDRA-6诱导Jurkat细胞凋亡主要是激活了死亡受体信号传导途径上游的Caspase-8引起的,该细胞凋亡机制涉及Caspase-3、Caspase-9及Bid(tbid)、Cyto c等分子,而同样是凋亡的上游信号Caspase-10没有参与此凋亡过程.本研究为mDRA-6的人源化改造及后续的实验研究打下了基础.     

RBC花环法识别精液中T淋巴细胞的研究

目的 :研究一种识别精液中T淋巴细胞的方法。方法 :以 96例男性不育症门诊病人为测试对象 ,用冻干抗人T淋巴细胞单克隆抗体致敏的RBC与处理后的精液混合 ,置于显微镜下观察结果。结果 :凡粘附 3个以上致敏RBC者为淋巴细胞 ,未粘附RBC者为生精细胞。结论 :用RBC花环法识别精液中的T淋巴细胞可以作为一种切实可行的方法在临床上应用     

不育症患者解脲支原体的检测及中西医结合治疗

解脲支原体 (UreaplasmeUrealyticum)简称UU ,是引起非淋菌性尿道炎的主要病原体之一。为探讨解脲支原体在不育症中的作用及药物治疗效果 ,我们对不育症门诊 4 2 0例不育症患者的尿道及宫颈分泌物进行解脲支原体分离鉴定 ,并对阳性病例进行了药物治疗观察 ,报道如下。1　临床资料1.1　不育症组4 2 0例 ,其中男性 336例 ,年龄 2 0岁～ 4 5岁 ;女性 84例 ,年龄 2 0岁～ 4 0岁。1.2　对照组80例 ,男性 6 3例 ,女性 17例 ,年龄 2 2岁～ 35岁 ,有生育史无尿道炎及阴道炎的健康人。1.3　标本采集及解脲支原体分离鉴定采用自行研制的解脲支原体试…     

解脲支原体感染对精子膜功能的影响

本文对70例不育男性精液进行解脲支原体分离培养,同时进行精子低渗膨胀试验。结果显示,解脲支原体感染者,精子膜功能明显低于非感染者;非感染不育男性明显低于正常生育男性。提示解脲支原体感染导致精子膜功能降低,是引起男性不育的原因之一。     

中药白癜丸对小鼠的免疫调节作用

0　引言白癜风常见 ,发病率达 1% [1] .发病机制仍未明确 ,没有特效的治疗方法[2 ] .祖国医学认为白癜风的发生往往是由于血虚风乘 ,气血失和 ,或肾气不足、气血生化无源等致使血不养肤而成 .表明该病的发生与自身免疫功能失调有关[3] .据此我们提出扶正固本、补益肝肾、活血化瘀、养血活血、疏肝解瘀的治疗原则白癜风药物 -白癜丸[3] ,以调节机体的免疫功能 ,使其恢复正常 .为此我们进行了动物实验 ,以探讨其调节机制如下 .1　材料和方法1 1　材料　药物白癜丸为河南大学男科学研究所研制治疗白癜风的经验处方 ,由河南大学附属药厂将各味中…     

mDRA-6与尼美舒利对Jurkat细胞的杀伤效应

目的：探讨mDRA-6与尼美舒利对Jurkat细胞有无杀伤作用及二者有无协同效应。方法：常规培养Jurkat细胞，流式细胞术检测细胞表面DR5的表达率，MTT法检测细胞毒性作用，Hoechst33258染色观察Jurkat细胞核形态变化，流式细胞术定量分析凋亡细胞率。结果：①Jurkat细胞表面DR5的表达率为84.83%。②mDRA-6与尼美舒利均能杀伤Jurkat细胞，存在浓度依赖性。400μmol/L的尼美舒利作用细胞10小时，细胞凋亡率为11.51%；0.5ng/ml与1ng/ml的mDRA-6作用细胞10小时，细胞凋亡率分别为3.67%和6.3%；③二者联合具有较好的协同促凋亡作用，400μmol/L的尼美舒利联合0.5ng/ml与1ng/ml的mDRA-6作用细胞10小时，细胞凋亡率分别为50.38%和63.79%。结论：mDRA-6与尼美舒利均有杀伤Jurkat细胞的作用，二者具有较强的协同作用，杀伤作用是通过诱导凋亡实现的。     

弓形虫感染与精子膜功能完整性的研究

目的　探讨弓形虫感染对精子膜功能的影响。方法　将 1 79例弓形虫检测的不育男性分为抗弓形虫抗体(ATAb)阳性组 (53例 )和阴性组 (1 2 6例 ) ,对其精液做低渗膨胀试验 ,进行对照分析。结果　ATAb阳性组的精子总膨胀率(44 50± 8 69)明显低于ATAb阴性组 (58 2 5± 9 48,P <0 0 1 ) ;ATAb阳性组 g型精子总膨胀率 (1 0 75± 3 2 2 )明显低于ATAb阴性组 (1 6 0 2± 6 2 8,P <0 0 1 )。结论　弓形虫感染对精子膜功能有明显影响 ,是弓形虫引起男性不育的原因之一     

中西医结合治疗男性免疫性不育症1806例

0 引言近年来的免疫学研究发现,不明原因的不育患者体内存在着抗精子抗体(Anti-sperm antibody, ASAb)并对不育产生影响[1,2]. 我院近年来对抗体阳性者进行了中西医结合治疗,有效消除了抗体,取得了较好的临床效果,现报道如下.