抗木瓜凝乳蛋白酶单链抗体基因的构建、初步筛选和鉴定

目的 :构建抗木瓜凝乳蛋白酶全套单链抗体 (scFv)噬菌体表面展示文库。方法 :从木瓜凝乳蛋白酶免疫小鼠的淋巴细胞中提取总RNA ,反转录成cDNA后 ,用抗体V区简并引物扩增全套VH 和VL 基因。经重叠延伸反应 ,装配成scFv基因 ,并将其克隆到噬粒载体pFAB5C中 ,构建scFv噬菌体抗体库。对抗体库进行亲和筛选后 ,用ELISA法鉴定抗木瓜凝乳蛋白酶的scFv。结果 :经 4轮“亲和 吸附 洗脱”的富集过程 ,得到ELISA活性较高可与木瓜凝乳蛋白酶结合的克隆。结论 :成功地构建了抗木瓜凝乳蛋白酶的scFv噬菌体展示文库 ,并筛选到与木瓜凝乳蛋白酶具有结合能力的scFv基因     

肾移植术后环孢素A的血药浓度监测

目的　监测环孢素A血药浓度 ,分析肾移植术后不同时期环孢素A血药浓度与疗效及毒性的关系。方法　采用荧光偏振免疫法测定 2 2 0例肾移植术后患者环孢素A血药浓度 ,结合临床疗效进行统计分析。结果　环孢素A在肾移植术后 <1个月、2～ 3个月、4～ 6个月、7～ 12个月、1～ 2年、>2年理想的治疗浓度分别为 2 5 0～4 5 0 ,2 5 0～ 4 0 0 ,180～ 35 0 ,15 0～ 30 0 ,10 0～ 2 5 0 ,10 0～ 2 0 0 μg/L;发生排斥反应时的浓度为 (182 93± 83 89) μg/L;出现中毒反应时浓度为 (5 5 2 88± 2 5 1 86 ) μg/L。结论　监测环孢素A血药浓度、及时调整剂量 ,有利于肾移植术后避免排斥反应和环孢素A中毒的发生。     

木瓜凝乳蛋白酶溶核治疗腰椎间盘突出症的研究进展

目的：综述国内外木瓜凝乳蛋白酶在治疗腰椎间盘突出症方面的研究进展,为国内开展木瓜凝乳蛋白酶制剂和溶核研究提供参考。方法：采用回顾性查阅Medline和中国生物医学文献数据库中有关木瓜凝乳蛋白酶溶核治疗的文献,对其药理学机制、疗效评价、注意事项和应用前景进行评价。结果：国内外近40年的临床应用经验表明木瓜凝乳蛋白酶治疗腰椎间盘突出症具有疗效确切、经济、并发症低、风险小的特点．结论：木瓜凝乳蛋白酶已成为治疗腰椎间盘突出症的新方法,国内开发类似制剂前景看好。     

有机阴离子转运多肽1B1521T＞C基因多态性与原发性高血压的相关性

目的 探讨有机阴离子转运多肽1B1(OATP1B1)521T＞C与原发性高血压的相关性.方法 采用实时荧光定量TaqMan-MGB探针法,检测164例原发性高血压患者和159例非高血压对照者OATP1B1 521T＞C的基因型,并将其检测结果与DNA测序结果进行比较.结果 高血压组OATP1B1 521T＞C的T/C基因型频率明显低于对照组(16％、25％,P＜0.05),且OATP1B1 521T＞C的C等位基因频率明显低于对照组(10％、17％,P＜0.05),而Logistic回归分析法对影响高血压的相关因素进行回归分析,亦显示OATP1B1 521T＞C基因多态性与高血压有相关性(P＜0.05).结论 SLCO1B1的521T＞C突变为中国原发性高血压人群中的常见突变,在原发性高血压人群和血压正常人群之间的分布有差异;SLCO1B1的52IT＞C突变与原发性高血压的发病之间可能具有相关性.