STAT3介导表观遗传学调控对子痫前期发病的作用及临床分析

目的:探讨滋养细胞STAT3基因介导表观遗传学调控对子痫前期(PE)发病的作用及临床分析。方法:选择2017年1月至2019年7月在南方医科大学附属花都医院产科住院分娩的孕妇120例,其中60例PE妊娠被纳入PE组,60例正常足月妊娠被纳入正常对照组。分娩前ELISA检测血清,分娩后取胎盘组织进行HE染色、免疫组织化学、Real time-PCR和Western blot检测、全基因组甲基化测序(WGBS)、RNA-seq、Microarray分析、基因富集分析(GSEA)、甲基化DNA免疫共沉淀测序(MeDIP-Seq)。采用t检验和单因素方差分析,对数据进行统计分析。结果:两组胎盘中绒毛滋养细胞与绒毛外滋养细胞均表达有DNMT1、STAT3、PTEN及TSC2蛋白。与正常对照组相比,PE组血清中STAT3、PTEN、TSC2蛋白表达量显著降低,而DNMT1升高;胎盘组织中STAT3 mRNA、PTEN mRNA及TSC2 mRNA表达均降低,而DNMT1 mRNA升高,差异均有统计学意义(P<0.05)。WGBS结果显示PE组和正常对照组DNA甲基化水平比较,DNMT1(34...     

异丙酚预处理对心肺复苏后大鼠学习记忆能力及海马神经元的保护作用

目的:观察异丙酚(propofol,PPF)预处理对心肺复苏后大鼠学习记忆能力的影响以及海马神经元的保护作用。方法:将80只Sprague-Dawley大鼠随机分为正常对照组、复苏+英脱利匹特对照组(R+intralipid)、复苏+异丙酚低剂量预处理组(R+PPF 10 mg/kg)、复苏+异丙酚高剂量预处理组(R+PPF 50 mg/kg)。实验组窒息前10 min腹腔注射10%异丙酚10 mg/kg或50 mg/kg。建立大鼠心肺复苏模型,并在复苏后3 d进行Morris水迷宫检测大鼠学习记忆能力,海马Nissl染色观察神经元损伤情况,Western blot检测caspase-3的表达变化。结果:与正常对照组大鼠相比,复苏后大鼠出现明显的学习记忆能力的降低(P<0.05),异丙酚预处理则能显著改善复苏导致的行为学改变(P<0.05)。Nissl染色结果表明,心肺复苏后大鼠海马CA1区神经元排列稀疏、紊乱,细胞间隙增大。异丙酚预处理(10 mg/kg或50 mg/kg)后,神经元的数量和排列模式均有显著改善。Western blot结果显示心肺复苏后,海马caspase-3的表达显著升高。而异丙酚预处理(10 mg/kg或50 mg/kg)组caspase-3的表达与英脱利匹特对照组相比显著降低(P<0.05)。结论:异丙酚预处理可能通过改善心肺复苏后的神经元损伤而发挥脑保护作用。     

益气化瘀方加葡糖胺和基因治疗对家兔退变颈椎间盘内白细胞介素1β和肿瘤坏死因子α含量的影响(英文)

背景:退变颈椎间盘组织可释放多种细胞因子和炎症介质,它们在颈椎病的发生、发展过程中起重要作用。目的:观察抗细胞因子的中西药(益气化瘀方抗骨增生胶囊和葡糖胺)联合应用、基因治疗对家兔退变颈椎间盘内细胞因子含量的影响。设计:随机对照观察。单位:河北省人民医院骨科,河北省人民医院中心实验室。材料:实验于2003-03/2004-01在河北省人民医院中心实验室完成。选用新西兰兔35只,雌雄不拘,按随机数字表法分为7组,即正常对照组、模型浅层组、模型全层组、药物治疗浅层组、药物治疗全层组、基因治疗浅层组及基因治疗全层组,每组5只。方法:除正常对照组外,其余6组家兔均通过切除颈背部肌肉,建立颈椎动力平衡失调模型,诱导颈椎间盘退变。浅层组切除颈背浅肌群,全层组切除颈背浅肌群和深肌群。术后7个月,①药物治疗组(浅层、全层)家兔给予抗骨增生胶囊(由狗脊、骨碎补、鸡血藤、莱菔子、牛膝、女贞子、肉苁蓉、熟地黄、淫羊藿等成分组成,江苏康缘药业股份有限公司提供)和葡糖胺(山西中远威药业有限公司提供),分别溶于20mL蒸馏水中,调配成糊状后分别按1.1g/kg和0.06g/kg灌胃,2次/d,连用1个月。②基因治疗组(浅层、全层)家兔麻醉后,将带有转化生长因子β1基因的重组质粒DNA注入C2～3,C3～4,C4～5椎间盘中(每个椎间盘用量为20μL)。造模后8个月处死各组动物,切取C3～4,C4～5椎间盘作标本,用双抗夹心ELISA法检测各组动物颈椎间盘中白细胞介素1β、肿瘤坏死因子α含量。主要观察指标:造模后8个月各组家兔颈椎间盘内白细胞介素1β、肿瘤坏死因子α含量。结果:实验过程中35只家兔无脱失,全部进入结果分析。造模后8个月各组家兔颈椎间盘内白细胞介素1β、肿瘤坏死因子α含量比较:模型浅层组和模型全层组家兔显著高于正常对照组(P<0.05～0.01),药物治疗浅层组、基因治疗浅层组显著低于模型浅层组(P<0.05),药物治疗全层组、基因治疗全层组显著低于模型全层组(P<0.05～0.01)。结论:退变颈椎间盘组织释放多种细胞因子和炎症介质,它们可加速颈椎间盘退变。中西药联合应用及基因治疗能对其含量起明显的抑制作用。     

术中自体血液回收对电镜下红细胞形态及膜蛋白二级结构的影响

目的探讨术中回收的自体血红细胞质量。方法选取全麻下行择期脊柱手术同时行术中自体血回收的患者30名,术中取患者术野活动性出血及经血液回收机回收处理后的浓缩红细胞,同时另取库存9~15d采用CPDA保养液保存的去白细胞浓缩红细胞悬液各30份。在扫描电子显微镜下观察红细胞形态,计算异常形态红细胞的百分比;采用傅立叶变换红外光谱检测红细胞膜蛋白的二级结构。结果回收血异常形态红细胞的百分比均低于术野血和库存血红细胞。3组间红细胞膜蛋白α-螺旋结构吸光度的差异均无显著性。结论扫描电子显微镜观察下回收自体血红细胞的形态优于术野血及库存血红细胞;膜蛋白的二级结构不是造成红细胞形态差异的主要原因。     

雷珠单抗联合曲安奈德玻璃体注射治疗弥漫性糖尿病黄斑水肿的临床研究

目的探讨雷珠单抗（Lucentis）联合曲安奈德（TA）玻璃体腔注射治疗弥漫性糖尿病黄斑水肿（DME）所致视力受损患者的临床疗效。 方法收集2017年1月至2018年10月在南方医科大学附属花都医院眼科确诊为DME患者78例（90眼）,采用双盲随机均分为Lucentis组（Lu组）、TA组、Lucentis＋TA组（Lu＋TA组）,3组分别以玻璃体腔单次注射Lucentis（0.5 mg/0.05 ml）、TA（2 mg/0.05 ml）和2种联合注射。检测治疗前及治疗后1 d、1周、1个月、3个月最佳矫正视力、黄斑中心视网膜厚度、眼压、眼底黄斑水肿程度和渗漏类型的变化,同时在各时间点取桡静脉血,应用酶联免疫吸附试验方法检测血清血管内皮生长因子（VEGF）、肿瘤坏死因子（TNF）-α和白介素（IL）-1β水平,采用流式细胞分析外周血中性粒细胞的凋亡情况。采用单因素方差分析和t检验比较各组最佳矫正视力、黄斑中心视网膜厚度、眼压、眼底黄斑水肿程度、VEGF、TNF-α和IL-1β水平的组内和组间差异。 结果各组治疗前平均最佳矫正视力差异无统计学意义（P<0.05）,治疗后1 d、1周、1个月、3个月最佳矫正视力明显好转,与治疗前比较差异具有统计学意义（P<0.05）,不同时间点Lu+TA组与TA组、Lu组比较,差异均具有统计学意义（P<0.05）。各组治疗前黄斑中心视网膜厚度比较差异无统计学意义（P>0.05）,治疗后1 d、1周、1个月、3个月与治疗前相比均显著降低,差异具有统计学意义（P<0.05）,不同时间点Lu＋TA组与TA组、Lu组比较,差异均具有统计学意义（P<0.05）。各组治疗前眼压、眼底黄斑水肿程度和渗漏类型比较,差异无统计学意义（P>0.05）,治疗后3个月眼压、眼底黄斑水肿程度和渗漏类型与治疗前比较,差异具有统计学意义（P<0.05）。各组治疗前血清VEGF、TNF-α和IL-1β及外周血中性粒细胞凋亡比较,差异无统计学意义（P>0.05）,治疗后1 d、1周、1个月、3个月血清VEGF、TNF-α和IL-1β外周血中性粒细胞凋亡与治疗前比较,差异具有统计学意义（P<0.05）,不同时间点Lu＋TA组与TA组、Lu组比较,差异均具有统计学意义（P<0.05）。 结论Lucentis联合TA治疗对控制糖尿病黄斑水肿以及提高DME患者最佳矫正视力、改善黄斑厚度及降低黄斑水肿程度优于Lucentis和TA单一治疗,且Lucentis与TA玻璃体腔注射有协同治疗作用,同时可以降低DME患者术后VEGF和炎性因子的水平。     

滋肾育胎丸对免疫性不孕模型大鼠卵母细胞生物学行为的调节作用

目的探讨滋肾育胎丸对抗精子抗体(As Ab)阳性的不孕大鼠卵母细胞的干预作用。方法采用主动免疫建立As Ab阳性的免疫性不孕模型。将100只雌性SD大鼠随机分为空白对照组、模型组及滋肾育胎丸低、中、高剂量组(简称中药低、中、高剂量组),每组20只。造模22天开始灌胃给药,模型组给予5 m L/kg生理盐水灌胃,中药低、中、高剂量组分别给予0.075、0.100、0.150 g/m L滋肾育胎丸灌胃,每天1次,至36天。分别在造模21天及36天采用ELISA法测定As Ab和转化生长因子(transforming growth factor-β,TGF-β)水平。处死大鼠后取卵母细胞,采用实时定量聚合酶链反应(Real-time PCR)及Western blot分别检测TGF-βmRNA及其蛋白表达水平;采用流式细胞学(FCM)和末端终未标记(TUNEL)法测定卵母细胞凋亡率;采用细胞计数-8法(CCK-8)及5-乙炔基-2'脱氧尿嘧啶核苷(5-ethynyl-2'-deoxyuridine,Ed U)检测卵母细胞增殖水平;采用划痕实验及侵袭小室(Transwell)测定卵母细胞迁移与侵袭能力。结果与空白对照组比较,模型组卵母细胞凋亡增加,细胞增殖减少,迁移与侵袭能力减弱,TGF-βmRNA及其蛋白表达水平显著下调(P0.05);与模型组比较,中药高剂量组卵母细胞凋亡减少,细胞增殖增加,迁移与侵袭能力增强,TGF-βmRNA及其蛋白表达水平显著上调(均P0.05);且中药高剂量组作用明显优于中药低、中剂量组(P0.05)。结论应用高剂量滋肾育胎丸干预免疫性不孕大鼠可明显上调其卵母细胞TGF-β水平,改善卵母细胞功能。     

应用两种不同建模方式构建子痫前期SD大鼠动物模型的实验研究

目的:探讨分析应用两种不同建模方式来构建子痫前期SD大鼠的动物模型的特异性。方法:SD孕鼠随机均分3组,空白对照组同前饲养,合体滋养细胞微绒毛(STBM)组用STBM诱导,STBM+亚硝基左旋精氨酸甲酯(L-NAME)组用STBM+L-NAME诱导。检测蛋白尿(U-TP)、血压(BP)、部分凝血活酶时间(APTT)、凝血酶原时间(PT)和D-二聚体(D-D),HE染色胎盘组织,Real time PCR和Western blot测胎盘组织可溶性血管内皮生长因子受体-1(s Flt-1)、可溶性内皮因子(SEng)、胎盘生长因子(PLGF)mRNA及蛋白表达,滋养细胞分离、培养后行功能学实验(EDU测增殖、FCM测凋亡、Transwell测侵袭)。结果:U-TP、BP、APTT、PT及D-D在孕10天3组比较差异无统计学意义(P0.05),孕15天及20天U-TP、BP STBM+L-NAME组较STBM组显著增加(P0.05),孕20天APTT、PT STBM+L-NAME组较STBM组显著缩短,D-D显著增加,空白对照组无明显变化。STBM+L-NAME组HE染色见胎盘蜕膜带水肿明显,炎性细胞浸润,基带和迷路带见滋养细胞增生。3组比较s Flt-1、SEng、PLGF mRNA及蛋白表达差异有统计学意义(P0.05)。STBM+L-NAME组s Flt-1、SEng mRNA及蛋白比STBM组明显增高(P0.05),PLGF mRNA及蛋白明显减低(P0.05)。功能学实验中3组细胞增殖和凋亡差异均有统计学意义(P0.05)。STBM+L-NAME组滋养细胞增殖和侵袭最少,凋亡最多。与STBM组比较差异有统计学意义(P0.05)。结论:在构建子痫前期动物模型中,STBM合用L-NAME诱导比单独应用STBM特异性更强,为临床子痫前期诊疗提供可靠模式研究依据。     

关节镜下采用腘绳肌肌腱指骨钢板悬吊固定重建前交叉韧带

[目的]探讨关节镜下采用腘绳肌肌腱指骨钢板悬吊固定法重建前交叉韧带(ACL)的临床效果。[方法]对13例前交叉韧带断裂的患者,在关节镜下采用6~8股腘绳肌肌腱进行单束双隧道重建,4孔指骨钢板对移植物行悬吊式固定。术后1 a随访,并按照Lysholm膝关节评分标准评价疗效。[结果]12例患者(92.31%)Lachm an试验阴性,1例患者Lachm an试验阳性,12例患者轴移试验阴性,1例患者阳性。按照Lysholm膝关节评分标准,评分从47.77±1.96提高至95.38±4.74,差异有显著性意义(P<0.01)。[结论]关节镜下采用腘绳肌肌腱指骨钢板悬吊固定重建前交叉韧带是恢复膝关节稳定性的可靠方法。     

相转化法制备超滤和微滤膜的孔结构控制

综述了近期关于超滤和微滤膜孔结构控制的一些研究工作，介绍了相转化法制备聚合物膜过程中可能发生的液－液分相、固－液分相，凝胶化等相转变过程，并依此解析了超滤和微滤膜中常见的结构形态。最后从热力学与动力学两方面探讨了对超滤和微滤膜孔结构进行控制和方法。     

重型颅脑损伤开颅术后高压氧治疗的临床研究

目的对重型颅脑损伤开颅术后患者早期进行高压氧治疗,以评估治疗这类患者的效果。方法采用病例对照研究,选择我院2009年1月1日~2010年10月1日重型颅脑损伤行开颅术后5~9天的患者60例,高压氧治疗组和对照组(非高压氧治疗组)各30例,观察患者入院时及高压氧治疗前、后1、2、3、4周的GCS评分;比较高压氧治疗开始前、高压氧治疗4周、入院后3月的随访GOS分级提高的患者数;比较高压氧治疗4周和入院后3月内的气管套管拔除例数。结果两组患者高压氧治疗后1周GCS评分比较无统计学差异(P>0.05),高压氧后2、3、4周GCS评分比较均有统计学差异(P<0.05);两组两阶段的GOS预后评分提高患者例数比较均有统计学差异(P<0.05);两组患者高压氧治疗4周内拔除气管套管例数有统计学差异(P<0.05),入院后3月时无统计学差异(P>0.05)。结论高压氧治疗对重型颅脑损伤开颅术后患者早期意识改善及预后有疗效;对重型颅脑损伤开颅术后且气管切开患者气道恢复早期治疗作用较后期突出。