高校生物化学特色教学法的思考与实践

教学内容只有通过适当的教学方法才能获得好的教学效果,因此教学方法的改革与教学观念和教学实践密切相关.在教学实践中总结出通过理论与实例紧密结合、更新提问方式等方法来提高学生的学习和参与热情,实现了风格化教学.     

大豆磷脂对羟自由基引起培养心肌细胞损伤的保护作用

目的　观察大豆磷脂脂质体浓度的累积对羟自由基引起心肌细胞损伤的保护作用。方法　采用FeSO4/Cysteine体系产生羟自由基作用于培养的乳鼠心肌细胞 12h ,测定培养液中乳酸脱氢酶 (LDH)的含量 ,采用MTT法测定心肌细胞存活率和线粒体内的琥珀酸脱氢酶 (SDH)含量。结果　大豆磷脂脂质体可使氧化损伤心肌细胞培养液中的LDH释放明显减少 (P <0 0 1) ,SDH含量明显升高 ,细胞死亡率也明显减少 (P <0 0 1)。结论　大豆磷脂脂质体对外源性羟自由基引起的心肌细胞损伤具有明显的保护作用。     

《生物化学》实验课教学刍议

生物化学是生命科学的基础,通过"生物化学"课程的学习使学生了解生物体的化学组成和生命活动过程中的很多化学变化,了解生物化学近年来的最新进展和最新成就.     

培土生金法对脾虚哮喘模型大鼠NF-κB表达的影响

目的观察培土生金法对脾虚哮喘模型大鼠TNF-α/NF-κB信号通路变化的影响,探讨培土生金法干预哮喘气道炎症和黏液高分泌的信号转导机制。方法健康雄性Wistar大鼠50只,随机分成5组:对照组、脾虚哮喘组、哮喘组、脾虚哮喘治疗组和哮喘治疗组,每组10只。采用ELISA试剂盒法测定血清和BALF中TNF-α的含量,采用免疫组化测定大鼠肺组织NF-κBp65的表达和入核率。结果脾虚哮喘组和哮喘组血清和BALF中TNF-α含量及大鼠支气管上皮细胞中NF-κBp65阳性表达均显著升高,和对照组比较差异显著(P<0.01);但是脾虚哮喘组和哮喘组比较,血清和BALF中TNF-α含量无显著性差异。与哮喘组比较,脾虚哮喘组大鼠支气管上皮细胞中NF-κBp65入核率显著增加(P<0.01)。和脾虚哮喘组比较,脾虚哮喘治疗组血清和BALF中TNF-α含量及肺组织NF-κBp65入核率显著降低(P<0.01);和哮喘组比较,哮喘治疗组血清和BALF中TNF-α含量及肺组织NF-κBp65入核率显著降低(P<0.01)。结论培土生金法能够降低脾虚哮喘和哮喘大鼠血清和BALF中TNF-α的含量和肺组织NF-κBp65入核率。     

大豆磷脂对四氯化碳致肝细胞损伤的保护作用

目的 观察大豆磷脂脂质体(SPL)的累积对四氯化碳导致肝细胞损伤的保护作用.方法 新生的小鼠肝细胞原代培养24 h后分为正常对照组、损伤组和SPL保护组.损伤组采用CC14作用于培养的小鼠肝细胞3 h:SPL保护组在加入损伤因素的同时分别加入不同浓度(0.2、0.4、0.8和1.6 mmol/mL)的SPL继续培养3 h.观察细胞生长情况.采用MTT法测定肝细胞的存活率;测定肝细胞培养液中乳酸脱氢酶(LDH)和谷丙转氨酶(ALT)的活力,以及肝细胞丙二醛(MDA)的含量和超氧化物歧化酶(SOD)的活力.结果 与正常对照组比较,损伤组肝细胞存活率明显降低(P＜0.01),培养液中LDH、ALT释放量明显增加(P＜0.01),肝细胞中SOD活力显著降低(P＜0.01),MDA含量显著升高(P＜0.01);SPL保护各组与损伤组相比,细胞存活率均明显升高(P＜0.01),培养液中LDH、ALT释放明显减少(P＜0.01),肝细胞中MDA含量显著降低(P＜0.01),SOD活力显著升高(P＜0.01),并均呈一定的剂量依赖关系.结论 大豆磷脂脂质体对四氯化碳致肝细胞损伤具有明显的保护作用.     

苦荞麦总黄酮对软脂酸诱导的脐静脉内皮细胞NOX4蛋白表达的影响

目的:观察苦荞麦总黄酮对软脂酸诱导的人脐静脉内皮(EA.hy926)细胞中还原型尼克酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸氧化酶4(NOX4)表达等指标的影响,探讨苦荞麦总黄酮在胰岛素抵抗(IR)信号传导通路中的作用机制。方法:将EA.hy926细胞株常规培养、传代,加入终浓度50 nmol·L~(-1)的胰岛素,分为空白组、模型组、苦荞麦总黄酮组(31.25,62.5,125 mg·L~(-1))和二甲双胍组,除空白组外,其他各组先用600μmol·L~(-1)软脂酸造IR模型,苦荞麦总黄酮组进一步加入125 mg·L~(-1)苦荞麦总黄酮,二甲双胍组加入2 mmol·L~(-1)二甲双胍。利用双抗体夹心法测定非对称性二甲基精氨酸(ADMA)含量,硝酸还原酶法测定NO含量,Western blot测定NOX4蛋白表达。结果:苦荞麦总黄酮中、高剂量组与模型组比较,ADMA含量明显减少,NO含量明显增加,均有显著性差异;苦荞麦总黄酮组高剂量组与模型组比较,NOX4蛋白表达量显著减少。结论:苦荞麦总黄酮可通过抑制软脂酸诱导下产生IR的EA.hy926细胞中NOX4和ADMA的合成来促进NO的合成,进而抑制IR的发生。     

眼针对脑缺血再灌注损伤模型大鼠脑皮层组织IKKβ表达的影响

目的:观察眼针对脑缺血再灌注损伤(CIRI)模型大鼠脑组织中IκB激酶β(IKKβ)表达,探讨眼针治疗脑损伤的作用机制。方法:健康雄性SPF级Wistar雄性大鼠60只,随机分为正常组、假手术组、模型组和眼针组。CIRI模型组和眼针组采用改良的线栓法建立大鼠大脑中动脉缺血(MACO)再灌注动物模型。RT-PCR及免疫组化方法检测大鼠缺血侧脑皮层IKKβ的mRNA和蛋白表达的变化。结果:与正常组及假手术组比较,模型组大鼠缺血侧脑皮层IKKβmRNA和蛋白水平均表达升高(P0.01),眼针组同模型组相比,IKKβmRNA和蛋白表达则下调(P0.01)。结论:眼针抑制脑皮层组织中IKKβ的表达,可能是眼针治疗CIRI的主要作用机制之一。     

六味地黄丸含药血清对Aβ诱导SH-SY5Y细胞的自噬影响及机制研究＊

目的 研究六味地黄丸含药血清对Aβ诱导SH-SY5Y细胞的自噬影响及其机制，探讨阿尔茨海默病的病理机制及补肾填精法的作用机制。方法 30只大鼠随机分成对照组和六味地黄丸组两组，分别予以等量的双蒸水和含六味地黄丸粉末水溶液进行灌胃，末次灌胃结束后取血并分离血清备用。将SH-SY5Y细胞分为对照组、模型组和药物组，对照组和模型组给予含空白血清的完全培养液，药物组给予含含药血清的完全培养液，模型组和药物组加入Aβ1-42寡聚体，培养48 h。应用CCK-8法对各组进行细胞增殖率分析；免疫荧光法分析各组细胞内Aβ沉积情况；Western Blot法检测各组细胞BACE1、p62、LC3-Ⅰ、LC3-Ⅱ、Beclin1蛋白表达情况。结果 CCK-8结果显示，与对照组相比，模型组细胞增殖率显著降低（P<0.01）；与模型组相比，药物组细胞增殖率显著增高（P<0.01）。与对照组相比，模型组细胞内Aβ的沉积显著增加（P<0.01）；与模型组相比，药物组细胞内的Aβ沉积显著减少（P<0.01）。Western Blot结果显示，与对照组相比，模型组细胞的BACE1、Beclin1的蛋白表达量和LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ的比值显著升高（P<0.01），p62的蛋白表达量显著降低（P<0.01）；与模型组相比，药物组细胞的Beclin1的蛋白表达量和LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ的比值显著升高（P<0.01），BACE1和p62的蛋白表达量显著降低（P<0.01）。结论 六味地黄丸含药血清可以增加Aβ诱导的SH-SY5Y细胞自噬相关基因的表达，上调自噬水平，减轻细胞损伤，对细胞具有明显的保护作用。     

补脾益气方药对脾虚哮喘大鼠肺组织IκB/NF-κB信号途径的影响

目的探讨脾虚型哮喘大鼠气道炎症,血液和支气管肺泡灌洗液（BALF）中嗜酸性粒细胞百分比,肺组织核因子-κB抑制蛋白α（IκBα）表达和核因子-κB（NF-κB）活性的变化及补脾益气方药对其的影响。方法将30只雄性Wistar大鼠随机分为3组：正常对照组（A组）、脾虚型哮喘组（B组）、补脾益气方药组（C组）,采用HE染色检测肺组织病理变化,采用免疫组织化学方法检测肺组织IκBα表达水平和NF-κB p65的活性变化。结果B组与A组比较,肺组织IκBα表达显著降低,而NF-κB p65的活性显著增高（P〈0.01）;C组与B组比较,肺组织IκBα表达显著增高,而NF-κB p65的活性显著降低（P〈0.01）。结论补脾益气方药能有效增加脾虚型哮喘大鼠肺组织IκBα的表达,抑制其肺组织NF-κBp65的活性,减轻哮喘时的气道炎症变化,从而对脾虚型哮喘起到治疗作用。     

中医药院校生物化学和分子生物学课程整合的设想和探索

生物化学是包括医学在内的所有生命科学的基础课程,特别在20世纪50年代Watson和Crick揭示了遗传信息携带者DNA的双螺旋结构,标志着生物化学发展进入分子生物学时期之后,更成为生命科学领域的带头学科。医药学、农学、生物学等各学科的研究都进入了分子水平,都要应用生物化学与分子生物学的理论和实验方法,例如：核酸杂交技术、分子克隆技术、生物芯片技术及蛋白质组技术等。随着近代医学的发展,