过氧化氢对PC12细胞PI3K、Akt表达的影响

目的探讨不同浓度过氧化氢(H202)对PC12细胞PI3K、Akt mRNA及蛋白表达的影响,为氧化损伤致PC12细胞凋亡提供实验依据。方法 PC12细胞贴壁后,换无血清DMEM培养液继续培养24 h,实验分为对照组、不同浓度H2O2组(100、150、200μmol·L-1)。24 h后,采用RT-PCR和Western Blot方法分别检测PI3K、Akt mRNA及蛋白的表达变化。结果与对照组相比,各浓度H2O2均可降低PI3K、Akt mRNA和蛋白的表达,且随着H2O2浓度增加,与对照组相比,PI3K、Akt mRNA表达逐渐降低(P<0.05);PI3K、Akt蛋白表达水平逐渐降低(P<0.05);且150μmol·L-1H2O2可显著降低PI3K、Akt mRNA及蛋白的表达(P<0.05)。结论 H2O2可剂量依赖性的降低PI3K、Akt mRNA和蛋白的表达,从而诱导PC12细胞的凋亡。     

浅谈如何提高留学生生物化学教学实践质量

近年来,大量的医学留学生来我国学习.做好留学生教育工作不仅能够丰富我国高等教育的教学模式,而且有利于经济建设,特别是有助于树立良好的大国形象,具有深远的政治意义[1].我校是国家第一批有条件接受外国留学生的高等中医药院校之一,生物化学与分子生物学教研室承担了留学生的生物化学全部理论及实验教学任务.我校留学生要花大量时间学习中医学、中药学等主干课程,因此部分学生对生物化学等西医课程重视程度相对不足.针对留学生这一特殊的学生群体,如何提高生物化学的教学质量,成为我们一直思考和探索的教改课题.现结合生物化学理论和实验教学实践谈谈提高留学生教学质量方面的一些体会.     

葛根芩连汤调控巨噬细胞极化趋势干预ApoE-/-小鼠动脉粥样硬化易损斑块机制

目的 探究葛根芩连汤调控巨噬细胞极化趋势干预ApoE^-/-小鼠动脉粥样硬化（AS）易损斑块的机制。方法 12只正常C57BL/6CNC小鼠作为空白组,60只同品系的ApoE^-/-小鼠随机分为5组,即模型组、葛根芩连汤低、中、高剂量组（GQL-D、Z、G组,剂量3.12、6.24、12.48 g·kg·d^-1）、阿托伐他汀组（西药组）,以高脂饲料喂养造模。空白组、模型组予等体积无菌蒸馏水灌胃;GQL-D、Z、G组、西药组分别予对应浓度的药物灌胃8周。生化法检测总胆固醇（TC）、甘油三酯（TG）、高密度脂蛋白胆固醇（HDL-C）、低密度脂蛋白胆固醇（LDL-C）水平,大体油红O染色、苏木素-伊红（HE）染色观测主动脉区域斑块分布情况,酶联免疫吸附测定法（ELISA）检测血清中M1型促炎性因子肿瘤坏死因子-α（TNF-α）、白细胞介素-6（IL-6）水平和M2型抗炎性因子白细胞介素-13（IL-13）、转化生长因子-β（TGF-β）水平,免疫荧光双标检测巨噬细胞甘露糖受体（MMR/CD206）/精氨酸酶-1（Arg-1）、CD206/诱导型一氧化氮合酶（iNOS）蛋白表达水平,实时荧光定量聚合酶链式反应（Real-time PCR）检测主动脉Arg-1和iNOS mRNA表达水平。结果 与模型组相比,GQL-Z组、GQL-G注和西药组的TG、TC、LDL-C水平明显降低（P<0.05）,HDL-C水平明显升高（P<0.05）;随着葛根芩连汤浓度的增加,斑块富集区域逐渐缩小,颜色随之变浅,以GQL-G组和西药组染色区域分布最散;给药各组的Arg-1蛋白表达水平明显升高（P<0.05）,CD206蛋白表达水平明显升高（P<0.05）,iNOS蛋白表达水平明显降低（P<0.05）,Arg-1 mRNA表达水平明显升高（P<0.05）,iNOS mRNA表达水平明显降低（P<0.05）。结论 葛根芩连汤对AS易损斑块的干预作用可能与其改善脂质代谢,抑制巨噬细胞M1极化,促进巨噬细胞M2极化,进而改善巨噬细胞炎症微环境有关。     

六味地黄丸对阿尔茨海默病模型小鼠行为及TLR4/NF-κB信号转导途径的影响

目的探究六味地黄丸对β-淀粉样蛋白前体/早老素蛋白1(amyloid β-precursor protein/presenilin-1, APP/PS1)双转基因小鼠行为及Toll样受体4/核因子κB(Toll-like receptor 4/nuclear factor kappa-B, TLR4/NF-κB)信号转导途径的影响。方法 3月龄雌性APP/PS1小鼠40只, 按照随机数字表法分为模型组、六味地黄丸低剂量组(0.59 g/kg, 2次/d, 灌胃)、中剂量组(1.18 g/kg, 2次/d, 灌胃)、高剂量组(2.36 g/kg, 2次/d, 灌胃)和布洛芬组(0.04 g/kg, 2次/d, 灌胃), 每组8只;8只体质量相匹配的3月龄野生型C57BL/6小鼠作为对照组;对照组和模型组小鼠给予等体积0.9%氯化钠溶液灌胃(2次/d);所有小鼠连续干预3个月。采用Morris水迷宫实验检测小鼠的学习记忆能力, 采用ELISA法检测小鼠血清肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α, TNF-α)、白介素-1β(interleukin-1β, IL-1...     

基于ITS序列的植物类中药材鉴定研究及展望

ITS是核糖体DNA上的内转录间隔区,其序列分析已成为在分子水平上探讨科、亚科、族内关系十分有效的手段,在种内,ITS序列对于揭示异域分布或间断分布居群间的关系具有很大潜力,该片段特别适合于属、种级的系统发育和分类研究。以ITS序列为DNA条形码鉴别的标准片段,已经在植物类中药材的DNA分子鉴别中广泛应用而且必将前景广阔。     

《生物化学》实验教学改革的思考

为了进一步提高生物化学实验课的教学质量,教研室在实验教学中大胆改革,建立严格的实验成绩评定制度,取得了较好的效果,对此进行分析总结.     

补脾益气方药对哮喘大鼠嗜酸性粒细胞趋化因子表达的影响

目的观察补脾益气方药对哮喘大鼠肺组织嗜酸性粒细胞趋化因子(eotaxin)表达的干预作用。方法SPF级雄性SD大鼠随机分为对照组(A组)、哮喘组(B组)、生理盐水治疗组(C组)、地塞米松组(D组)和补脾益气方药治疗组(E组)。哮喘组通过卵蛋白(OVA)致敏、激发建立大鼠哮喘模型,以生理盐水和地塞米松分别做对照治疗。E组大鼠在复制哮喘模型后,按照1 mL/100 g体质量给予补脾方药1次/d,共14 d。计数肺泡灌洗液细胞总数、嗜酸性粒细胞(EOS)、巨噬细胞、淋巴细胞和中性粒细胞数;光镜下观察肺组织病理学改变;采用RT-PCR和Western bloting检测肺组织eotaxin的表达。结果与A组比较,B、C组肺泡灌洗液EOS计数、eotaxin的mRNA和蛋白表达均增加(P<0.01),D、E组较B组降低(P<0.01),D、E组间无差异(P>0.05)。结论补脾益气方药可能通过降低哮喘大鼠体内eotaxin水平,减轻炎症细胞在肺组织局部浸润,抑制气道炎症。     

四君子丸对SAMP8小鼠海马CA3区神经元Lon蛋白表达的影响

目的：研究SAMP8小鼠海马Lon蛋白及线粒体动力学相关蛋白表达变化,为健脾益气法治疗阿尔茨海默病提供理论依据。方法：3月龄SAMR1小鼠8只作为正常组,3月龄SAPM8小鼠32只分为模型组、多奈哌齐组(0.013 g·kg^-1)、四君子丸低、高剂量组(3.24、12.56 g·kg^-1),每组8只,多奈哌齐组灌胃多奈哌齐,四君子丸低、高剂量组灌胃四君子丸溶液,灌胃30 d;第25天开始水迷宫定位航行实验,第30天开始水迷宫空间探索实验;第30天取材后,免疫组化检测线粒体融合蛋白2(MFN2)蛋白表达变化,酶联免疫吸附测定法(ELISA)检测腺苷酸活化蛋白激酶(AMPK)表达,比色法检测三磷酸腺苷(ATP)含量,电镜检测神经元线粒体微观结构变化,蛋白免疫印迹法(Western blot)检测β淀粉样蛋白(Aβ)、Lon蛋白、线粒体动力相关蛋白1(DRP1)蛋白、MFN1蛋白表达变化。结果：与正常组比较,模型组小鼠逃避潜伏期时间增加、穿越次数减少、AMPK表达上调,ATP含量降低,Aβ蛋白表达升高(P<0.01),DRP1蛋白表达显著升高...     

四神丸对小鼠结肠炎性病变后诱发结肠癌化学预防作用研究

目的：观察四神丸对小鼠结肠炎性病变后诱发结肠癌化学预防作用。方法：40只ICR小鼠,随机分为正常对照组、模型组、四神丸口服给药组和四神丸灌肠给药组4组。以40mg/g 1,2-二甲肼（DMH）腹腔注射、20g/L右旋葡聚糖苷钠（DSS）饮用水诱导小鼠结肠炎性病变后诱发结肠癌模型。口服和灌肠四神丸组分别给予0.2mL四神丸浸膏剂（生药浓度2g/mL）,共21周后,观察小鼠脾脏、胸腺、结肠质量,结肠组织病理变化和四神丸对小鼠结肠炎性病变后诱发结肠癌发生率的影响。结果 ：与模型组相比,四神丸可以明显改善小鼠DMH＋DSS诱癌过程中胸腺等组织的改变和恶病质状态,同时四神丸明显抑制小鼠结肠炎性病变后诱发结肠癌,并降低成癌率。但口服和灌肠两种给药方式对结果没有影响。结论：四神丸能抑制小鼠结肠炎性病变后诱发结肠癌。