以小鼠子宫增重实验考察四物汤植物雌激素样作用的配伍规律宰

目的 用正交设计原理,通过研究不同配伍比例的四物汤(熟地、当归、白芍、川芎)对幼鼠子宫增重和血清雌激素水平的影响,探讨四物汤的植物雌激素样作用.方法 将正常性未成熟雌性ICR小鼠,随机分为9个正交实验组,每组12只,分别灌胃按L9(34)正交实验设计配制的9个生药质量浓度为1 g·mL-1的四物汤药液,每天1次,连续7天,第8天眼眶取血,分离血清,用EUSA试剂盒检测血清E2、P、FSH水平,分离子宫并称重,计算子宫系数.结果 熟地等四味药物对幼鼠子宫系数影响顺序为B>D>C>A,子宫系数增加较大的组合为A3B2C1D2,川芎对幼鼠子宫系数影响有统计学意义;四味药物对幼鼠血清E2水平的影响顺序为D>A>B>C,血清E2水平较高的组合为A3B3C3D2四味药物对血清E2水平的影响均无统计学意义;四味药物对血清P的影响顺序为A>C>D>B,血清P水平较高的组合为A1B2C2D2,熟地对血清P的影响有统计学意义;四味药物对血清FSH水平影响顺序为D>A>C>B,血清FSH水平较高的组合为A3B2C2D2,川芎对血清FSH水平影响有统计学意义.结论 不同配伍比例的四物汤,植物雌激素活性有显著差异,临床应根据患者的具体情况,综合考虑用药.     

莪术油对肺腺癌A549细胞周期及组织蛋白酶K表达的影响

目的 :探讨莪术油对A549细胞增殖抑制作用及组织蛋白酶K表达的影响。 方法 : MTT法观察莪术油对A549细胞增殖的抑制作用;流式细胞术检测细胞周期阻滞;Western blot检测组织蛋白酶K的表达情况。 结果: 莪术油作用后①MTT法结果显示莪术油在60 mg ·L^-1~200 mg ·L^-1对A549细胞增殖有抑制作用, IC50随作用时间的延长显著前移。②流式细胞术结果出现凋亡峰,与未处理组细胞相比,给药组细胞G0/G1期细胞比例增加,S期细胞比例降低。③Western blot结果显示,莪术油处理细胞24 h后,组织蛋白酶K表达明显上调,100 mg ·L^-1达最大值。 结论 : 莪术油能抑制肺腺癌A549细胞增殖,阻滞细胞周期的作用,其机制可能与上调组织蛋白酶K表达水平有关。     

二仙汤含药血清对顺铂干预的大鼠卵巢颗粒细胞凋亡调控蛋白bcl-2、bax表达的影响

目的:观察二仙汤含药血清对顺铂干预的大鼠卵巢颗粒细胞凋亡调控蛋白bcl-2、bax表达的影响,从细胞凋亡的角度探讨二仙汤含药血清对卵巢颗粒细胞凋亡的作用机制。方法:22~24 d的SD雌性大鼠30只,随机分为3组,分别为生理盐水组,补佳乐组,二仙汤组。每组大鼠10只。给药4 d后处死大鼠,心脏取血,制备药物血清。22~24 d的SD大鼠卵巢颗粒细胞,经培养贴壁后,用顺铂损伤大鼠原代卵巢颗粒细胞。经各组药理血清作用后,应用放免法,进行雌激素和孕激素水平测定及分析。应用免疫组化法,测定各分组bcl-2、bax蛋白的表达情况,并进行图像分析。结果:放免结果显示,与正常组相比,模型组和补佳乐组E2表达明显改变,有统计学意义(P0.05)。与模型组相比,补佳乐组、二仙汤组E2表达均有增加;与正常组相比,模型组P表达水平有所变化,有统计学意义(P0.05)。与模型组相比,二仙汤组P表达略高于补佳乐组,但低于正常组。免疫组化结果显示,在卵巢颗粒细胞细胞质上可见bcl-2和bax蛋白表达的棕黄色颗粒。和正常组相比较,顺铂干预后各组bcl-2表达均减弱,而以模型组最明显,有统计学意义(P0.05);和模型组比较,各药物组均可见bcl-2阳性表达增加,但弱于正常组,有统计学意义(P0.05)。bax与bcl-2表达强度结果相反,和正常组比较,顺铂干预后的各组bax均表达增强,模型组呈现极强表达现象,有统计学意义(P0.05);和模型组比较,各药物组均可见阳性表达减弱,但表达高于正常组,有统计学意义(P0.05)。结论:二仙汤能降低经顺铂干预后大鼠bax蛋白在卵泡颗粒细胞表达,增强bcl-2蛋白的表达,二仙汤能够通过调节凋亡蛋白bcl-2、bax蛋白的表达,抑制卵巢颗粒细胞发生凋亡,从而保护卵巢功能。     

雌激素受体介导效应在骨骼肌保护作用中机制的研究

雌激素是一种类固醇激素,在机体内具有广泛的功能和作用,除了调控女性生殖器官的功能外,还能够靶向其他表达雌激素受体的器官和组织,包括心血管、骨、骨骼肌等。随着女性年龄的增长,雌激素缺乏会导致骨骼肌质量的下降,严重影响老年人的健康及生活。近年来,雌激素对骨骼肌的保护作用逐渐受到重视,现阶段研究表明雌激素受体（estrogen receptor,ER）与骨骼肌无力等病变关系密切,ER可介导PI3K/AKT信号通路等多种途径发挥保护骨骼肌的作用,有效防治骨骼肌退行性病变。     

牛建昭教授治疗青春期子宫内膜异位症经验

牛建昭教授从事妇科临床、教学、科研近50年,擅长治疗各种妇科疑难杂症,其经验丰富且独到,尤其在治疗子宫内膜异位症方面亦颇有建树。子宫内膜异位症是由于各种病理因素导致有活性的内膜组织(包括腺体和间质),不仅生长在宫腔而且还附着在子宫内膜以外的其他部位,这些异常生长的内膜组织会引起女性经期痛经,严重者可引发不孕。中医学认为子宫内膜异位症的基本病机是"瘀阻胞宫冲任",牛建昭教授在辨证论治、四诊合参的基础上,结合患者临床症状,认为青春期子宫内膜异位症的核心病机为"肾虚瘀结",在治疗时注重"西医辨病,中医分型,中西结合,个性化治疗"的诊治思路,根据月经周期遣方用药,强调审因论治,注重情志调节。此外,对青春期女性确立了调经促卵、理气止痛、温补肾阳的治疗原则。根据患者个体差异随症加减,临床疗效显著。     

增加中期细胞数的染色体标本制备方法研究

目的：探索增加中期细胞数的小鼠骨髓染色体标本制备方法。方法小鼠随机分成2组：对照组与酵母液处理组,每组均采用剪碎股骨法与冲洗股骨法收集骨髓细胞,常规方法制备骨髓染色体标本。结果与对照组比较,酵母液处理组中期细胞数显著增加（P〈0.05）;与冲洗股骨法比较,剪碎股骨法收集的中期细胞数显著增加（P〈0.05）。结论在染色体标本制备过程中,采用酵母液处理和剪碎股骨法,可有效增加小鼠中期细胞数。     

雌激素、雌激素受体与心血管疾病

雌激素是一种参与机体多个器官系统功能调节的重要的固醇类激素.其水平的下降与女性绝经后心血管疾病发病率的增高存在着密切的关系.雌激素或雌激素样物质可以通过经典的雌激素受体(ER)α、ERβ或膜G蛋白偶联受体(GPR) 30等介导的基因和非基因传导通路发挥心血管系统的调节功能;靶细胞受体亚型的特异性分布和状况是影响雌激素或雌激素样物质最终效应的主要因素.同时,雌激素对心血管系统作用机制的阐明对激素替代治疗(HRT)或植物雌激素的临床应用将具有重要指导意义.     

中药治疗绝经后骨质疏松症及其作用机制的研究进展

绝经后骨质疏松症(postmenopausal osteoporosis,PMOP)是一种全身性骨代谢疾病,好发于绝经后女性,体内雌激素水平下降是其主要病因,故而补充雌激素是最直接、有效的方法,然而长期服用雌激素将会带来诸如增加妇科肿瘤发病风险等副作用。近年来,从植物中提取的活性成分——植物雌激素引起了人们的广泛关注,其与天然雌激素拥有相似的结构,所以同样能够作用于雌激素在骨组织上的靶点——雌激素受体。临床实践证实,多种中药对PMOP疗效显著,其作用机制也随着研究的深入而逐渐被揭示,无论是提高雌激素水平,还是增加雌激素受体的表达,抑或通过雌激素调节骨代谢相关因子,中药都有着卓越表现,因而对其的进一步研究显得尤为重要。     

基于G蛋白偶联雌激素受体介导的EGFR/PI3K途径探讨四物汤对 MC3 T3-E1细胞增殖的影响

目的探讨四物汤通过G蛋白偶联雌激素受体(GPER)介导的表皮生长因子受体(EGFR)/磷脂酰肌醇3-激酶(PI3K)途径影响小鼠胚胎成骨细胞(MC3T3-E1)的增殖效应及其分子机制。方法将40只SD雌性大鼠随机分为5组:正常组,雌二醇组,四物汤高、中、低剂量组,每组8只。以雌二醇药物血清为阳性对照,用高、中、低剂量四物汤药物血清干预MC3T3-E1细胞,以MTT细胞增殖实验检测各药物血清干预24 h对MC3T3-E1细胞增殖的影响;Western blot及免疫荧光技术检测高剂量四物汤对MC3T3-E1细胞EGFR、PI3K、cyclin B1、cyclin D1蛋白表达情况的影响;并应用GPER激动剂G1、拮抗剂G15,EGFR抑制剂AG1478,PI3K抑制剂LY294002进一步检测高剂量四物汤影响MC3T3-E1细胞增殖的作用途径和分子机制。结果与正常血清组比较,高、中、低剂量四物汤药物血清均能促进MC3T3-E1细胞的增殖(P0.01),加入G1可使高剂量四物汤促增殖作用提高(P0.01),而加入G15、AG1478、LY294002使高剂量四物汤的促增殖作用减弱(P0.01)。Western blot和免疫荧光结果均显示,四物汤药物血清增加MC3T3-E1细胞EGFR、PI3K、cyclin B1、cyclin D1的蛋白表达,与正常血清组比较差异有统计学意义(P0.01),G1同时干预时上述蛋白表达量较高剂量四物汤增加(P0.01),分别加入G15、AG1478、LY294002后上述蛋白的表达量较高剂量四物汤组降低(P0.01或P0.05)。结论四物汤对小鼠MC3T3-E1细胞增殖有明显的促进作用,其作用机制可能为GPER介导的EGFR/PI3K信号通路的传导。