微流控芯片电泳在快速分离尿蛋白中的临床应用价值

目的:探讨并建立微流控芯片的电泳分离方法,用于快速分离尿蛋白。方法:利用照相平饭湿蚀刻法在5cm×5cm×0.1cm石英玻片上,刻制管道宽度为70μm、深度约40μm的十字形电泳泳道,以500V为进样电压、2000~2500V为分离电压、pH10.5的75mmol/L硼酸缓冲液为电泳液分离尿蛋白。结果:在2~3min完成电泳,纯牛白蛋白、人运铁蛋白、人IgG均可得到单一分离峰,其混合样品亦可得到较好分离。在38例尿蛋白阳性患者中,用该法检测发现溢出性蛋白尿3例、选择性蛋白尿9例、非选择性蛋白尿26例,8例健康对照未检出蛋白峰。结论:本法具有快速、简便、检测成本低的特点,依据电荷和分子量的不同,可将蛋白尿初步分为溢出性蛋白尿、选择性蛋白尿、非选择性蛋白尿,有利于临床的诊断和预后判断,有较好的应用前景。     

微流控芯片电泳在快速分离尿蛋白中的临床应用价值

目的　探讨并建立微流控芯片的电泳分离方法 ,用于快速分离尿蛋白。方法　利用照相平板湿蚀刻法在 5cm× 5cm× 0 1cm石英玻片上 ,刻制管道宽度为 70 μm、深度约 4 0 μm的十字形电泳泳道 ,以 5 0 0V为进样电压、2 0 0 0～ 2 5 0 0V为分离电压、pH 10 5的 75mmol/L硼酸缓冲液为电泳液分离尿蛋白。结果　在 2～ 3min完成电泳 ,纯牛白蛋白、人运铁蛋白、人IgG均可得到单一分离峰 ,其混合样品亦可得到较好分离。在 38例尿蛋白阳性患者中 ,用该法检测发现溢出性蛋白尿 3例、选择性蛋白尿 9例、非选择性蛋白尿 2 6例 ,8例健康对照未检出蛋白峰。结论　本法具有快速、简便、检测成本低的特点 ,依据电荷和分子量的不同 ,可将蛋白尿初步分为溢出性蛋白尿、选择性蛋白尿、非选择性蛋白尿 ,有利于临床的诊断和预后判断 ,有较好的应用前景。     

控制微流控芯片电泳中的蛋白质吸附

目的探讨抑制微流控芯片电泳中蛋白质的吸附,以提高芯片电泳蛋白质的分离效率及重现性。方法以蛋白质标准品、临床尿液标本为实验对象,通过提高缓冲液的pH值、在缓冲液中加入适当的添加剂等方法,进行芯片蛋白电泳,并与常规琼脂糖电泳结果进行比较。结果使用pH值10.5硼酸缓冲液,转铁蛋白连续进样出峰时间的变异系数(CV)为5.22%;在pH值10.5硼酸缓冲液中加入1%的乙胺,能提高芯片电泳检测尿液蛋白的分离度、重现性,电泳结果与REP全自动电泳仪结果一致。结论使用该方法可有效地抑制芯片泳道壁对蛋白质的吸附,分离效率大为提高。