经VEGF165转染的成纤维细胞-脱细胞异种真皮替代物的构建及其对创面愈合作用的实验研究

目的:构建经血管内皮生长因子(VEGF)165转染的成纤维细胞-脱细胞异种真皮替代物,观察其在促进大鼠深度创面愈合过程中的作用.方法:采用分子生物学方法将扩增的VEGF165基因克隆入真核表达载体pcDNA31(+),在脂质体介导下将重组质粒转染至经传代培养的鼠成纤维细胞(NIH/3T3),再将转染后的NIH/3T3接种于猪脱细胞真皮表面得到成纤维细胞-脱细胞异种真皮替代物;而后将此替代物与自体薄皮片移植于SD大鼠深度创面(实验组),对动物创面愈合情况进行观察.单纯脱细胞异种真皮替代物移植大鼠作为对照组.结果:构建的真核表达载体pcDNA31(+)-VEGF165可成功转染至鼠成纤维细胞,移植后实验组皮片成活率(9376±340)%,对照组皮片成活率(8501±174)%,两者差异有显著性(t=8873,P＜001).组织学观察显示,移植第4周实验组毛细血管数量明显多于对照组.结论:成功构建了经VEGF165转染的成纤维细胞-脱细胞异种真皮替代物,且其具有明显的促进动物创面愈合作用.     

腹部穿透伤保守治疗30例分析

目的 探讨腹部穿透伤保守治疗指征,总结辅助检查在治疗过程中的价值.方法 回顾性分析同一治疗小组于2006年8月至2010年10月保守治疗30例腹部穿透伤的临床资料.结果 保守治疗成功25例,中转手术5例.所有保守治疗成功病人于入院24～72 h出院.结论 保守治疗应成为腹部穿透伤治疗的手段之一,严格掌握指征、动态观察是...     

辅助皮瓣法关闭下腹部供瓣区的临床应用体会

目的：总结直接关闭下腹部供瓣区的方法和体会。方法：25例病人手或前臂有软组织缺损创面，采用下腹部皮瓣转移的方法进行修复，同时设计邻接的辅助皮瓣参与下腹部皮瓣的关闭。结果：下腹部皮瓣和辅助皮瓣的供区直接缝合关闭，早期有不同程度的肚脐偏位，后期逐渐恢复。结论：辅助皮瓣法能较好地关闭一定面积的下腹部皮瓣供区，具有良好的整形美容效果。     

超声刀在腹腔镜逆行胆囊切除术中的应用

目的:探讨超声刀在腹腔镜逆行胆囊切除术中的应用价值.方法:38例胆囊急性炎症、胆囊充满结石并萎缩、Calot三角严重粘连等患者腹腔镜下行超声刀逆行胆囊切除术.结果:手术时间35～135 min,平均60 min.术中出血5～40mL.无中转开腹,无肝外胆管损伤.结论:腹腔镜下应用超声刀逆行胆囊切除术能够提高手术治疗的安全性,降低胆管损伤的发生率,扩大了腹腔镜胆囊切除术的手术适应证.     

小儿先天性心脏病的外科治疗

1997年2月～2007年2月，我科共完成小儿先天性心脏病手术286例，现总结其外科治疗经验。     

Mirizzi综合征的腹腔镜手术治疗分析

Mirizzi综合征(Mirizzi Syndrome,MS)术前诊断困难,解剖变异较多,术中容易损伤胆管,是肝胆外科治疗中较为棘手的问题之一,曾被视为腹腔镜胆囊切除术的禁忌证[1].近几年来,随着腹腔镜技术的日益成熟及术者经验的累积,我院逐步开展了腹腔镜手术治疗MS,并取得了一定效果,现将本院1998年9月至2007年6月2685例LC术中确诊的28例Mirizzi综合征的病例资料总结、整理如下.     

腹腔镜胆囊切除术后下肢深静脉血栓11例分析

目的探讨腹腔镜胆囊切除术后下肢深静脉血栓形成的危险因素以及防治方法.方法分析11例腹腔镜胆囊切除术术后下肢深静脉血栓形成的临床资料.结果11例患者经过溶栓、抗凝、祛聚及对症支持等治疗,均在7～10d后症状消失,彩色多普勒示血栓消失,随访3～12个月无复发.结论腹腔镜胆囊切除术后下肢静脉血栓的发生与患者高危因素、CO2气腹、体位等因素密切相关,在围手术期应积极采取措施加以预防,中西医结合治疗具有独特优势,疗效满意.     

过表达缺氧诱导因子1α影响前列腺癌血管生成的体内研究

目的:观察转染缺氧诱导因子1α(HIF-1α)在体内环境下对人前列腺癌血管形成的影响,并探讨其分子机制。方法:对构建的转染HIF-1α人前列腺癌LNCaP细胞(LNCaP/HIF-1α)复苏后培养,ELISA法检测转染前后培养液上清PSA水平;流式细胞术检测细胞周期;将转染前后的LNCaP细胞建立免疫裸鼠皮下肿瘤模型,观察肿瘤生长情况;收集肿瘤标本后针对肿瘤血管生成相关蛋白血管内皮生长因子(VEGF),诱导型一氧化氮合酶(iN-OS),促血管生成素2(Ang-2)行免疫组化染色。结果:与LNCaP细胞相比,转染HIF-1α的人前列腺癌LNCaP细胞培养液PSA水平明显降低(t=8.243,P<0.05);流式细胞术显示其更具有增殖活性。体内实验显示皮下肿瘤成瘤率提高,成瘤时间提前。LNCaP/HIF-1α免疫组化研究显示VEGF、iNOS、Ang-2表达较LNCaP组增强。结论:在体内环境下,HIF-1α过表达能够诱导人前列腺癌LNCaP细胞血管形成相关蛋白VEGF、iNOS表达上调,提高肿瘤血管形成能力。并通过诱导肿瘤血管形成来增强肿瘤的侵袭转移能力;体内外实验显示HIF-1α可能对人前列腺癌LNCaP细胞Ang-2表达不产生影响,而在体内环境下Ang-2表达受其他因素调控。     

缝匠肌骨瓣移植及固定治疗青壮年股骨颈骨折

目的：为了防止青壮年股骨颈骨折后发生骨不愈合、颈吸收及股骨头缺血性坏死。方法：采用带缝匠肌蒂髂骨瓣移植及多枚骨圆针内固定治疗青壮年股骨颈骨折17例。结果：经过2－5年的随访,疗效评定：优12例,良3例,优良率88．2％,骨愈合17例,愈合率100％。愈合时间为3－12月,平均5个月,1例发生股骨头缺血性坏死,股骨头坏死率5．9％。结论：本术式能为骨折端提供充足血供,内固定可靠,能明显提高股骨颈骨折的治愈率,减少股骨头缺血性坏死的发生,是治疗青壮年股骨颈骨折的好方法。     

野生型P53基因诱导人胃腺癌MGC—803细胞凋亡的实验研究

目的 观察野生型P53基因诱导人胃腺癌MGC－803细胞凋亡的现象,探讨野生型P53基因导入抑制细胞增殖的机制。方法 构建含目的基因P53腺病毒载体（AdCMV P53),转染P53基因表达缺失的人胃腺癌细胞MGC－803。应用流式细胞仪分析细胞周期和细胞凋亡率,琼脂糖凝胶电泳图谱及脱氧核苷酸末端转移酶介导的缺口末端标记（TUNEL）技术检测细胞凋亡。结果 腺病毒介导的P53基因转染人胃腺癌细胞MGC－803后,流式细胞仪显示75．7％细胞生长停滞在G0／G1期,20．8％的细胞发生凋亡;琼脂糖凝胶电泳可观察到呈阶梯DNA区带图谱（DNA ladder);AdCMV P53转染组可见细胞凋亡,细胞核内有特异性的蓝黑色团块。结论 野生型P53基因通过诱导MGC－803细胞凋亡抑制细胞增殖。