ROCKI/II在转化生长因子β1诱导的主动脉平滑肌细胞表型转化中的作用

目的：探讨ROCKI/II在转化生长因子β1（TGF-β1）诱导的人主动脉平滑肌细胞（HA-VSMC）表型转化中的作用。 方法：将HA-VSMC分别转染ROCKI和ROCKII的siRNA后荧光显微镜观察转染情况,并用Western blot方法检测不同处理的HA-VSMC（ROCKI siRNA转染、ROCKII siRNA转染、+TGF-β1、ROCKI siRNA转染+TGF-β1、ROCKII siRNA转染+TGF-β1）中ROCKI和ROCKII蛋白的表达;分别用Western blot和RT-PCR方法检测不同处理的HA-VSMC（+TGF-β1、ROCKI siRNA转染+TGF-β1、ROCKII siRNA转染+TGF-β1、ROCK非特异性抑制剂Y-27632预处理+TGF-β1）中细胞收缩表型标志物α-平滑肌肌动蛋白（α-SMA）、平滑肌22α（SM22α）与合成表型标志物骨桥蛋白（OPN）的蛋白与mRNA表达,均以无处理的HA-VSMC为空白对照。 结果：免疫荧光观察与Western blot检测表明两种siRNA均成功转染;TGF-β1处理后,HA-VSMC中ROCKI蛋白表达明显升高（P<0.05）,但ROCKII蛋白表达无明显变化（P>0.05）,ROCKI siRNA转染后TGF-β1上调ROCKI的作用被明显抑制（P<0.05）。与空白对照组HA-VSMC比较,TGF-β1处理后的HA-VSMC中α-SMA、SM22α的蛋白和mRNA表达明显降低,而OPN蛋白与mRNA表达明显升高（均P<0.05）,ROCKI siRNA转染或Y-27632预处理后,TGF-β1的上述作用均明显减弱（均P<0.05）,ROCKII siRNA转染对TGF-β1的上述作用均无明显影响（均P>0.05）。 结论：TGF-β1可诱导HA-VSMC由收缩表型向合成型表型转化,ROCKI表达的升高可能在这一转化中起主要作用。     

“三步法”治疗老年单纯性胸腰椎骨折的临床观察

目的：观察“三步法”治疗老年单纯性胸腰椎骨折的临床疗效。方法：选取我科2017年1月～2020年1月收治的老年单纯性胸腰椎骨折患者60例,随机分配至A、B组,各为30例。另30例为湖南省中医院经皮椎体后凸成形术(PKP)患者,为C组,A组予以“三步法”治疗,B组予以经皮椎体成形术。记录各组术前、术后Oswestry disability index(ODI)、视觉模拟评分(VAS)、椎体Cobb角,术后骨水泥渗漏数。结果：治疗前,A组与B组,A组与C组的ODI、VAS、椎体Cobb角无显著性差异(P>0.05);治疗后,A组与B组的ODI、VAS、椎体Cobb角、中医疗效比较有显著性差异(P<0.05),且A组优于B组。A组与C组的ODI、VAS、椎体Cobb角、中医疗效比较无显著性差异(P>0.05)。结论：“三步法”治疗老年性胸腰椎骨折能有效缓解患者疼痛,纠正脊柱后凸畸形。     

应用正交设计优化天马颗粒剂配方的实验研究

目的优化天马颗粒剂的最佳配方。方法天马颗粒剂的17味药物按L20(217)正交表分为20组,并通过对20组大鼠灌胃获取含药血清。用5%、10%、20%含药血清分别对人大肠癌细胞HCT8、HCT116、HT29、COLO320、SW480、SW620干预24、48、72 h,CCK-8法检测细胞的吸光度,比较各组含药血清对细胞的增殖抑制率。结果经直接分析和方差分析,原方中蜈蚣、全蝎、半边莲、黄柏、三棱、大黄、胆南星、海藻、黄芪、山药均在大肠癌细胞的增殖抑制中发挥主要作用(均P0.05,P0.01),而其它药物则无明显作用(均P0.05)。结论根据正交设计优选天马颗粒剂的最佳配方为:蜈蚣、全蝎、半边莲、黄柏、三棱、大黄、胆南星、海藻、黄芪、山药。     

基于转录组数据识别代谢综合征与结直肠癌的共同基因特征和分子机制

目的：识别代谢综合征（metabolic syndrome,MetS）与结直肠癌（colorectal cancer,CRC）共同的基因特征和生物学通路,并筛选与MetS相关的CRC预后生物标志物。方法：对MetS、CRC和相应的对照样本进行差异分析,以识别表达差异的基因作为与疾病相关的基因。根据这些基因的表达特征进行功能富集分析,以识别受调控的生物学功能。利用单因素Cox回归鉴定与CRC预后相关的MetS基因,并使用LASSO和多因素Cox回归分析构建CRC的预后预测模型。基于汇总数据的孟德尔随机化分析（Summary-data-based Mendelian Randomization,SMR）进一步确认MetS基因与CRC预后的因果关系。结果：325个基因在MetS和CRC中表达上调,281个基因表达下调。研究还发现,Apelin信号和胞吐等通路在2种疾病中被抑制,而核酸修复通路则被激活。其中,有60个与MetS和CRC共享的基因与CRC的预后相关。18个基因被用于构建预测模型,在TCGA数据库的CRC队列中,模型在1～5年的曲线下面积（area under the curve,...     

胃肠道间质瘤外科诊治分析

目的 总结胃肠道间质瘤的诊断及治疗经验.方法 对2006年10月至2011年10月我院14例手术治疗的胃肠道间质瘤临床资料进行回顾性分析.结果 本组14例手术均获得成功,9例行胃楔形切除术,1例行近端胃切除术,2例行远端胃切除术,2例行十二指肠局部切除.全部随访6～36个月,1例于术后第11个月局部复发,再次手术后无瘤生存.1例于术后23个月局部复发并腹腔转移伴腹腔内出血、失血性休克.再次手术后带瘤生存.1例于术后24个月肝脏转移.结论 胃肠道间质瘤需要多学科综合治疗,完整的肿瘤手术切除是治疗的关键.规范化的外科治疗可改善病人生存质量,联合甲磺酸伊马替尼(格列卫)可获得更好疗效.     

闭合复位联合双头空心加压螺钉治疗股骨颈骨折70例

股骨颈骨折是骨科常见疾病之一,多见于老年患者,因伤后常卧床不起,较易发生肺炎、褥疮和深静脉栓塞等合并症,死亡率高于一般骨折,并容易发生骨折不愈合、股骨头缺血性坏死等不良后果。对于如何有效、及时、小创伤、少后遗症地治疗此类骨折仍然是个棘手问题。我院从2000年8月至2006年8月收住院的70例股骨颈骨折患者,以闭合复位联合双头空心加压螺钉治疗,收到良好效果,现做回顾性分析,并浅析影响此类骨折预后的相关因素,报道如下。     

大成汤结合穴位贴敷治疗单纯性胸腰椎骨折便秘（气滞血瘀型）的临床观察

目的：探讨大成汤口服结合自制“黄香散”穴位贴敷对单纯性胸腰椎骨折便秘（气滞血瘀型）的疗效及其安全性。方法：将我科自2009年至2012年收治单纯胸腰椎骨折便秘患者60侧,随机分配至治疗组及对照组,各30例,治疗组予以大成汤口服,结合穴位贴敷“黄香散”;对照组予以酚酞片口服。观察两组疗效、中医证候评分、治疗后首次大便时间,并观察其安全性。结果：治疗组两组疗效、中医证候评分、治疗后首次大便时间明显好于对照组（P〈0．05）。未见明显不良反应。结论：大成汤结合穴位贴敷“黄香散”治疗单纯性胸腰椎骨折便秘（气滞血瘀型）疗效明显,无不良反应。     

天马颗粒通过FLI-1/Klotho通路对结肠癌细胞HCT116增殖抑制的作用机制研究

目的 研究天马颗粒通过FLI-1/Klotho途径对结肠癌细胞（HCT116）增殖抑制的作用机制。方法 将HCT116细胞分为blank组、shRNA组、shTMKL组、TMKL组。blank组为空白对照,shRNA组为HCT116细胞瞬时转染FLI-1 shRNA,shTMKL组为shRNA组基础上加入天马颗粒血清干预,TMKL组为天马颗粒血清干预HCT116细胞。各组细胞培育24 h后,进行后续实验检测。q PCR检测各组细胞FLI-1 mRNA和Klotho mRNA表达;Western blot法检测各组细胞FLI-1蛋白和Klotho蛋白相对表达;流式细胞术检测各组细胞周期及凋亡,并计算S期细胞比值（S-phase fraction, SPF);CCK-8法检测各组细胞增殖。结果 与blank组相比,shRNA组、shTMKL组FLI-1、Klotho蛋白及mRNA表达量降低（P<0.05）,TMKL组FLI-1、Klotho蛋白及mRNA表达量升高（P<0.05）;与shRNA组相比,shTMKL组FLI-1、Klotho蛋白及mRNA表达量差异无统计学意义（P...     

健脾补肾法对人结直肠癌裸鼠VEGF-C、VEGFR-3、E-cadherin、Vimentin表达的影响

目的：探讨健脾补肾法对人结直肠癌裸鼠血管内皮生长因子C(VEGF-C)、血管内皮生长因子受体3(VEGFR-3)、E黏钙蛋白（E-cadherin）、波形纤维蛋白（Vimentin）的影响。方法：16只裸鼠接种人结直肠癌细胞株HCT116构建结直肠癌移植瘤模型，随机分为对照组和实验组，对照组给予生理盐水灌胃，实验组给予健脾补肾中药复方灌胃，两组均隔天给药1次，持续14 d。给药结束后，脱颈处死后剥离瘤体，免疫组化检测肿瘤组织中VEGF-C、VEGFR-3、E-cadherin、Vimentin的表达。结果：16只结直肠癌移植瘤模型裸鼠均构建成功，免疫组化结果显示：与对照组比较，实验组移植瘤组织中VEGFC、VEGFR-3、Vimentin的表达均明显下调（P <0.05）,E-cadherin的表达明显上调（P <0.05）。结论：健脾补肾法能下调人结直肠癌裸鼠中促进肿瘤淋巴管生成和转移的VEGF-C、VEGFR-3表达及上皮-间质转化标志物Vimentin表达，同时上调E-cadherin表达，有抑制肿瘤细胞转移的作用。     

天马颗粒对结肠直癌细胞中FLI-1启动子甲基化影响

目的 研究天马颗粒对结直肠癌细胞中Friend白血病整合素1转录因子（Friend leukemia integration 1, FLI-1）启动子甲基化的作用机制。方法 以结直肠癌细胞HCT116、HT29、Caco-2为研究对象,每种细胞分为3组：Blank组、NC组、TMKL组。Blank组为空白对照,NC组予以空白血清干预,TMKL组予以天马颗粒血清干预。采用CCK8筛选天马颗粒血清最佳干预浓度,Western blot检测各组细胞中FLI-1蛋白表达,qPCR法检测各组细胞FLI-1 mRNA表达,ELISA法检测DNA甲基转移酶1(DNA methyltransferase 1, DNMT1)、DNA甲基转移酶3a(DNA methyltransferase 3a, DNMT3a)蛋白表达,甲基化特异性PCR(methylation-Specific PCR, MSP)检测各组细胞中FLI-1启动子甲基化。结果 天马颗粒血清对HCT116、HT29和Caco-2细胞增殖有抑制作用,其中20%的天马颗粒血清浓度抑制效果最佳。在HCT116细胞分组和Caco-2细胞分组中,同...