上调miR-449a表达对肝癌细胞生长和侵袭能力的影响

目的:探讨miR-449a在肝癌(HCC)细胞中的表达及其对HCC细胞生物学行为的影响。方法:用qRT-PCR检测miR-449a在正常肝细胞L02和4种HCC细胞株(HepG2、Hep3B、SMMC-7721和Bel-7402)的表达。用脂质体法将miR-449a模拟物或阴性对照序列转染HCC细胞后,分别用CCK-8法、流式细胞术、Transwell小室实验检测细胞增殖、细胞周期、侵袭能力的变化,并观察以上两种不同转染的HCC细胞在裸鼠体内的成瘤情况。结果:miR-449a在4种HCC细胞株的表达水平均明显低于L02细胞(均P0.05),其中在Bel-7402细胞表达的水平最低。与转染阴性对照序列的Bel-7402细胞比较,转染miR-449a模拟物的Bel-7402细胞增殖活性明显降低、G_1/S期阻滞明显增加、穿室细胞数明显减少(均P0.05);与转染阴性对照序列的Bel-7402细胞比较,转染miR-449a模拟物的Bel-7402细胞在裸鼠体内成瘤后的移植瘤质量与体积均明显减小(0.748 g vs.1.234 g;33.667 mm~3 vs.1 400.500 mm~3,均P0.05)。结论:HCC细胞中miR-449a表达降低,上调miR-449a表达可以抑制HCC细胞在体内外的生长。     

pDR2/TK基因经大鼠肝血管途径导入后的研究

目的探讨pDR2/TK基因经肝血管导入的方法。方法84只大鼠随机分为动脉TK、动脉TK+更昔洛韦(GCV)、动脉对照、门静脉TK、门静脉TK+GCV、门静脉对照及空白对照等7组。经肝左叶动脉或门静脉注射pDR2/TK基因或TE缓冲液,术后腹腔注射GCV或生理盐水(NS)。用免疫组织化学及苏木素-伊红(HE)染色的方法检测基因的表达及杀伤效应。结果(1)动脉TK组及动脉TK+GCV组肝左叶表达阳性率(4.86±2.13)%及(4.34±1.43)%显著高于右叶(2.04±0.91)%及(2.31±0.78)%(P＜0.01),经门静脉TK组肝左叶(3.27±1.46)%亦明显高于右叶(1.96±0.84)%(P＜0.05),但门静脉TK+GCV组左右叶间差异无显著性(3.17±1.56)%及(2.46±1.10)%(P＞0.05);左叶表达阳性率经动脉途径明显高于经门静脉途径(P＜0.05及P＜0.01)。(2)肝左叶肝细胞坏死程度在动脉TK+GCV组高于门静脉TK+GCV组。结论pDR2/TK基因经肝左前叶动脉注射后在该肝叶内的表达效率、表达的靶向性及杀伤效应强度高于经肝左叶门静脉注射途径。     

早期空肠内营养防治大鼠重症急性胰腺炎肠源性感染的实验研究

为探讨早期肠内营养 (EEN)和完全肠外营养 (TPN)对重症急性胰腺炎 (SAP)大鼠急性期胰腺组织及系统感染的影响 ,以及早期EEN对SAP的治疗作用。笔者将雄性SD大鼠随机分为EEN组、TPN组及假手术 (S)组 ,成模后分别行TPN过渡至EEN和TPN及正常喂养。检测 2周后实验动物死亡率 ,胰腺病理学和腹水细菌学 ,门静脉血内毒素 (ET) ,体静脉血淀粉酶、白介素 -6(IL -6)及C -反应蛋白 (CRP)的水平。结果示 :( 1)EEN和TPN组间动物死亡率、血清淀粉酶水平差异无显著性 ( P >0 .0 5 ) ,胰腺病理改变类型及程度相似 ;( 2 )EEN组血清CRP及IL 6水平显著低于TPN组 (P <0 .0 5 ) ,门静脉ET水平及腹水细菌阳性率亦显著低于TPN组 ( P <0 .0 1,P <0 .0 5 )。提示早期EEN可有效减少SAP大鼠腹腔感染发生率 ,并且不会加重SAP的病理改变     

降钙素原和C-反应蛋白预测和鉴别大鼠急性胰腺炎并感染的研究

目的 探讨血浆降钙素原（PCT）及C-反应蛋白（CRP）对早期预测急性胰腺炎并感染的价值。方法 80只SD大鼠随机分为（1）急性胰腺炎并感染组（I组，n=20）；（2）急性胰腺炎对照组（C组，n=40），根据成模后腹腔有感染再分为C1和C2组；（3）假手术对照组（S组，n=20），采集成模前（0h）及成模后12，24h及48h时点血液和48h时点胰腺及肝脏组织，用ELISA法检测血浆CRP的浓度，Western Blot检测血浆和肝脏PCT水平结果 ⑴ B组大鼠腹腔均发生感染，C1组中16例腹腔发生感染，C2组20例未发生感染。⑵ B组和C1组血浆CRP水平呈持续上升趋势，在成模后48h 均显著高于C2组。⑶ B组和C1组血浆及肝脏组织内于成模后48h均能检到较高水平的PCT，且明显高于C2组及S组。结论 PCT对急性胰腺炎早期感染具有一定的预测作用；联合血浆CRP检测有助于鉴别胰腺炎是否合并感染。肝脏组织可能是PCT的一个重要合成部位。     

早期肠内营养对重症急性胰腺炎大鼠炎性反应的影响

目的　研究早期肠内营养 (EEN )和完全肠外营养 (TPN)对重症急性胰腺炎 (SAP)大鼠急性期炎性反应的影响 ,探讨早期 EEN对 SAP的治疗作用。方法　 6 0只 1 80～ 2 2 0 g雄性 SD大鼠随机分为 EEN组、TPN组及假手术 (S)组 ,成模后分别行 TPN过渡至 EEN、TPN及正常喂养。检测 2周后实验动物死亡率、胰腺病理学和血清淀粉酶、CRP、IL - 1β、IL - 6及TNF-α的水平。结果　 1 . EEN和 TPN组间动物死亡率、血清淀粉酶水平差异无显著性 (p>0 .0 5 ) ,胰腺病理改变类型及程度相似 ;2 . EEN组血清 CRP及 IL - 6水平显著低于 TPN组 (p<0 .0 5 ) ,而两组间 TNF-α及 IL - 1β水平差异无显著性 (p >0 .0 5 )。结论　早期 EEN并不会加重 SAP大鼠急性期胰腺组织和系统的炎性反应 ,并可有效减少感染的发生或降低感染性炎性反应程度     

延迟性脾破裂23例诊治分析

目的 探讨延迟性脾破裂的诊治方法.方法 对我院10年间收治的23例延迟性脾破裂的诊断与治疗进行回顾性分析.结果 23例延迟性脾破裂患者均进行了手术治疗,22例痊愈出院,1例死亡.结论 重视病史追问及重复B超检查,结合腹腔穿刺及CT检查是减少误诊的主要措施.及时手术是治疗的关键,贻误手术时机是死亡的主要原因.     

C-反应蛋白及白细胞介素6早期预测急性胰腺炎合并感染的实验研究

目的研究C-反应蛋白(CRP)及白细胞介素6(IL-6)对急性胰腺炎并感染的诊断价值。方法60只SD大鼠随机分为急性胰腺炎组(AP组,n=40)及假手术组(S组,n=20),分别检测成模前(0h)及成模后12,24及48h时血浆CRP及IL-6水平和48h时腹水细菌培养。结果(1)AP组存活36例,均制模成功。16例发生腹水感染(AP1组),而20例未见腹水感染(AP2组)。(2)AP1及AP2组血浆CRP及IL-6水平在成模后均显著高于S组(P均<0.01)。AP1与AP2组比较,仅CRP在48h时有显著升高(P<0.01)。(3)AP1组在成模后IL-6及CRP逐渐上升,各时点均存在显著的差异(P均<0.05);而AP2组IL-6及CRP仅在成模后24h内显著升高(P均<0.05),而术后48h和24h时差异并无显著性(P>0.05)。结论血浆CRP对急性胰腺炎早期发生感染诊断具预测价值,而IL-6则对急性胰腺炎并继发的细菌感染并不敏感。     

血浆一氧化氮对大鼠肝缺血预处理的影响

目的：探讨促进或抑制一氧化氮（NO）的合成对大鼠肝脏缺血预处理（IPC）保护作用的影响。方法：大鼠肝脏经缺血再灌注（I／R，R组）、IPC（P组）、左旋精氨酸（L－Arg，A组）促进或左旋单甲基精氨酸（L－NMMA，N组）抑制NO合成及假手术（C组）后，观察2、24h及1周后血浆NO、天冬氨酸氨基转移酶（AST）及丙氨酸氨基转移酶（ALT）以及大鼠死亡率及肝脏组织病理改变。结果：A组累计死亡率低于R组及N组（P＜0．05）。A组NO水平在2h后明显高于P组（P＜0．01）；N组在2h及24h后均低于P组（P＜0．05）及A组（P＜0．01），1周后与P组、A组及R组差异无显著性（P＞0．01），但明显高于C组。A组及P组的血浆ALT在2h及24h后均显著低于N组（P＜0．05），而N组与R组差异无显著性（P＞0．05），1周后，A组、P组及N组间差异无显著性，均低于R组（P＜0．05）。结论：增加NO的产生，可以明显增强IPC对肝脏的保护作用，抑制NO合成并不能完全阻断这种保护作用，提示NO是IPC保护机制中的一个重要但非唯一的因素。     

早期空肠内营养法降低重症急性胰腺炎大鼠死亡率和机制研究

目的：研究早期肠内营养疗法（EEN）和完全肠外营养疗法（TPN）对重症急性胰腺炎（SAP）大鼠急性期炎性反应程度及细胞免疫功能的影响，探讨SAP治疗过程中EEN对机体免疫的调节作用。方法:80只180-220 g雄性SD大鼠随机分为EEN组、TPN组及假手术（S）和重症胰腺炎（SAP）组，各20只，成模后分别行TPN过渡至EEN、TPN、正常喂养和正常喂养。检测术后2周时血清淀粉酶（Amy）、CRP、IL-6、TNF-α水平及外周血CD4+、CD8+淋巴细胞计数。结果:(1)术后2周S组大鼠无死亡, EEN组大鼠生存率为75%, TPN组生存率为70%, SAP组生存率为0。EEN和TPN组血清Amy差异无显著（P>0.05）。（2）术后2周EEN组和TPN组血淀粉酶、TNF-α、IL-6、CRP均明显高于S组（P<0.05, P<0.01）。（3）术后2周EEN组和TPN组CD4+、CD8+均明显高于S组，但CD4+/CD8+比值明显高于S组（P<0.05, P<0.01）。EEN组CD4+和CD4+/CD8+比值明显高于TPN组（P<0.01）。结论：EEN疗法可显著降低SAP大鼠死亡率，这可能与该疗法能有效地减轻病鼠急性期炎症反应和增强机体免疫力有关。