EGCG抑制IL-6诱导肿瘤血管生成的作用及机制

目的：探讨表没食子儿茶素没食子酸酯（EGCG）抑制IL-6诱导胃癌血管生成的作用及机制。
方法：以50 ng/mL IL-6或不同浓度EGCG培养AGS胃癌细胞株,Western blot免疫印迹法检测胃癌细胞血管内皮生长因子（VEGF）的表达;Elisa法检测肿瘤细胞培养液中VEGF的蛋白水平;RT-PCR检测胃癌细胞VEGF mRNA表达;制备胃癌细胞条件培养液培养血管内皮细胞,采用MTT法检测血管内皮细胞的体外增殖;小管形成实验检测血管内皮细胞体外小管形成;基质胶（matrigel）塞实验检测体内血管形成。
结果：IL-6诱导胃癌细胞VEGF蛋白表达增加2.4倍,VEGF蛋白分泌增加2.8倍,而VEGF mRNA表达增加3.1倍;EGCG呈剂量依赖性地抑制IL-6诱导的胃癌细胞VEGF蛋白的表达、分泌和VEGF mRNA表达。VEGF中和抗体及EGCG在体外可以显著抑制IL-6诱导的血管内皮细胞增殖（t=3.02,P＜0.01;t=2.56,P＜0.05）和小管形成（t=3.38,P＜0.01;t=3.61,P＜0.01）以及在体内的血管生成（t=2.66,P＜0.05;t=3.77,P＜0.01）。
结论：EGCG通过下调胃癌细胞VEGF的表达,而抑制IL-6诱导的肿瘤血管生成。

     

pDR2/TK基因经肝动脉注射后杀伤效应的研究

目的 探讨ｐＤＲ２／ＴＫ基因经大鼠肝左叶动脉注射后的靶向性表达及杀伤效应。方法 将４８只大鼠随机分为４组,分别给予ｐＤＲ２／ＴＫ基因、更革洛韦（ｇａｎｃｉｃｏｖｉｒ,ＧｃＶ）、ｐＤＲ２／ＴＫ基因／生理盐水（ＮＳ）、缓冲液（ＴＥ）／ＧＣＶ及ＴＥ／ＧＣＶ。肝组织用原位杂交、免疫组织化学ＡＢＣ法及苏木素－伊红（ＨＥ）染色的方法检测基因转录、表达及杀伤效应。结果 ｐＤＲ２／ＴＫ基因在肝左叶有转录。单独注射     

RNA干扰对肝癌细胞CDC20表达的影响

目的 观察RNA干扰(RNAi)对肝癌细胞株Hepal-6中CDC20表达的抑制作用.方法 设计针对小鼠肝癌细胞Hepal-6 CDC20 mRNA的小干扰RNA(siRNA),以阳离子脂质体包埋后转染鼠肝癌细胞Hepal-6,转染48 h后,采用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)和Western blot方法 检测Hepal-6细胞CDC20 mRNA及蛋白质表达的变化.结果 siRNA各组与正常对照组和阴性对照组比较,CDC20 mRNA的表达均受明显抑制,并呈剂量依赖性(在100、50、25 nmol/L浓度下,Mixed siRNA组与正常对照组mRNA表达比较:0.370±0.058比0.840±0.044,0.480±0.081比0.900±0.068,0.830±0.062比1.010±0.054,各组P＜0.01);CDC20蛋白质的表达亦均受抑制(siRNA-1、siRNA-2、siRNA-3及Mixed组与N-Cont或Blank组蛋白质表达比较:0.482±0.035/0.402±0.003/0.479±0.026/0.446±0.017比0.826±0.03l或0.835±0.024,各组P均＜0.01).结论 CDC20 siRNA可显著抑制小鼠肝癌细胞Hepal-6中CDC20 mRNA和蛋白质的表达.     

腹腔镜胆总管探查术一期缝合与T管引流的疗效比较

目的 比较腹腔镜胆总管探查术（LCBDE）胆总管一期缝合与T管引流治疗胆囊结石合并胆总管结石的临床疗效,探讨LCBDE一期缝合胆总管的可行性。方法 回顾性分析2015年1月至2017年5月深圳市第二人民医院108例接受LCBDE的患者临床资料,按胆总管缝合的方式不同将其分为一期缝合组45例和T管引流组63例,比较两组的胆总管直径、胆总管结石数目、结石最大直径、手术时间、术后肛门排气时间、腹腔引流管放置时间、术后并发症发生率、术后住院时间和住院总费用。术后随访1～6个月,彩超或磁共振胰胆管成像检查评估胆总管结石残余和狭窄情况。结果 两组患者在胆总管直径、胆总管结石数目、结石最大直径、腹腔引流管放置时间和术后并发症发生率（8.89%比11.11%）的差异均无统计学意义（P>0.05）。一期缝合组患者的手术时间、术后肛门排气时间、术后住院时间和住院总费用均小于T管引流组,差异具有统计学意义（P<0.05）。两组患者在随访期间均未发现胆总管残余结石、胆总管狭窄。结论 LCBDE胆总管一期缝合可缩短手术时间、术后住院时间,加快术后康复,节省住院费用,不增加手术并发症的发生率。     

大鼠肝缺血预处理过程中诱导型一氧化氮合酶的转录及表达

目的 :研究大鼠肝脏缺血预处理 (IP)过程中肝脏诱导型一氧化氮合酶 (NOS2 )转录及表达的改变 ,以探讨大鼠肝脏IP过程中NO合成通路的作用及意义。方法 :131只SD大鼠随机分为缺血再灌注 (I/R)组 (5 2只 )、IP组 (4 1只 )及假手术 (S)组 (38只 ) ,术后 2h ,2 4h及 1周时检测血浆NO浓度及肝组织NOS2的转录及表达。结果 :①血浆NO浓度 :IP组在术后 2h ,2 4h ,1周时均升高 ,均显著高于S组 (P <0 .0 5 ,P <0 .0 1,P <0 .0 1) ,于 2h及2 4h时均显著高于I/R组 (均P <0 .0 1) ;I/R组在 2h时显著低于S组 (P <0 .0 5 ) ,2 4h与S组无统计学差异 (P >0 .0 5 ) ,1周时显著高于S组 (P <0 .0 5 )。②肝脏NOS2的转录 :IP组在 2h及 2 4h时较I/R组显著增强 (均P <0 .0 5 ) ,1周后差异无显著性 (P >0 .0 5 )。③肝脏NOS2的表达 :在 2h及 2 4h时IP组均显著高于I/R组及S组 (均P<0 .0 5 ) ,I/R组与S组之间差异不显著 (P >0 .0 5 ) ;1周时 ,IP组及I/R组呈弱阳性表达 ,两组间差异不显著 (P >0 .0 5 ) ;S组NOS2显色呈阴性。结论 :大鼠肝脏IP过程中NOS2的转录及表达增强 ,其高转录与表达时相的提前可能与IP的早期保护效应有关。     

肝癌组织中Survivin蛋白、PCNA的表达及其与预后的关系

目的:探讨人肝癌组织中Survivin蛋白及增殖细胞核抗原(PCNA)的表达及其与预后的关系。方法:应用免疫组织化学染色对46例原发性肝癌组织中Survivin蛋白与PCNA的表达情况进行检测,并结合临床预后进行分析。结果:46例肝癌组织中Survivin蛋白表达阳性率为67.4%;Survivin蛋白表达阳性者肝癌细胞增殖指数显著高于表达阴性者;Survivin蛋白表达阴性患者与表达阳性患者比较,1年生存率差异无显著性意义,但2年生存率前者显著高于后者。结论:Survivin蛋白对促进肝癌细胞快速增殖具有重要作用,Survivin蛋白的表达可以作为预后不良的重要指标。     

低分子量肝素治疗重症急性胰腺炎的机制研究

目的:探讨LMWH治疗重症急性胰腺炎的机理。方法:建立假手术组(S组)、重症急性胰腺炎组(SAP组)和LMWH治疗组(H组),比较各组死亡率、血清淀粉酶、IL-6、ET和NO水平。结果:H组死亡率、血清淀粉酶、IL-6和ET明显低于SAP组(P<0.001)。H组NO明显高于SAP组(P<0.001)。结论:LMWH可能通过降低内皮素水平,提高NO水平,从而改善胰腺血循环,减少炎症介质的释放,减轻SAP的炎症程度。     

胆囊结石性胰腺炎早期和延期腹腔镜胆囊切除术的疗效分析

目的通过比较胆囊结石性胰腺炎(GSP)病人早期和延期施行腹腔镜胆囊切除术(LC)的临床疗效,探讨其最佳手术时机。方法回顾性分析2007年1月至2016年12月期间我科收治185例GSP病人的资料,按施行LC时间不同将其分为早期组(病情稳定72内手术)98例和延期组(GSP治愈后4~6周手术)87例,比较两组的总住院时间、手术时间、中转开腹率和手术并发症的发生率,以及延期组待手术期间发病情况。结果早期组总的住院时间明显小于延期组,差异具有统计学意义;两组在手术时间、中转开腹率和手术并发症发生率上均无显著性差异;延期组在待手术期间发生胆绞痛8例,急性胆囊炎5例,GSP复发8例,发生率随时间延长逐渐上升。结论采取早期LC治疗GSP,在病情稳定后72h内实施手术是安全、可行的,能显著缩短住院时间,不增加手术时间、中转开腹率和手术并发症的发生率,具有临床推广意义。     

人甲胎蛋白增强子驱动自杀基因靶向杀伤肝癌细胞的实验研究

目的 探讨人AFP增强子驱动的单纯疱疹病毒胸苷激酶(HSV-TK)/丙氧鸟苷自杀基因系统体内外靶向杀伤肝癌细胞的效应.方法 构建人AFP增强子驱动的pAFP-cDNA3.1-TK自杀基因真核表达质粒;利用脂质体将质粒转染入AFP阳性肝癌细胞株HcpG2和AFP阴性肝癌细胞株SMMC7721;采用RT-PCR和Western blot检测TK mRNA和蛋白表达;MTT检测细胞的存活率;观察丙氧鸟苷对肝癌细胞体外增殖、生长曲线和细胞凋亡的作用,以及丙氧鸟苷体内抑制肿瘤生长的效应.采用t检验分析相关数据.结果 成功构建pAFP-cDNA3.1-TK自杀基因真核表达质粒并转染入肝癌细胞;AFP阳性肝癌细胞株HepG2中能检测到TKmRNA和蛋白表达;丙氧鸟苷呈剂量和时间依赖性抑制转染后肝癌细胞株HepG2的生长并诱导其凋亡;AFP阴性肝癌细胞株SMMC7721中没有TKmRNA和蛋白表达,细胞增殖、生长曲线和凋亡均不受影响,两者比较,差异有统计学意义(t=2.58,2.73,3.12,P＜0.05).丙氧鸟苷可以特异性地抑制转染后肝癌细胞株HepG2治疗组中肿瘤的生长,肿瘤抑制率为46%,而在转染后肝癌细胞株SMMC7721治疗组中,对肿瘤生长无明显抑制作用,两者比较,差异有统计学意义(t=3.36,P＜0.05).结论 人AFP增强子驱动的HSV-TK/丙氧鸟苷自杀基因系统可以靶向杀伤AFP阳性肝癌细胞,抑制肿瘤生长.     

胰管结石19例的外科治疗

【目的】探讨胰管结石外科治疗方法。【方法】回顾性分析本院1984-2006年收治的19例胰管结石患者的临床资料。根据其病因和合并症的情况、胰管结石的分布以及胰管狭窄部位和程度采取不同的手术方式。【结果】19例中胰腺癌者8例,慢性胰腺炎者8例,不明原因者3例。临床表现为腹痛或上腹不适者15例,糖尿病者15例,消瘦者10例,脂肪泻者8例。全组患者胰管结石均经手术治愈。术后无残余结石,15例腹痛或腹部不适者均获不同程度的缓解,10消瘦者体重有所增加;4／15例糖尿病及5／8脂肪泻有所缓解。术后4例患者出现胰漏。并发胰腺癌者术后存活时间6～22个月。【结论】胰管结石一经确诊后应争取早日手术治疗,根据合并疾病的不同、胰管结石分布以及胰管狭窄情况具体选择。原则上应解除胰管狭窄,取尽胰管结石,建立通畅引流。