双份脐血造血干细胞移植的现状

异基因造血干细胞移植是治疗血液系统恶性及非恶性疾病的一种有效的根治方法。与骨髓和外周血干细胞移植相比,脐血干细胞移植以其来源丰富,取材方便,术后移植物抗宿主病发生率较低及程度较轻等优势而获得了越来越广泛的运用。但因单份脐血中所含有的有核细胞数较少等问题限制了脐血移植的适用范围。为此,人们尝试采用双份脐血造血干细胞移植。本文就其近年来的发展现状作一综述。     

周期性张应力对成纤维细胞凋亡的影响及其调控机制

背景:在体内条件下,细胞力学的功能研究因其所处生理环境的复杂性、实验条件的不易控制而很难得到满意结果.目的:探讨周期性张应力对成纤维细胞凋亡的作用及影响机制.方法:采用多通道细胞牵张应力加载系统,以成纤维细胞为对象构建细胞体外培养-力学刺激模型.加力组成纤维细胞分别给予周期性张应力刺激6,12,24 h,力值定为12%surface elongation,频率为6 cycles/min,每一循环包括3 s stretch/3 s relaxation,并设立正常对照组.采用Hoechst33258染色检测细胞凋亡情况,以流式细胞仪分析细胞周期,应用酶标仪测定半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3的活性.结果与结论:正常对照组细胞核为弥散均匀的圆形或椭圆形荧光,加力组细胞核或细胞质内可见致密浓染的颗粒、新月体或环状荧光.与正常对照组比较,加力组细胞周期显著延长(P＜0.01);与加力6 h组比较,加力12,24 h组细胞周期均显著缩短(P＜0.01),而加力24 h组细胞周期略长于加力12 h组.与正常对照组比较,加力组细胞半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3活性均显著升高(P＜0.01);加力12 h组细胞半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3活性显著高于加力6 h组(P＜0.01).表明周期性张应力可以诱导成纤维细胞凋亡,在12 h内加力时间越长,早期凋亡越明显,且能够改变其细胞周期,半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3参与了此过程.     

张应力刺激大鼠髁突软骨细胞Ⅱ型胶原和聚集蛋白聚糖的表达*

背景：研究表明软骨细胞外基质合成的变化反映了外力对于颞下颌关节的影响和机体对于外力的适应性。 目的：观察周期性张应力对髁突软骨细胞主要细胞外基质合成的影响。 方法：采用FX-5000T应力加载系统对第3代大鼠髁突软骨细胞分别施加0,1,6,12和24 h的周期性张应力,应力刺激强度为10% 1 Hz。加力完成后收集加力细胞,提取总RNA反转录成cDNA,应用RT-PCR技术检测软骨细胞主要细胞外基质Ⅱ型胶原和聚集蛋白聚糖的表达变化情况。 结果与结论：与对照组(0 h组)相比,加力   6 h时Ⅱ型胶原和聚集蛋白聚糖表达均显著增加(P < 0.05);加力12 h时Ⅱ型胶原和聚集蛋白聚糖表达均开始下降;当加力至24 h时二者表达量均显著降低(P < 0.05)。结果表明：周期性张应力可以影响髁突软骨细胞主要细胞外基质的合成,随加力时间的延长基质合成逐渐增强;进一步延长加力时间,基质的合成受到明显抑制。      

山奈酚延缓自发性肥胖2型糖尿病小鼠肾损伤研究

目的观察山奈酚(KPF)干预自发肥胖2型糖尿病小鼠(db/db鼠)早期糖尿病肾病,并探讨相关机制。方法 24只健康雄性10周龄db/db鼠随机分为四组:不同剂量KPF给药组(50、200mg/kg)、db/db对照组和二甲双胍(0.2g/kg)阳性对照组,并设db/m对照组。连续灌胃给药10周,检测小鼠血清肌酐(SCr)、白细胞介素-6(IL-6)和肿瘤坏死因子-α(TNF-α),24小时尿白蛋白排泄率(UAER);留取肾组织,作病理形态学检查、实时定量PCR检测肾组织TNF-α、IL-6的m RNA表达、Western blot检测磷酸化核因子κB p65(p-NF-κBp65)、磷酸化核因子κB抑制蛋白α(p-IκBα)、核因子κB抑制蛋白α激酶(IKKα)蛋白的表达水平。结果不同剂量KPF干预10周,都能使db/db小鼠24小时UAER、SCr、IL-6、TNF-α水平下降,肾组织IL-6、TNF-α基因表达水平明显降低(P0.01、0.05),p-NF-κBp65、IKKα和p-IκBα蛋白表达水平下降(P0.01)。结论 KPF可通过抑制核因子κB(NF-κB)介导的炎症反应,对自发2型糖尿病小鼠早期的肾脏损害起到保护作用。     

减低预处理强度的异基因造血干细胞移植治疗恶性血液病疗效观察

本研究探讨减低预处理强度的异基因造血干细胞移植治疗恶性血液病的疗效和并发症。对10例血液系统恶性肿瘤患者进行减低预处理强度的亲缘异基因造血干细胞移植,其中6例CML患者,2例AML患者,1例ALL患者,1例淋巴瘤患者。供者皆为HLA全相合或部分相合同胞,预处理基本方案采用“FLU＋CY＋TBI”方案并结合患者实际病情适当加以改良,采用“CsA＋MMF”方案预防GVHD,移植术后通过骨髓细胞学、染色体、融合基因、ABO血型和STR—PCR方法等监测移植物植入情况以及移植效果,观察移植术后原发病复发、GVHD、移植并发症发生等情况,评估患者生活质量等,结果表明：10例患者全部移植成功,移植物顺利植入,原发病获得治愈。1例患者术后并发肺部严重感染,1例患者出现CMV血症,无其他明显并发症发生。10例患者中出现1例Ⅳ度aGVHD,2例Ⅰ度aGVHD,其余患者无明显GVHD发生。5例患者在移植术后不同时间点出现原发病复发,予以DLI或药物挽救治疗后重回CR状态。随访5月-35月余,10例患者中死亡2例,活存8例,总体生存率为80％,存活患者获得了高质量的生活。结论：减低预处理强度的造血干细胞移植对受者损伤小,移植效果可靠,术后GVHD、移植相关并发症少,患者术后生活质量高,移植后原发病复发患者仍可通过DLI以重新获得完全缓解。     

机械瓣膜置换术后的随访研究

目的：总结心脏瓣膜病机械瓣膜置换术后疗效,旨在评价心脏瓣膜置换手术的效果及手术后的中长期效果。方法选择本院2000年-2012年我院确诊的心脏瓣膜病患者300例,观察本组患者心脏瓣膜病机械瓣膜置换术后的临床疗效,术后并发症的原因以及发病例数。结果患者的手术之后心功能随访显示,患者心功能与血液动力学出现了很大的改善,并且,大部分患者的劳动能力得到了很大的改善,生活的质量出现了明显的提高。结论我院心脏瓣膜病机械瓣膜置换手术预后整体效果较好,手术的死亡率是可以接受的,和国内的比较并无明显的差别,大部分的患者在手术之后的心功能和生活的质量得到了明显的改善。     

茜草HPLC-DAD指纹图谱的研究

目的:建立茜草药材HPLC-DAD指纹图谱,提供茜草药材的质量控制方法。方法:采用高效液相色谱法;色谱柱为YMC C18柱(250 mm×4.6 mm,5μm),检测波长280 nm;流动相为乙腈-0.2%磷酸水溶液,梯度洗脱;流速为1.0 mL/min,柱温为25℃。分析时间为60 min。结果:6批茜草药材指纹图谱的平均相似度大于94%。结论:所建立的方法适用于不同产地茜草药材指纹图谱的测定。     

HPLC法检测槟榔卤水中的麻黄碱

目的　建立高效液相色谱法检测槟榔卤水中麻黄碱的方法。　方法　用Waters高效液相色谱 ,紫外检测器 ,Nova -pakC18色谱柱 ( 3 .9mm× 15 0mm) ,以甲醇 +0 .0 5mol/L磷酸二氢钾 (三乙胺调 pH为 5 .5 ) =98+2为流动相 ,流速 1.0ml/min ,波长 2 10nm ,柱温 45℃。　结果　本方法能快速准确地检出麻黄碱。　结论　本方法分离度好 ,快速简便 ,灵敏度高 ,定量准确 ,能满足卫生监督的需要。     

与重症低龄儿童龋病相关的唾液微生物群落研究

目的通过高通量测序技术研究重症低龄儿童龋病和健康者唾液的菌群结构及其差异。方法 在青岛市崂山区儿童中,经口腔检查选取健康（H组）和重症低龄龋病（C组）儿童各24名,采取唾液样本,提取其DNA进行聚合酶链式反应扩增,利用454测序平台对16S rRNA V1—V3区进行双端测序,对细菌群落结构及多样性进行差异分析。结果 C组唾液菌群物种丰度高于H组（P<0.05）,两组唾液菌群结构的差异有统计学意义（P<0.01）,且C组的群落结构更为相似和保守（P<0.001）;鉴别出C组高表达的可疑致龋微生物（P<0.1）及H组高表达的健康相关微生物（P<0.1）;基于唾液菌属图谱建立的龋病风险评估模型区分健康和龋病者的准确率可高达70%以上。结论 唾液菌群和特定细菌种类,如比例升高的Prevotella菌属有助于评估和筛选低龄儿童龋病风险。