刺五加内生放线菌株13-85抗菌活性研究及菌种鉴定

目的研究刺五加内生放线菌株13-85抑菌活性及活性稳定性,检测菌株活性物质合成相关功能基因,对菌株进行鉴定。方法采用平板纸片法测定菌株抑菌活性及发酵液稳定性;PCR扩增其活性物质合成相关功能基因片段(PKS I、PKS II、NRPS、Halo、CYP),克隆并测序分析。通过菌株表型特征及分子特征对其鉴定。结果菌株13-85发酵液具有广谱较强的抗病原菌活性,抑菌活性较为稳定;菌株基因组含有PKS II、NRPS基因。经比对,PKS II片段与已知Streptomyces fradiae PKS序列(登录号AFO70128.1)相似度为89%,NRPS片段与Streptomyces virginiae NRPS序列(登录号WP_033225509.1)相似度达95%。菌株13-85与Streptomyces amritsarensis(登录号GQ906975)16 S r RNA基因序列相似率高达99.65%。结论菌株13-85发酵液有较为广泛的抑菌活性且稳定性较好,菌株含有PKS II、NRPS基因,初步鉴定该放线菌为链霉菌属有效发表种Streptomyces amritsarensis的一个菌株,具进一步开发应用价值。     

肿瘤抑素相关肽T42肽的纯化及抗肝癌细胞Hepg2活性的测定

目的:利用已成功构建的肿瘤抑素相关活性肽T42肽高效表达基因工程重组菌pTYB2-T42,提取纯化T42肽,检测其抗肿瘤活性,为研究T42肽抗肿瘤作用机制及新型抗肿瘤药物研发提供实验基础。方法:将pTYB2-T42大肠杆菌进行培养,IPTG诱导其产生融合蛋白,经几丁质柱亲和层析得到目的蛋白,葡聚糖凝胶G15去除DTT干扰,Tricine SDS-PAGE鉴定T42肽,紫外分光光度法检测其浓度。MTT检测T42肽对细胞的生长增殖抑制作用,AO/EB荧光染色检测细胞凋亡形态学变化。结果:提取的T42肽其相对分子质量在5 000左右,与理论值4 600一致。MTT实验结果显示：T42肽作用下Hepg2细胞生长增殖受到抑制,且随着T42肽浓度的增加,Hepg2细胞存活率逐渐下降,其半数抑制浓度(IC₅₀)为30 mmol•L^-1;AO/EB荧光染色结果表明：经过30 mmol•L^-1 T42肽作用24 h后的Hepg2细胞表现出细胞皱缩呈圆形或卵圆形,核皱缩变形且胞膜受损等一系列细胞凋亡特征性的形态变化。结论:T42肽具有显著的抗肿瘤细胞活性,可明显抑制人肝癌细胞Hepg2的生长增殖,并促进其凋亡。     

阴道毛滴虫对灭滴灵抗药性机制研究进展

近年来国外学者从生物化学及分子生物学水平研究了阴道毛滴虫对灭滴灵的抗性机制,并取得一定进展。     

MR灌注成像在早期脑梗死中的临床应用

随着MR扫描技术的发展及高场强MR的出现,观察脑组织血流状况的脑MR灌注成像研究日益增多,MR灌注成像技术的完善使得影像学检查对脑梗死进行更早期、快速、准确的诊断,获得相关的血液动力学参数和代谢改变信息成为现实。1研究现状一直以来,临床上缺乏1种简单、有效地评价脑血流动力学状态的方法。虽然单光子发射计算机体层摄影(SPECT)和电子发射体层摄影(PET)被公认是评价脑血流动力学状态的“金标准”,但其价格昂贵、成像时间长、图像空间分辨率差、具有核放射性等缺点,限制了其临床应用〔1〕。常规CT检查虽然在急性期脑梗死(发病后…     

低位产钳术优于胎头吸引术的临床研究

目的 探讨低位产钳术替代胎头吸引术的优劣程度.方法 对2000-2006年实施的110例低位产钳术、110例胎头吸引术进行分析对照,对手术成功率、胎儿娩出时间、母儿的损伤指标进行比较.结果 低位产钳术成功率明显优于胎头吸引术(P<0.05),对母儿的损伤情况没有明显差异.结论 低位产钳术优于胎头吸引术,替代胎头吸引术是可行的.     

华支睾吸虫亚显微结构的研究-V精细胞的分化（摘要）

目的 研究华支睾吸虫精子的形成。方法 采集自然感染华支睾吸虫的麦穗鱼，人工消化后收集囊蚴，以囊蚴感染家免，两个月后剖检病兔获取成虫．切取睾丸段做电镜制样，透射电镜观察。结果 精原细分布在睾丸被膜下，睾丸深部分布着不同分化阶段的精母细胞、精细胞和精于，一个原细胞经3次有丝分裂进入生长期，形成8个初级精母细胞，细胞间有胞质间桥连接，初级精母细胞经第一次减数分裂形成16个次级精母细胞，次级精母细胞经减数分裂中的第二次分裂形成32个精细胞，精细胞的一端仍与胞质间桥连接另一端游离，排列成玫瑰花状．进行同步发育。结论 华支睾吸虫精子的分化分为两个连续的阶段，一，精细胞的分化。二，精子的变形，本报告为第一阶段。     

新生儿巨大畸胎瘤1例手术配合与护理

新生儿巨大畸胎瘤１例手术配合与护理吉林省人民医院（１３００２１）宋香兰袁丽杰李秀春长春中医学院附属医院白颖【关键词】新生儿巨大畸胎瘤护理体会我院于１９９７年４月为一新生儿骶尾部巨大畸胎瘤进行了切除和矫形手术，并获得了成功，报道如下。１典型病例陈某，女...     

奈达铂、顺铂联合氟尿嘧啶治疗中晚期食管癌的临床疗效和安全性

目的探讨奈达铂、顺铂联合氟尿嘧啶治疗中晚期食管癌的近期疗效和安全性。方法将70例拟行化疗的中晚期食管癌患者随机分为观察组和对照组,每组35例,对照组患者采用顺铂联合氟尿嘧啶化疗,观察组患者采用奈达铂、顺铂联合氟尿嘧啶化疗,对比观察两种化疗方案的近期疗效和不良反应。结果观察组缓解率(RR)为57.14%,高于对照组的54.29%,但差异无统计学意义(P>0.05);观察组恶心、呕吐发生率均较对照组低,差异有统计学意义(P<0.05);观察组白细胞减少、血小板减少发生率高于对照组,但差异无统计学意义(P>0.05)。结论奈达铂、顺铂联合氟尿嘧啶治疗中晚期食管癌疗效与顺铂联合氟尿嘧啶化疗相当,但能显著降低化疗后胃肠道不良反应,值得临床积极推广。     

不同地域阴道毛滴虫分离株的随机扩增多态DNA技术分析

目的　分析比较阴道毛滴虫 7个分离株基因组DNA的遗传多态性。　方法　应用随机扩增多态DNA技术对阴道毛滴虫北京 1株、北京 2株、承德株、唐山株、九江 1株、九江 2株与九江 3株基因组扩增 ,并对扩增产物进行聚类分析。　结果　 7虫株两两间的遗传相似指数为 77.4%～ 94.7% ,遗传关系密切。其中 :北京 1株和唐山株为 89.2 % ,九江 1株和九江 2株为 92 .1% ,北京 2株和九江 3株为 94.7% ,亲缘关系较近。而九江 1株和承德株间遗传相似指数为77.4% ,同源性相对较低。　结论　 7株阴道毛滴虫遗传关系密切 ,但在基因水平上存在种内差异性 ;地理位置对阴道毛滴虫遗传学特性影响不大。     

带有HA标签的HBc蛋白真核表达质粒的构建及其在HEK293细胞中的表达

目的构建带有流感病毒血凝素9钛表位标签（HA标签）的乙型肝炎病毒（HBV）核心蛋白（HBc）的表达质粒,为进一步研究HBe蛋白基因的功能奠定实验基础。方法设计并合成扩增HBc蛋白全长的PCR引物,以野生型的HBV质粒pDolTHBV-1为模板,PCR扩增全长的HBc蛋白,大小为563bp;PCR产物经过Eco砒和XholI酶切后,与线性化的pcDNA3／HA载体连接后转化大肠杆菌,扩增、纯化获得所需质粒,以琼脂糖凝胶电泳、酶切鉴定以及基因测序鉴定其分子质量和插入片段的序列;构建的质粒转染HEK293细胞48h后,RIPA裂解细胞,Western blot检测HBc蛋白表达。结果纯化质粒的相对分子质量为5．9kb,酶切鉴定结果符合目的条带（563bp）大小,插入的寡核苷酸序列与野生型HBV基因序列完全相符,表达的融合蛋白大小为28kDa。结论成功构建了带有HA标签的HBc蛋白的真核表达质粒pcDNA3／HA—HBc蛋白,为进一步研究HBe蛋白的功能奠定了良好的实验基础。