阿霉素在小鼠离体培养脑片中增强Ⅱ型腺相关病毒的转导

目的 在小鼠离体培养脑片中观察Ⅱ型腺相关病毒(adeno-associated virus,AAV-2)载体介导的增强型绿色荧光蛋白(enhanced green fluorescent protein,EGFP)的感染,并进一步研究阿霉素促进AAV-2转导的效应。方法 离体培养小鼠全脑脑片,在培养基中加入携带EGFP的AAV-2(AV2.EGFP)或阿霉素与AV2.EGFP的混合物,利用荧光显微镜实时观察活细胞中EGFP的表达情况。结果 AV2.EGFP感染脑片6 d后,EGFP稳定表达,同时加入1 μmol/L阿霉素可明显增强EGFP表达,阳性细胞数增加至2.8倍,该效果至少可持续6 d。并且,阿霉素与AV2.EGFP同时给药与在AV2.EGFP感染之后给药效果相似。结论 阿霉素在小鼠离体培养脑片中可明显增强AAV-2的转导,该研究有望促进AAV-2介导的基因治疗在中枢神经系统疾病中的应用。     

糖氨基酸化合物的合成研究

目的 本文对糖氨基酸化合物的反应进行了研究。方法 葡萄糖醛酸在四氢呋喃中与RGDV寡肽反应。结果 反应得到糖肽化合物。结论 与寡肽反应生成含糖基的四肽产物。     

肝刺激因子稳定转染人肝癌细胞系的方法建立与表达鉴定

目的 建立稳定表达肝刺激因子(hepatic stimulator substance,HSS)的BEL-7402肝癌细胞系,并对其生物学特性进行鉴定。方法 采用脂质体法将鉴定后的Flag-HSS-pcDNA3.0质粒转染到肝癌细胞系BEL-7402中,进行G418筛选,获得稳定转染的人肝癌细胞系。通过real-time PCR、 Western blotting和免疫荧光染色等方法鉴定HSS mRNA和蛋白质表达及亚细胞定位。结果 免疫荧光染色实验证实HSS基因能在稳定转染的肝癌细胞系中表达,并定位于线粒体中。同时发现在稳定转染细胞中HSS mRNA和蛋白质的表达也均高于野生型BEL-7402细胞。结论 目前已成功构建稳定转染HSS的BEL-7402肝癌细胞系。为深入研究HSS的生理功能提供实验工具和研究基础。     

MiR-886-5p对宫颈鳞状上皮细胞克隆形成和宫颈癌细胞化学药物治疗的影响

目的 探讨microRNA-886-5p(MiR-886-5p)对宫颈鳞状上皮细胞克隆形成及宫颈癌细胞化学药物治疗(以下简称化疗)的影响。方法 应用基因芯片技术检测宫颈癌及其癌周组织microRNA的表达,筛选出MiR-886-5p在宫颈癌组织中高表达。生物信息系技术分析发现miRNA-886-5p靶向P53通路中多个基因的表达。用MiR-886-5p mimics和带有GFP标签的MiR-886-5p过表达载体稳定转染高危型人乳头瘤病毒(human papilomavirus,HPV16)阳性的永生化人宫颈鳞状上皮细胞H8细胞,应用Western blotting方法检测P53和P14的蛋白表达情况;应用平板克隆形成技术,观察对细胞克隆形成的影响。在宫颈癌SiHa细胞中,加入化疗药物紫杉醇和VP16后,应用real time RT-PCR技术,检测MiR-886-5p的表达情况。结果 过表达 MiR-886-5p后,H8细胞的克隆形成率明显高于阴性对照组,并且降调P53通路中P14和P53蛋白的表达。加入化疗药紫杉醇和VP16后,SiHa细胞中MiR-886-5p表达明显升高。结论 MiR-886-5p与宫颈鳞状细胞增生相关,它降调P14和P53两种蛋白的表达,且与宫颈癌细胞化疗抵抗相关。     

电学治疗在脊髓损伤领域从基础研究转化为临床技术的研究进展

目的 通过总结多种电学方法在脊髓损伤领域中的临床疗效,讨论电学技术从基础研究转化为临床技术的研究进展,为今后临床工作的开展提供转化医学的新思路。方法 分析电学治疗方法的起源及发展过程,讨论并分析4种电学技术转化为脊髓损伤领域治疗技术的临床疗效,这些技术包括:脊髓损伤部位的电刺激技术,瘫痪肢体的功能性电刺激技术,呼吸功能障碍的膈肌起搏技术和排尿功能障碍的神经电调节技术。结果 1)直流电场能够促进未完全断裂的脊髓轴突再生,振荡电场能够双向修复脊髓损伤近端和远端的神经轴突。2)功能性电刺激用于重建瘫痪肢体的运动功能,通过刺激肢体周围神经引起肌肉按照一定顺序收缩产生动作,可以预防多种合并症。3)膈肌起搏技术能够诱发膈肌收缩,保证脊髓损伤膈肌功能障碍患者呼吸时产生自然的负压状态,重建呼吸功能。4)频率为5~20 Hz,脉宽为1~5 ms的电流能够既抑制逼尿肌的过度活动,又改善诸多盆底功能。结论 电流作为一种治疗技术,既有作为生物电的共性,又在不同条件下具备不同的电学特性和临床疗效。今后的脊髓损伤研究中,应加强电学治疗技术与临床技术的结合,来解决更多的临床问题。     

拉米夫定临床应用专家共识(2004年版)

一、前言 据估计,全球慢性乙型肝炎病毒(HBV)感染者多达3．6亿,我国占1．2亿…。慢性感染者中50％～75％有活跃的病毒复制和肝脏炎症改变,部分慢性肝炎可进展为肝硬化、肝衰竭或原发性肝癌,是主要的疾病死亡因素之一旧J。慢性HBV感染的自然病程漫长,可持续30～50年,并多在青壮年时期发病。期间可分为免疫耐受期、免疫清除期、残留期(低复制或无     

酶学参考实验室参考方法测量不确定度评定指南

本标准依据GUM、QUAM等不确定度评定理论,结合酶学参考实验室参考方法测量特点起草。在起草过程中参阅了CE等文献,标准初稿曾邀请国内计量领域、临床实验室管理机构、酶学参考实验室的数十位专家以函审、会审方式审阅并充分研讨、修定形成本标准。 本标准的附录A、附录B、附录C为资料性附录。 本标准由卫生部临床检验标准专业委员会提出。 本标准起草单位为卫生部临床检验中心,北京航天总医院,南通大学附属医院,广东省中医院,上海市临床检验中心,北京协和医院,北京世纪坛医院。 本标准主要起草人为杨振华,陈宝荣,王惠民,黄宪章,汪静,居漪,邱玲,张曼。     

如何认定医疗用品的"缺陷"和血液制品的"不合格"?

胡晓翔(南京市卫生局政策法规与监督处处长,中国卫生法学会理事,中国医师协会维权委员会委员,中国医院协会医疗法制专业委员会常务委员,江苏省卫生法学会副会长,南京医科大学医政学院客座副教授):<侵权责任法>第59条,对于药品、消毒药剂、医疗器械、血液制品等缺陷产品的使用造成的不良后果如何进行评判是非做了有关规定.     

椎弓根螺钉设计与相关技术的应用

经椎弓根螺钉固定治疗已在脊柱外科有着广泛的应用,固定器的种类很多,其设计均基于椎弓根的解剖学特点和力学特性.螺钉是连接固定器与脊椎的桥梁,因而椎弓根螺钉成为了这些固定器产生作用的"中介",中国学者对椎弓根螺钉固定进行了哪些方面的研究?     

中国生物材料研究面临突破的新技术

科研机构的专家认为:新形式下生物材料科学的研究方向,生物相容性是生物医学材料科学的核心.新一代生物材料的设计与合成是生物医学材料研究追求的目标,纳米生物材料及软纳米技术是生物材料的前沿与热点,先进的制造方法学是生物材料科学的一个重点,表面和表面工程是现阶段发展新一代生物医学材料的主要途径.生产企业代表的经验是:生物材料和产品发展迅速,产品更新换代周期短,因而需要强大的研发能力和技术支撑,与研发力量强的国家工程中心、高等院校、科研院所相结合,建立企业的创新中心是有效的途径,另外国家政策对生物材料和制品产业的发展有极大的影响,特别是进口产品与国产品在政策上的一致性,希望与国外企业能在公平的基础上进行市场竞争,希望政府能出台保护民族产业的国家相关措施.临床医生提出:研发产品要紧扣临床需求,以市场为向导,进行科技持续创新,只要国内产品质量提升、性能稳定、价格合理,临床医生会大量使用国内产品,会大力支持本土企业.