过敏性紫癜患儿血浆血栓调节蛋白血管性假血友病因子基质金属蛋白酶-9的检测及临床意义

目的检测过敏性紫癜(HSP)患儿血浆血栓调节蛋白(TM)、血管性假血友病因子(vWF)、基质金属蛋白酶-9(MMP-9)水平,探讨它们在HSP发病机制中的作用及与紫癜性肾炎(HSPN)的关系。方法2006-09—2007-02在青岛大学医学院附属烟台毓璜顶医院儿内科住院的HSP患儿46例,应用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测HSP患儿急性期(46例)、缓解期(40例)及健康对照儿童(20例)血浆TM、vWF、MMP-9水平。结果HSP患儿急性期TM、vWF、MMP-9水平明显高于对照组(P均<0.01),也高于缓解组(P均<0.05)。MMP-9下降较缓慢,在恢复期仍显著高于对照组(P=0.01)。伴肾受累组vWF、MMP-9高于非肾受累组(P均<0.05),而TM在两组之间差异无显著性意义(P>0.05)。TM、vWF浓度之间成直线正相关,而TM、vWF分别与MMP-9之间相关性分析无统计学意义。结论血管内皮细胞及细胞外基质损伤在HSP的发病机制中起着重要的作用,血浆TM、vWF、MMP-9水平测定有助于了解病情活动及判断是否合并肾脏损害,动态测定有助于观察病情演变及指导治疗。     

青蒿素对全身炎症反应综合征小鼠的保护作用

目的:采用内毒素(LPS)所致全身炎症反应综合征(SIRS)小鼠模型,研究青蒿素对SIRS小鼠的保护作用及机制。方法:将5～7周龄的雄性BALB/c小鼠随机分为正常组,LPS模型组,青蒿素低、中、高剂量(25,50,100 mg·kg-1)组、布洛芬组(39 mg·kg-1),预防给药7 d后腹腔注射LPS(10 mg·kg-1)。根据SIRS临床诊断标准,检测小鼠的呼吸频率、肛温、白细胞分类、白细胞计数、血小板计数、肺指数、脾指数、糖脂代谢、脑组织炎症因子,以及肺组织炎症相关蛋白磷酸化情况。结果:与正常组比较,模型组腹腔注射LPS可使小鼠的呼吸频率明显降低(P0. 05),体温显著下降(P0. 01),脾指数显著升高(P0. 01),外周血中性粒细胞百分比明显增加(P0. 05),单核细胞百分比显著降低(P0. 01),血小板显著减少(P0. 01),血小板比积显著降低(P0. 01),血浆中总胆固醇含量显著降低(P0. 01),血浆葡萄糖含量显著降低(P0. 01),脑组织海马和皮层中白细胞介素-1β(IL-1β)分泌显著增多(P0. 01),脑组织海马、皮层中肿瘤坏死因子-α(TNF-α)分泌显著增多(P0. 01),肺组织磷酸化蛋白STAT1表达显著升高(P0. 01),磷酸化蛋白c-Jun表达显著升高(P0. 01);与模型组比较,青蒿素给药后,可显著升高LPS所致小鼠的体温和呼吸频率的降低,减轻LPS诱导的各脏器病理改变,可显著升高LPS所致的小鼠低血糖,可显著降低海马和皮层中炎性因子的水平,降低肺组织中磷酸化蛋白STAT1和c-Jun的表达(P0. 05,P0. 01)。结论:青蒿素可降低炎性因子TNF-α和IL-1β水平,对腹腔注射LPS致SIRS小鼠具有显著的保护作用。     

流行性腮腺炎并脑炎患儿血清和脑脊液sICAM-1和TNF-α的变化及意义

流行性腮腺炎并脑炎 (以下称腮脑 )是儿科常见的中枢神经系统感染性疾病 ,其发病机制尚未完全明了。本组研究对36例腮脑患儿血清和脑脊液可溶性细胞间粘附分子 1(sICAM - 1)及肿瘤坏死因子α(TNF -α)水平进行了测定 ,旨在探讨其在儿童腮脑发病中的临床意义。1　资料和方法1.1.　临床资料　选取我院 1999年 10月— 2 0 0 1年 12月住院患儿 ,其中腮脑 (观察 )组 36例 ,男 2 8例 ,女 8例 ,年龄 2～12岁 ,均符合《实用儿科学》关于流行性腮腺炎并脑炎的诊断标准[1] ;对照组 2 0例 ,男 14例、女 6例 ,年龄 7个月～ 12岁 ,其中小儿外科择期手…     

酪氨酸激酶受体B-脑源性神经营养因子信号传导通路对神经母细胞瘤细胞分泌血管内皮生长因子及基质金属蛋白酶-9的影响

目的 探讨酪氨酸激酶受体B(tyrosine kinase receptor B,TrkB)-脑源性神经营养因子(brain-derived neurotrophic factor,BDNF)信号传导通路对神经母细胞瘤(neuroblastoma,NB)细胞SH-SY5Y分泌血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)及基质金属蛋白酶-9(matrix metalloproteinase-9,MMP-9)的影响.方法 用全反式维甲酸(all-trans retinoic acid,ATRA)诱导SH-SY5Y细胞表达TrkB,加入外源性BDNF,从而激活TrkB-BDNF信号传导通路及其3条下游信号通路.再用特异性酪氨酸激酶抑制剂K252a阻断TrkB-BDNF信号传导通路;用磷脂酰肌醇-3激酶(phosphatidylinositol 3-hydrox y kinase,PBK)抑制剂LY294002、磷脂酶C抑制剂U73122、丝裂原活化蛋白激酶抑制剂U0126分别阻断TrkB-BDNF的3条相应下游信号传导通路.采用酶联免疫吸附法检测细胞培养上清液中VEGF及MMP-9含量.结果 ATRA+ BDNF组VEGF[(485.89±109.99) pg/ml]及MMP-9[(15.73±1.72) pg/ml]含量明显高于对照组及ATRA组(P ＜0.05);ATRA+ BDNF+ K252a组VEGF[(272.42±86.33) pg/ml]及MMP-9[(5.25±1.44) pg/ml]含量明显低于ATRA+ BDNF组(P＜0.05),与对照组及ATRA组比较差异无统计学意义(P＞0.05);ATRA+ BDNF+ LY294002组VEGF[(314.12±24.68) pg/ml]及MMP-9[(4.91±1.08) pg/ml]含量明显低于ATRA+ BDNF组(P＜0.05),与对照组及ATRA组比较差异无统计学意义(P ＞0.05);ATRA+ BDNF+ U73122组VEGF[(444.08±64.49) pg/ml]及MMP-9[(13.28±3.38) pg/ml]含量与ATRA+ BDNF组比较差异无统计学意义(P＞0.05).ATRA+ BDNF+ U0126组VEGF[(429.97±19.95) pg/ml]及MMP-9[(13.96±4.45) pg/ml]含量与ATRA+ BDNF组比较差异无统计学意义(P＞0.05).结论 激活TrkB-BDNF信号传导通路可促进NB细胞合成、分泌VEGF及MMP-9.TrkB-BDNF信号传导通路可能通过进一步激活其下游PI3 K/Akt通路来促进VEGF及MMP-9的合成及分泌,用K252a阻断TrkB-BDNF信号通路、LY294002阻断其下游PI3K通路均可有效抑制NB细胞合成及分泌VEGF及MMP-9.     

参莲提取物对ox-LDL诱导的巨噬细胞泡沫化和凋亡的药效学研究及提取部位活性比较

目的:研究参莲(SL)提取物对氧化型低密度脂蛋白(oxidized low density lipoprotein,ox-LDL)诱导的腹腔巨噬细胞泡沫化和凋亡的药效及SL不同提取部位的活性比较。方法:从C57BL/6J雌性小鼠腹腔中收集腹腔巨噬细胞,体外培养72 h后,分为7组,阴性对照组(NC),模型组(Model,ox-LDL,20 mg·L~(-1)),丹参水溶性提取物组(DS,4.32 mg·L~(-1)+20 mg·L~(-1) ox-LDL),丹参脂溶性提取物组(DZ,2.5 mg·L~(-1)+20 mg·L~(-1) ox-LDL),穿心莲脂溶性提取物组(C,3.18 mg·L~(-1)+20 mg·L~(-1) ox-LDL),SL提取物组(10 mg·L~(-1)+20 mg·L~(-1) ox-LDL),内质网应激诱导剂衣霉素组(TM,1 mg·L~(-1)),药物处理24 h。油红O染色观察脂质积累的情况;钙离子荧光染色联合流式细胞仪检测细胞内钙离子浓度的变化;Annexin V-FITC/PI染色观察细胞的凋亡情况;比色法检测Caspase-3的酶活性;Western blot检测Caspase-12的表达。结果:与NC组相比,Model组和TM组腹腔巨噬细胞内脂质蓄积,凋亡率增加,Caspase-3的酶活性增加,钙离子浓度增加,Caspase-12的活化水平上调。与Model组相比,SL组和C组显著改善细胞内脂质积累的情况;SL组和DZ组显著降低细胞的凋亡率,降低Caspase-3的酶活性,有效降低细胞内钙离子的浓度,显著降低Caspase-12的活化水平。结论:综上所述,以巨噬细胞为靶点,SL提取物可能通过缓解ox-LDL诱导的内质网应激,抑制巨噬细胞源泡沫细胞的凋亡。     

复方银杏叶颗粒对H_2O_2致H9c2细胞损伤的保护作用

目的观察复方银杏叶颗粒(YXY)对H2O2诱导H9c2心肌细胞损伤的影响。方法采用H2O2建立心肌损伤模型,给予YXY 25、50、100、200μg/m L预处理24 h,MTT法测定细胞生存率,相差显微镜观察细胞形态学改变;试剂盒法检测细胞培养上清中乳酸脱氢酶(LDH)、肌酸激酶-MB(CK-MB)、丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)、一氧化氮(NO)水平;共聚焦显微镜检测细胞内活性氧(ROS)、钙离子浓度及线粒体膜电位。结果 H2O2 500μmol/L作用6 h可显著降低H9c2细胞生存率,诱导氧化应激损伤;YXY预处理可提高细胞生存率,改善损伤细胞形态学改变,减轻LDH、CK外漏,降低细胞上清中MDA、NO水平,增加SOD活性,减少H9c2细胞内ROS生成,降低细胞内钙离子浓度、减轻线粒体膜电位的下降。结论 YXY对H2O2诱导H9c2心肌细胞损伤有保护作用。     

血栓调节蛋白、血管性假血友病因子、基质金属蛋白酶-9在过敏性紫癜肾损害早期诊断中的价值

目的 探讨过敏性紫癜(HSP)患儿血浆血栓调节蛋白(TM)、血管性假血友病因子(vWF)、基质金属蛋白酶-9(MMP-9)在HSP肾损害早期诊断中的价值.方法 应用ELISA法检测60例健康儿童(健康对照组)及160例HSP患儿急性期血浆TM、vWF、MMP-9水平.随访6个月～1a,发生肾损害62例,非肾损害98例,按肾损害临床表现分为A组:孤立性血尿(18例)或孤立性蛋白尿(3例);B组:血尿+蛋白尿(29例);C组:大量蛋白尿(12例).比较肾损害组、非肾损害组及健康对照组中各数值变化及在肾损害不同组中的差异.结果 1.肾损害组TM[( 148.13±18.60) mg·L-1]、vWF[( 159.50±23.06)％]、MMP-9[( 36.53±7.86)mg·L-1]均高于非肾损害组[(129.49±21.22) mg·L-1、(136.98±25.48)％、(29.14±8.17) mg·L-1]及健康对照组[(113.63±20.88) mg·L-1、(121.83±24.69)％、(24.37±7.34) mg·L-1],差异均有统计学意义(Pa＜0.05);非肾损害组与健康对照组比较差异均无统计学意义(Pa＞0.05).2.肾损害组:C组、B组TM[( 158.59±17.80) mg·L-1、(149.72±19.20) mg·L-1]、vWF[(169.45±23.36)％、(160.20±21.46)％]、MMP-9[ (42.66±6.31) mg· L-1、(35.88±7.33) mg·L-1]高于A组[(131.28±16.14) mg·L-1、(139.59±19.26)％、(30.16±6.89) mg· L-1],差异均有统计学意义(Pa＜0.05);C组MMP-9水平高于B组,差异有统计学意义(P＜0.05),而TM、vWF在2组之间差异均无统计学意义(Pa＞0.05).结论 TM、vWF、MMP-9在HSP急性期升高,可作为早期预测肾损害的指标,联合检测有利于早期预测肾损害的发生及肾损害的程度.     

复方梭子蟹胶囊对大鼠胃溃疡模型的影响

目的:观察复方梭子蟹胶囊对4种大鼠胃溃疡模型的胃黏膜损伤的保护作用。并通过观察复方梭子蟹胶囊对慢性胃溃疡大鼠血清中胃组织中表皮生长因子(EGF),转化生长因子-α(TGF-α)和表皮生长因子受体(EGFR)蛋白表达的影响,初步探索其作用机制。方法:选取SD大鼠,采用水浸应激、消炎痛、幽门结扎、乙酸浸渍的方法构建4种大鼠胃溃疡模型,将大鼠随机分为正常组,模型组,复方梭子蟹胶囊低、中、高剂量组(2.07,4.14,8.28 g·kg~(-1)),阳性药组(法莫替丁7.2 mg·kg~(-1)),正常组和模型组分别灌胃纯水(15 mL·kg~(-1)),大鼠连续灌胃给药14 d。检测各组大鼠溃疡面积、抑制百分率。采用免疫组化法观察乙酸浸渍模型大鼠胃组织中EGF,TGF-α及EGFR蛋白表达的影响。结果:与正常组比较,模型组4种模型大鼠的溃疡面积显著升高(P0.01);与模型组比较,复方梭子蟹胶囊能明显降低4种模型的溃疡面积(P0.05,P0.01),抑制溃疡损伤率,明显增加血清及胃组织中EGF,TGF-α和EGFR的蛋白表达(P0.05,P0.01)。结论:复方梭子蟹胶囊对大鼠水浸应激性胃溃疡、消炎痛型胃溃疡、幽门结扎型胃溃疡3种急性胃溃疡模型有一定的预防作用,对乙酸浸渍性慢性胃溃疡模型有治疗作用,并通过促进血清及胃组织中EGF,TGF-α和EGFR的蛋白表达来发挥抗慢性胃溃疡的作用。     

基于UPLC-Q-TOF-MS/MS 和网络药理学探讨戊己丸药效物质基础及疾病治疗潜能分析

戊己丸作为经典名方,药味组成简单且为临床常用有效中药,但相对其他中药名方,其实际应用却很有限,戊己丸中成药制剂国内只有一家制药公司生产。该文采用UPLC-Q-TOF-MS/MS技术,从戊己丸制剂及大鼠含药血浆中分析鉴定出26个相同化合物,并基于这些成分,通过网络药理学方法得到46个潜在靶点,再进行成分-靶点网络构建、GO功能富集、KEGG通路富集分析及疾病预测,推断戊己丸可通过木兰花碱、羟基吴茱萸碱、胡萝卜苷、小檗碱等作用于PTGS2、PTSG1、NCOA2、HSP9OAD1、RXRA等核心靶点,通过钙离子信号通路、PI3K-Akt、VEGF信号通路等多种途径发挥药效作用,提示戊己丸除常规治疗疾病(如肠易激综合征)外,还对阿尔茨海默病、糖尿病、心肌缺血等疾病有治疗潜能,以上研究结果可为全面阐释戊己丸药效物质基础及扩大临床应用提供参考。同时,该实验观察到,戊己丸入血成分及其在体内转化、代谢降解的成分中有非常多的结构和化学相对分子质量相似成分,这些成分理论上对潜在药效单靶点会构成多成分叠加与竞争/拮抗并存的复杂作用,中药“多成分单靶点叠加作用”假说认为,在中药多成分多靶点协同作用网络中局部...