2011年上海地区细菌耐药性监测

目的总结2011年上海市细菌耐药性监测结果。方法采用纸片扩散法(K-B法)对上海地区23所医院的临床分离菌进行药敏试验。采用CLSI 2011年版标准判断结果。结果总计56 032株临床分离菌,革兰阳性菌占28.7%,革兰阴性菌占71.3%。耐甲氧西林金葡菌(MRSA)和耐甲氧西林凝固酶阴性葡萄球菌(MRCNS)分别占各自菌种的56.9%和79.9%,未发现万古霉素、替考拉宁和利奈唑胺耐药株。798株肺炎链球菌中7株为脑膜炎分离株,其余为非脑膜炎分离株。非脑膜炎儿童分离株中青霉素敏感、中介和耐药菌株各占70.0%、13.7%和16.3%。发现32株屎肠球菌和4株粪肠球菌对万古霉素耐药,32株屎肠球菌中分别有12株和10株为vanA型和vanB型万古霉素耐药,7株为vanF型万古霉素耐药;4株粪肠球菌中vanA型和vanB型万古霉素耐药菌各1株。大肠埃希菌、克雷伯菌属细菌(肺炎克雷伯菌和产酸克雷伯菌)和奇异变形杆菌中产ESBLs的检出率分别为57.9%、39.6%和14.3%。肠杆菌科细菌对碳青霉烯类抗生素仍高度敏感,对亚胺培南和美罗培南的总耐药率<5%。不动杆菌属细菌对亚胺培南、美罗培南耐药率仍继续增高,耐药率分别为53.0%和55.0%。大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌、鲍曼不动杆菌和铜绿假单胞菌中仍有少数泛耐药株。磷霉素对分离自尿液标本中的肠球菌属细菌、大肠埃希菌包括产ESBLs菌株和多重耐药大肠埃希菌均有良好的抗菌活性。结论细菌耐药性呈继续增长趋势,对临床抗感染治疗构成严重威胁,某些医院中多重耐药菌相对集中的科室及早进行流行病学调查并采取积极有效防控措施为当务之急。     

外科病房标本病原菌分类及耐药性

2001年1月～2002年12月。从我院外科病房送检的临床标本中共分离到细菌961株，本研究通过统计分析其中的常见致病蓖及其对多种常用抗生素的药物敏感性，以期指导外科感染的临床诊断和治疗。     

UF-100尿液分析仪筛检尿路感染临床意义的探讨

目的　探讨UF 10 0尿液分析仪筛检尿路感染的临床意义。方法　对UF 10 0作重复性试验 ,用UF 10 0检测 32 5份尿中细菌和白细胞 ,同时作定量细菌培养并将结果作比较。用Yerushalmy模式评价 2种方法的一致性及UF 10 0筛检的灵敏度、特异性等。结果　重复试验中 ,UF 10 0细菌计数CV值低于白细胞计数CV ,与定量细菌培养结果比较 ,细菌计数的筛检灵敏度为 80 .0 % ,特异性为 5 0 .4 % ,阳性预计值为 2 8.7% ,阴性预计值为 91.0 % ,假阳性率为 39.7% ,假阴性率为 4 .0 % ,准确率为 5 6 .3%。结论　UF 10 0具有良好的分析尿液的性能 ,在临床尿路感染筛检时可用细菌一项指标 ,90 %结果阴性的标本可在短时间内筛去 ,大大减少实验人员繁复劳动 ,降低检验成本 ,但应注意假阴性 ,更不可替代尿定量细菌培养。     

上海发现同时产CYM-2型质粒AmpC酶及CTX-M-14型超广谱β-内酰胺酶的大肠埃希菌

目的研究大肠埃希菌同时产质粒型头孢菌素酶(AmpC酶)及超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)的耐药表型及基因型特点。方法在242株大肠埃希菌中用多重聚合酶链反应(PCR)检测质粒AmpC酶;对确认为产CIT群质粒AmpC酶的菌株进行PCR、克隆、测序;接合试验证实耐药基因的可传递性;PCR及测序确定ESBL的基因;等电聚焦电泳检测细菌β-内酰胺酶等电点(PI);微量稀释法测定最低抑菌浓度(MIC)。结果12株产CIT群酶细菌所携带AmpC酶基因均为blaCMY-2(PI 9.0),且均携带blaTEM-1(PI 5.4),9株同时携带blaCTX-M-14(PI8.0),无菌株携带blaSHV-like;12株产CMY-质粒AmpC酶细菌有4株接合实验阳性,经PCR证实接合子均传递了blaCMY-2,并有1株同时传递了blaCTX-M-14;多数产CMY-2型酶的细菌呈多重耐药,并有1株菌对碳青霉烯类药物耐药。结论在上海地区首次发现同时产CMY-2型质粒AmpC酶及CTX-M-14型ESBL的大肠埃希菌。     

红霉素对铜绿假单胞菌蹭行运动的抑制

目的体外培养铜绿假单胞菌（pseudomonasaeruginosa，PA），观察低浓度红霉素对铜绿假单胞菌蹭行运动（twitchingmotility）的影响。方法将铜绿假单胞菌ATCC1244菌株接种于3组不同浓度红霉素（2．5mg／L、0.5mg／L、0.25ms／L）的细菌培养基中，同时接种于未加红霉素的对照培养基中，采用肉眼观察、免疫荧光显微镜检查、免疫印迹实验、点杂交实验、电镜观察等方法观察铜绿假单胞菌蹭行运动的变化及鉴别其蹭行运动的分子组成。结果经过18—36h的孵育，LB平板上不同浓度的红霉素对PA蹭行运动有抑制作用，细菌光晕（halation）直径与药物浓度呈反比；18h时细菌的平均光晕直径2．5mg／L组为（0.48±0．14）cm，0．5mg／L组为（0．64±0．20）cm，0．25mg／L组为（0.95±0.18）cm，对照组为（1．40±0．21）cm，组间比较差异有统计学意义（F=123．15，P〈0．01）；24h时2．5mg／L组为（0．67±0．12）cm，0．5mg／L组为（0．82±0.23）cm，0．25mg／L组为（1．18±0．24）cm，对照组为（1．58±0．28）cm，组间比较差异有统计学意义（F=76．37，P〈0．01）；36h时2．5mg／L组为（0.91±0．17）cm，0．5mg／L组为（1．04±0．32）cm，0．25mg／L组为（1．49±0．31）cm，对照组为（2．07±0．38）cm，组间比较差异有统计学意义（F=54．75，P〈0．01）。免疫荧光显微镜观察结果可见细菌菌体一端呈簇状突起，为Ⅳ型菌毛的位置所在，簇状突起的多少与药物浓度呈反比。免疫印迹实验结果显示，随着药物浓度的减少，Ⅳ型菌毛的主要成分PilA蛋白表达增加。点杂交实验结果显示在蹭行运动中起作用的PilA蛋白主要表达在光晕的最外周，但组间未见明显区别。电镜下可见红霉素作用后PA菌体一端的Ⅳ型菌毛较对照组减少，部分脱离菌体。结论低浓度红霉素对PA的蹭行运动有抑制作用，且与红霉素浓度呈正比。     

2007-2011年鲍曼不动杆菌耐药分析

目的 动态监测上海市第六人民医院2007-201 1年鲍曼不动杆菌的耐药性及发展趋势,为临床合理应用抗生素提供依据.方法 采用西门子公司德灵WalkAway-40鉴定系统对菌株进行鉴定,用K-B纸片扩散法进行药敏试验.用WHONET5.4软件进行统计分析.结果 鲍曼不动杆菌的分离率从2007年的227株上升至2011年的346株,菌株酎药性强.对头胞吡肟由2007年的42.6%上升到2011年的72.8%,对头孢哌酮/舒巴坦由2007年的42.3%上升到12011年的74.4%,对亚胺培能由2007年的1 6%上升到2011年的/62.6%,耐药率明显增高.泛耐株2007年为7%,2008年为1 4%,2009年为35%,2010年为37%,2011年为46%,增长趋势明显.结论 多重耐药的鲍曼不动杆菌在临床感染中已普遍存在,PDRA(泛耐药菌株)的增长趋势也逐年增高,临床应高度重视多重耐药及PDRA(泛耐药菌株)的鲍曼不动杆菌,合理使用抗生素.     

益生菌对大鼠肠道菌群紊乱和细菌易位的影响

目的探讨经肠道补充益生菌对腹腔感染大鼠肠道微生态的改变、细菌易位及肠屏障功能的影响。方法大鼠经盲肠结扎穿孔法及颈静脉空肠置管制成腹腔感染模型后,单独给予肠外营养或加用益生菌,持续5 d。第6天处死,取盲肠内粪便做厌氧菌培养,取腔静脉血及匀浆后的肺、肝、肠系膜淋巴组织作细菌培养,检测细菌易位率。结果加用益生菌的大鼠,肠道内的正常菌群除肠杆菌无明显差异外,乳酸杆菌和双歧杆菌数量都较单纯给予肠外营养的大鼠多;肠道内的潜在致病菌产气荚膜梭菌较单纯给予肠外营养的大鼠少(P<0.05)。单纯给予肠外营养的大鼠血、肺、肝和肠系膜淋巴组织的细菌易位率也明显高于加用益生菌的大鼠(P<0.05)。结论益生菌能纠正腹腔感染大鼠的肠道菌群紊乱,减少细菌易位,从而保护肠黏膜。     

梅毒非特异性类脂质反应素抗体试验操作的改进及应用评价

Objective To estimate the application value of a standard operating procedure (SOP) in the detection of syphilitic anticardiolipin reagin. Methods Clinical laboratories from 9 local hospitals in Shanghai participated the program. Quality control samples with unknown target value were qualitatively and quantitatively examined according to the uniform SOP in these laboratories with the same reagent and facility of horizontal reaction. External quality assessment (EQA) was carried out by using seven serum samples with no, or low (1∶ 128 dilution) to high (1∶1 dilution) concentrations of target before and after the implementation of SOP. The test results were statistically analyzed and the reasons for the detecting error were assessed. Results A total of 388 tests were performed in the 9 clinical laboratories. The total accuracy rate was 93.0%, including 40.2% in the detection of samples with 1 ∶ 8 dilution of target, 49.2% in the detection of samples with 1 ∶ 16 dilution of target, and 3.6% in the detection of samples with 1 ∶ 32 dilution of target. No forward bias was observed in these tests. There was a significant difference in the accuracy rate between the two times of EQA before and after the implementation of SOP (x2 = 4.17, P < 0.05). Conclusions The improved standard procedure for nontreponemal antigen test is beneficial to the decrease of testing error, and may provide a basis for the establishment of SOP and implementation of internal quality assessment.     

UF-100尿液分析仪筛检尿路感染临床意义的探讨

目的 探讨UF-100尿液分析仪筛检尿路感染的临床意义。方法 对UF-100作重复性试验，用UF-100检测325份尿中细菌和白细胞，同时作定量细菌培养并将结果作比较。用Yerushalmy模式评价2种方法的一致性及UF-100筛检的灵敏度、特异性等。结果 重复试验中，UF-100细菌计数CV值低于白细胞计数CV，与定量细菌培养结果比较，细菌计数的筛检灵敏度为80．0％，特异性为50．4％，阳性预计值为28．7％，阴性预计值为91．0％，假阳性率为39．7％，假阴性率为4．0％，准确率为56．3％。结论 UF-100具有良好的分析尿液的性能，在临床尿路感染筛检时可用细菌一项指标，90％结果阴性的标本可在短时间内筛去，大大减少实验人员繁复劳动，降低检验成本，但应注意假阴性，更不可替代尿定量细菌培养。     

大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌外排泵转录水平与耐药的关系

目的调查细菌耐药性与其主动外排泵系统的作用关系,并探讨大肠埃希菌外排泵调控基因对其外排泵结构基因表达水平的影响,分析其耐药机制。方法收集大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌共59株,根据头孢他啶耐药情况分为实验组(耐药)与对照组(敏感),多重聚合酶链反应(PCR)扩增外排泵调控基因acrR并测序,实时定量逆转录(RT)-PCR检测外排泵及调控基因marA的相对转表达水平,三维试验检测AmpC酶。结果实验组大肠埃希菌46.7%(7株)acrAB基因转录水平增高,肺炎克雷伯菌中51.9%(14株)acrAkp基因转录水平增高,敏感组外排泵基因均未见增高。实验组大肠埃希菌中,3株acrR发现突变,9株marA基因转录水平增高。59株菌株中39株(66.1%)AmpC阳性。结论主动外排泵系统是细菌耐药机制之一,常与其他耐药机制共同存在。acrR突变与marA表达增高均可引起大肠埃希菌acrAB表达增加。