单独或联合应用酸性成纤维细胞生长因子与转化生长因子对猪牙乳头细胞增殖的影响

目的研究酸性成纤维细胞生长因子(aFGF)和转化生长因子(TGF)β1单独或联合应用后对猪牙乳头细胞(pDPCs)增殖的影响。方法通过体外细胞培养技术,用四甲基偶氮唑盐(MTT)比色法检测aFGF、TGFβ1不同浓度、不同时间单独及联合应用后对pDPCs增殖的影响,所得数据用单因素方差进行分析。结果aFGF在5~100ng/ml和8d范围内能促进pDPCs增殖,最强效应浓度为10ng/ml和25ng/ml,最强效应时间为8d;TGFβ1在5~50ng/ml和8d范围内能抑制pDPCs增殖,其中以5ng/ml和10ng/ml抑制作用较弱;以aFGF最强效应浓度与TGFβ1较弱抑制浓度交互联合后对pDPCs有显著的促进增殖作用,其中以aFGF25ng/ml+TGFβ110ng/ml的效果最明显。结论在一定的浓度范围内,aFGF促进pDPCs增殖,TGFβ1抑制pDPCs增殖,两者联合可以促进pDPCs增殖。     

RARβ基因联合维甲酸体内抗口腔鳞癌作用机制研究

目的:探讨维甲酸受体β(nuclearretinoicacidreceptorbeta,RARβ)基因联合全反式维甲酸(alltransretinoicacid,ATRA)对荷口腔鳞癌裸鼠体内抗癌作用的机制。方法:ATRA、RARβ+ATRA和生理盐水分别治疗舌鳞癌移植瘤裸鼠4周,第四周末处死所有20只动物,取部分肿瘤组织固定后行常规病理切片,HE染色后光镜下观察并照相。切取部分肿瘤组织固定后行超薄切片和染色,透射电镜观察并照相记录。取部分新鲜组织,应用机械法制备单细胞悬液,PI染色后流式细胞仪检测细胞凋亡,Lysis软件分析凋亡细胞比例。结果:肿瘤组织剖面呈鱼肉状、质脆,中央有坏死;光镜下见空白对照组肿瘤细胞增殖旺盛,细胞呈不均一圆形,核浆比例大,核染色深,核分裂相较多;ATRA和RARβ+ATRA治疗组细胞核分裂少见;ATRA处理组可见部分细胞核固缩;RARβ+ATRA治疗组有较多细胞出现核固缩,呈片状分布,偶见细胞片状坏死。空白对照组肿瘤细胞平均凋亡率为6.3%,ATRA组和RARβ+ATRA组凋亡率分别为16.4%和16.6%。两者与对照组相比凋亡率明显增高(P<0.05),但两处理组差别不明显。透射电镜下空白对照组肿瘤细胞呈多角形,核大,核仁多,分裂相较多,凋亡细胞极少。ATRA组可见散在的凋亡细胞,表现为细胞皱缩,变小、变圆,染色质固缩、边聚,细胞浆浓缩。RARβ+ATRA组可见较     

新型多孔HA/PDLLA支架体外细胞相容性的实验研究

目的:研究新型多孔羟基磷灰石/聚乳酸(HA/PDLLA)支架材料的体外细胞相容性。方法:贴壁法培养兔骨髓基质细胞(bone marrow stromal cells,BMSCs),经体外矿化诱导培养、扩增后,与实验组 A(含2%HA 的 HA/PDLLA)、实验组 B(含4%HA 的 HA/PDLLA)及对照组(PDLLA)分别进行体外复合培养;并通过定性及定量检测细胞在材料表面的粘附能力、增殖活力,验证细胞材料复合体的成骨活性,比较分析各组支架材料之间的差异。结果:兔 BMSCs在三组支架材料的表面均能生长,经体外诱导后在支架材料的表面形成钙结节,实验组 A 与 B 细胞的粘附及增殖能力均强于对照组(P<0.05)。结论:兔 BMSCs 与新型多孔 HA/PDLLA 支架材料有良好的细胞相容性。     

仿生策略用于口腔颌面部骨再生与牙种植的研究进展

肿瘤术后、外伤、牙周病、先天畸形等因素造成的口腔颌面部骨和牙等硬组织的缺损与缺失严重影响人的身心健康.如何有效保存和功能性修复口腔颌面部骨和牙等硬组织一直是临床治疗的重点和难题.基于组织工程技术的颌面部硬组织的再生治疗具有良好的临床应用前景.通过模拟生物的天然结构及成分对生物材料及干细胞投递方式进行仿生设计的策略,因其...     

碳纳米管增强型天然复合材料神经导管修复大鼠副神经缺损

背景:近年来,纳米技术在组织重建领域的应用研究十分活跃.碳纳米材料应用于骨组织修复的相关报道较多,但应用于周围神经系统修复的报道较少.目的:应用功能性修饰的碳纳米管作为增强成分改善几丁糖/胶原复合材料神经导管的理化和生物性能,探讨以功能性修饰的碳纳米管增强型复合材料神经导管修复周围神经缺损的疗效.设计、时间及地点:同体自身对照动物实验,于2005-02/2006-11在上海交通大学医学院El腔组织工程实验室(上海市口腔重点实验室)和上海交通大学薄膜与微细技术实验室(教育部重点实验室)完成.材料:将碳纳米管与2%的酸溶性几丁糖溶液及胶原按一定比例充分混合,涂覆在模具上,经红外加热成型并达到预期厚度后,干燥脱模制备碳纳米管增强型复合材料导管.以不含碳纳米管的几丁糖,胶原复合材料导管为对照材料.方法:成年健康雄性Sprague-Dawley大鼠80只,制备4 mm副神经缺损,实验材料组和对照材料组分别应用相应神经导管进行修复.自体神经移植组将切除的神经原位吻接于断端,空白对照组则仅将神经切除掉2 mm,不做处理.左侧为实验侧,右侧为正常对照侧.主要观察指标:通过神经电生理学、肌肉功能及组织学检测手段对其修复效果进行评价.结果:应用碳纳米管增强型复合材料神经导管可有效地重建副神经缺损大鼠斜方肌的运动功能.术后再生神经电生理与组织学指标检测结果与白体神经移植的疗效相当,部分指标结果超过自体神经移植.结论:碳纳米管增强型复合材料神经导管是桥接修复周围神经的理想材料.     

组织工程骨提升上颌窦后与种植体骨整合观察

目的 研究冻干骨支架与骨髓基质细胞（BMSCs）复合的组织工程骨进行实验犬上颌窦提升种植体植入后的骨整合情况。方法 应用冻干骨支架与BMSCs复合的组织工程复合物进行实验犬上颌窦提升，分别于即刻和术后3个月（对照）植入种植体，种植体植入3个月后通过大体标本、X线及硬组织切片观察骨整合情况。结果 3个月后即刻种植组和对照组的种植体大体标本、X线及硬组织切片均可见种植体周围包绕着致密的骨组织，未观察到任何间隙和结缔组织长入，种植体与人工骨整合良好，两组间未见明显差别。结论 冻干骨支架与BMSCs复合的组织工程复合物进行实验犬上颌窦提升后植入种植体，即刻与延期植入的种植体均可以与组织工程人工骨发生骨整合，效果良好。     

新型生物活性复合材料RGD-PLGA/HA体外细胞相容性的实验研究

目的研究新型多孔多肽聚乳酸乙醇酸/羟基磷灰石(RGD-PLGA/HA)支架材料的体外细胞相容性。方法采用贴壁法对兔骨髓基质细胞(BMSCs)进行体外矿化诱导培养,扩增后与实验A组(RGD-PLGA/HA)、实验B组(PLGA/HA)分别进行体外复合培养,并通过定性及定量法检测BMSCs在材料表面的黏附能力、增殖活力,验证细胞材料复合体的成骨活性。结果兔BMSCs在每组材料的表面均能生长,经体外诱导后在支架材料的表面形成钙结节,实验A组细胞的黏附及增殖能力均强于实验B组。结论兔BMSCs与新型多孔RGD-PLGA/HA支架材料有良好的相容性。     

骨质疏松动物模型研究现状与进展

骨质疏松（osteoporosis，OP）是一种常见的全身性骨骼代谢性疾病，可导致骨质脆性增加和骨折倾向，危害个人健康，加重社会公共医疗卫生负担。关于OP的科学研究离不开OP动物模型的构建，目前造模方法主要包括诱导建模和基因工程建模两类。诱导建模包括手术诱导、药物诱导、饮食诱导、失用性诱导等，常用动物包括大鼠、小鼠、兔、羊、猪、狗、斑马鱼和非人类灵长类动物。基因工程建模则多通过基因编辑技术将外源性基因插入动物基因组或对动物自身基因进行突变、敲除、过表达等使得动物具有骨质疏松特性，目前常用动物有小鼠和斑马鱼。不同的动物模型和建模方法各具优缺点，应综合考虑具体研究目的和关键科学问题，建立最合适的OP动物模型。笔者主要对目前各种骨质疏松动物建模方法及应用进行汇总梳理，以期为日后OP发病机制探索、药物筛选、防治手段等研究建模和实验设计提供参考。     

碳纳米管增强型天然复合材料神经导管修复大鼠副神经缺损*☆◆

背景：近年来,纳米技术在组织重建领域的应用研究十分活跃。碳纳米材料应用于骨组织修复的相关报道较多,但应用于周围神经系统修复的报道较少。 目的：应用功能性修饰的碳纳米管作为增强成分改善几丁糖/胶原复合材料神经导管的理化和生物性能,探讨以功能性修饰的碳纳米管增强型复合材料神经导管修复周围神经缺损的疗效。 设计、时间及地点：同体自身对照动物实验,于2005-02/2006-11在上海交通大学医学院口腔组织工程实验室(上海市口腔重点实验室)和上海交通大学薄膜与微细技术实验室(教育部重点实验室)完成。 材料：将碳纳米管与2%的酸溶性几丁糖溶液及胶原按一定比例充分混合,涂覆在模具上,经红外加热成型并达到预期厚度后,干燥脱模制备碳纳米管增强型复合材料导管。以不含碳纳米管的几丁糖/胶原复合材料导管为对照材料。 方法：成年健康雄性Sprague-Dawley大鼠80只,制备4 mm副神经缺损,实验材料组和对照材料组分别应用相应神经导管进行修复。自体神经移植组将切除的神经原位吻接于断端,空白对照组则仅将神经切除掉2 mm,不做处理。左侧为实验侧,右侧为正常对照侧。 主要观察指标：通过神经电生理学、肌肉功能及组织学检测手段对其修复效果进行评价。 结果：应用碳纳米管增强型复合材料神经导管可有效地重建副神经缺损大鼠斜方肌的运动功能。术后再生神经电生理与组织学指标检测结果与自体神经移植的疗效相当,部分指标结果超过自体神经移植。 结论：碳纳米管增强型复合材料神经导管是桥接修复周围神经的理想材料。 关键词：周围神经;碳纳米管;几丁糖;胶原;神经导管 doi:10.3969/j.issn.1673-8225.2009.47.006     

二氧化钛纳米管的制备及其对成骨细胞增殖和碱性磷酸酶活性的影响

目的 探讨阳极氧化过程中不同工艺条件对TiO_2纳米管形貌的影响,并对TiO_2纳米管对成骨细胞增殖和碱性磷酸酶相对活性的影响进行初步评定.方法 采用阳极氧化法在钛基底表面制备TiO_2纳米管,通过控制阳极氧化电压(5、15、20和25 V)、作用时间(1.5和3 h)以及阳极化后冲洗工艺(是否行超声处理),得到不同结构的TiO_2纳米管,扫描电镜观察TiO_2纳米管管径和管长.以未行阳极氧化的钛试件为对照组,以行阳极氧化(阳极氧化电压为15 V,作用时间为3 h,反应后行超声清洗)的钛试件为纳米管组;在两组钛试件表面培养成骨细胞,用扫描电镜观察接种2 h后的细胞形态;用甲基噻唑基四唑(MTT)检测培养24、48、96 h后细胞的增殖情况;用碱性磷酸酶半定量测试培养7、14、21 d后细胞的碱性磷酸酶活性.结果 阳极氧化的电压可以影响TiO_2纳米管的管径和管长.细胞在纳米管表面的铺展范围大于对照组.培养96 h后纳米管组吸光度值为(0.62±0.02).对照组为(0.55±0.03),两组差异有统计学意义(P＜0.05).21 d后纳米管组碱性磷酸酶相对活性[(130.8±5.1)A405/mg]与对照组[(109.6±4.5)A_(405)/mg]的差异有统计学意义(P＜0.05).结论 阳极氧化的工艺条件,特别是电压可以控制TiO_2纳米管形貌,TiO_2纳米管结构可促进成骨细胞的早期黏附、增殖和碱性磷酸酶的活性.