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31.
人骨形成蛋白4基因修饰的组织工程化骨的实验研究 总被引:6,自引:0,他引:6
目的 探讨基因治疗与组织工程方法相结合促进成骨的效果。方法 应用亚克隆法构建真核表达载体 pEGFP hBMP 4。贴壁法培养兔骨髓基质干细胞 (bonemarrowstromalcells,bMSCs) ,体外转染pEGFP hBMP 4 ,pEGFP基因并留置空白对照 ,以天然型无机骨为支架材料 ,分别构建组织工程化骨 ,植入裸鼠皮下 (每组 6例 ) ,4周取材 ,进行组织学及新骨成骨面积定量分析。结果成功构建了序列完全正确的 pEGFP hBMP 4表达载体。bMSCs可以在天然型无机骨支架网孔内表面贴壁生长。裸鼠体内实验表明术后 4周转染pEGFP hBMP 4基因组支架材料中已大部由新骨充满 ,新骨面积大于对照组 (P <0 0 5 )。结论 应用hBMP 4基因转染的bMSCs作为种子细胞构建组织工程化骨 ,可望为骨缺损的修复提供一种更为理想的方法 相似文献
32.
目的:探讨发夹状核酶阻断人乳头状瘤病毒16(HPV16)转化口腔上皮细胞的能力及可能的机制。方法:设计合成HPV16E6特异性发夹状核酶基因;构建重组真核表达载体;脂质体介导转染HPV16诱导的永生化口腔上皮细胞(HIOEC);空白载体对照;潮霉素筛选;斑点杂交检测细胞中核酶的表达;PCR、RT-PCR和免疫细胞化学分别检测细胞中HPV16E6的DNA、RNA和蛋白表达;荧光染色、流式细胞仪检测、生长曲线绘制观察细胞生物学特性的改变。结果:成功构建含HPV16E6特异性发夹状核酶的重组真核表达载体pcDNA-RZE6;转导筛选后,获得阳性克隆HIOEC-RZE6和空白载体对照HIOEC-pcDNA;HIOEC-RZE6中核酶转录、HPV16E6RNA和蛋白表达下降,细胞增殖减缓,出现凋亡;HIOEC-pcDNA中未见同样变化。结论:HPV16E6特异性发夹状核酶可以抑制HPV16E6表达,并阻断HIOEC进一步恶变,诱导细胞凋亡。 相似文献
33.
骨组织工程中基因修饰的种子细胞的研究进展 总被引:1,自引:0,他引:1
骨组织工程是骨缺损修复和重建的主要发展方向,使用高效的种子细胞构建组织工程化骨,是目前研究的热点之一。研究者们利用组织工程和基因工程相结合的原理,通过转基因方法改造种子细胞,从而提高了种子细胞的成骨效率和组织工程化骨的质量。本文就目前研究较多的基因修饰的种子细胞情况作一综述。 相似文献
34.
目的:应用辛伐他汀(simvastatin)作用于脂肪干细胞,研究其对细胞生长、成骨、成血管分化的影响;利用β-磷酸三钙(β-tricalcium phosphate,β-TCP)三维支架材料负载辛伐他汀,与脂肪干细胞复合,构建组织工程骨,用于兔颅骨缺损模型的修复。方法:原代培养兔脂肪干细胞(rabbit adipose-derived stem cells, rASCs),分别以含0、0.01、0.1和1 μmol/L辛伐他汀的培养液培养,计数法检测细胞数目;以0、0.05、0.1 μmol/L浓度辛伐他汀培养ASCs,1、7 d后,实时定量PCR检测成骨、成血管基因的表达(RUNX2、OPN、OCN、VEGF); 7 d后行ALP染色;14 d后行茜素红染色。12只新西兰大白兔颅顶双侧8 mm缺损,分别以4组材料修复(A: β-TCP,B: β-TCP/Cell,C: β-TCP/Sim,D: β-TCP/Cell/Sim),每组6例,植入8 周后取材,进行组织学观察。采用SPSS17.0软件包对数据进行统计学分析。结果:0.05 μmol/L辛伐他汀对脂肪干细胞RUNX2、OCN、OPN和VEGF等成骨、成血管基因的表达具有明显促进作用,碱性磷酸酶染色和von Kossa染色更为明显;植入体内8周后,β-TCP/Cell/Sim组材料的成骨面积显著大于其他3组。结论:0.05 μmol/L辛伐他汀在体外对ASCs具有明显的促成骨作用,载辛伐他汀β-TCP复合脂肪干细胞可促进兔颅骨缺损的修复。 相似文献
35.
目的观察新型生物材料多孔磷酸钙的生物相容性及复合骨髓基质干细胞(BMSCs)异位成骨情况。方法体外培养第2代Beagle犬BMSCs,转染绿色荧光蛋白(GFP)后与多孔磷酸钙(CPC)复合培养,获得最佳复合浓度,倒置和荧光显微镜、扫描电镜下观察BMSCs黏附和生长情况,复合体植入裸鼠皮下8周观察异位成骨。结果BMSCs转染GFP与多孔CPC复合培养1 d,细胞从材料中爬出,形态正常,7 d可见细胞伸出伪足,分泌基质;复合体可异位成骨。结论多孔CPC生物相容性好,是一种较理想的骨组织工程支架材料。 相似文献
36.
种植体表面纳米改性的研究进展 总被引:2,自引:0,他引:2
种植体在机体内形成的骨整合决定着种植术的临床成功率,它与种植体的表面几何形貌和化学成分有很大的关系。随着纳米技术的发展,种植体表面纳米改性成为重要研究方向。下面就种植体表面纳米改性的化学成分和几何形貌作一综述。 相似文献
37.
骨组织工程再生技术有望对因肿瘤、外伤等造成的颌面部骨缺损进行修复。表面图案化在骨组织工程中占有重要地位。微接触印刷技术是一种通过弹性压模与基材接触,从而将压模上的材料转移至基材上形成图案的新兴技术,可用以转移聚合物、生物大分子等多种墨水,其最大特点在于能实现高通量、高精度的表面图案化,现已得到广泛应用。本综述归纳总结微... 相似文献
38.
AExperimentalStudyontheMicromorphorogicalEfectofNd∶YAGLaserinEndodonticTherapyZhuQingping(朱庆萍)SunWeibin(孙卫斌)YuWeiyi(俞未一)Jian... 相似文献
39.
创伤、炎症、肿瘤、先天畸形所引起口腔颌面部骨缺损的修复一直是口腔医学的难题,而组织工程已成为骨缺损修复新的研究热点。下面就骨组织工程及其在口腔医学领域的研究进展作一综述。 相似文献
40.
目的:应用AdBMP-2基因修饰体外培养的山羊耳软骨细胞,并与F127pluronic支架材料复合,进行裸鼠皮下异位植入研究,探索BMP-2基因修饰高等哺乳动物软骨细胞促进软骨组织重建的可行性。方法:体外培养山羊耳软骨细胞,转染AdBMP-2和AdLacZ基因,X-gal则染色检测基因转染效率。将基因修饰的细胞与可吸收生物材料Pluronic F127复合形成细胞-生物材料复合物,并注射到裸鼠皮下,分别在术后2周和4周取材,观察2周标本CollX染色,4周标本X—gal、阿利新蓝、BMP-2及VEGF免疫组化染色。结果:50pfu/细胞可以获得80%的转染效率.AdBMP-2组在2周时出现大量成熟的软骨组织.4周时出现较多的骨样组织,BMP-2和VEGF染色强阳性:而AdLacZ组2周时尚未形成明显的软骨样组织,4周出现小块的软骨组织,未见骨样组织及VEGF阳性表达。结论:实验条件下,BMP-2基因转染早期即促进了软骨的成熟和分化,但随后发生了骨化,提示可尝试将其应用于软骨原位缺损或筛选更为理想的生长因子,以促进软骨再生。 相似文献