复合BMP-2/bFGF的多孔磷酸钙修复种植体周围骨缺损的实验研究

目的:研究多孔磷酸钙人工骨(porous calcium phosphate cement,CPC)与重组人骨形成蛋-2(recombinant humanbone morphogenetic protein 2,rhBMP-2)/碱性成纤维细胞生长因子(basic fibroblast growth factor,bFGF)复合构建的组织工程骨修复种植体周围骨缺损的成骨效果.方法:拔除4只beagle犬的双侧下颌第2、3、4前磨牙和第1磨牙后3个月,培养犬的骨髓基质细胞(bone marrow stromai cells,BMSCs),以6×105/ml浓度接种于多孔CPC上;于犬双侧下颌骨拔牙处建立量化的6个骨缺损区(直径7.0mm、深4.0mm),同期植入3.75mm×10mm的Br?nemark种植体,种植体周围骨缺损区分别植入①CPC+BMSCs;②cPc+BMSCs+BMP-2;③CPC+BMSCs+bFGF;④CPC+BMSCs+BMP-2+bFGF;⑤CPC;以空缺作为对照组,在处死前作四环素和钙绿素双次标记,于术后12周取材,进行大体观察和硬组织切片观察.结果:BMSCs/CPC/BMP-2/bFGF复合物组成骨最活跃,缺损区种植体已与骨形成良好的骨结合,骨矿化沉积率高于其它组.结论:BMP-2/bFGF修复骨缺损的成骨作用明显优于单一因子;多孔CPC具有良好的骨引导作用,是一种较理想的临床骨修复材料.     

应用骨髓基质干细胞修复骨缺损的研究进展

骨髓基质干细胞具有明确的成骨潜能,是骨愈合过程中骨化的重要细胞。它具有来源丰富,采集方便,容易在体外培养、诱导、扩增的特点,是组织工程化骨理想的种子细胞。该细胞在体外培养具有较强的传代增殖能力,外源目的基因易于导入,因此也是骨缺损基因治疗较为理想的靶细胞。本文就应用骨髓基质干细胞作为组织工程化骨的种子细胞和基因治疗的靶细胞来修复骨缺损的进展作一综述。     

骨形成蛋白话导成骨信号转导机制研究进展

骨形成蛋白具有明确的诱导成骨能力，对其诱导成骨作用的细胞和分子机制也有了深入的研究。骨形成蛋白信号首先通过靶细胞表面的受体，经Smads蛋白介导，传导至细胞核内，在Cbfal等辅助调节因子的作用下，启动成骨基因的表达。本文就骨形成蛋白诱导成骨信号转导机制的研究进展作一综述。     

氯化镧对骨髓基质细胞与支架复合物骨矿化能力的影响

目的:观察氯化镧(LaCl2)干预后的体外培养的骨髓基质细胞(BMSCs)与脱钙冻干骨(MDBM)复合后的异位威骨能力.方法:将经过5.564×102、5.554、5.564×10-2μg/mL 3种浓度La3+干预的第3代BMSCs、空白对照组和骨形成蛋白-2阳性对照组细胞与fdDBM复合后回植入裸鼠皮下,8周后对回植标本做组织学分析、X线密度测定及钙磷含量测定.结果:回植物组织切片显示各组标本均可见新生的骨组织样结构.La3+干预各组的X线密度及钙磷含量均数与空白支架组比较差异均有显著性.但La3+"干预各组组间差异不具统计学意义.结论:5.564×102、5.564、5.564×102μg/mL 3种浓度的La3+均能促进组织工程骨矿化,以5.564 μg/mL的LaCl3促进骨矿化作用较强.     

上颌窦底提升的研究进展

上颌窦底提升是有效解决上颌骨后部骨量不足的方法之一,能为后期种植体的成功植入提供保证。长期以来,利用自体髂骨提升上颌窦底被视为"金标准"。但取髂骨术后,疼痛、感染是其常见并发症。组织工程技术和细胞因子的应用,克服了传统方法的不足,成为上颌窦提升的新进展。本文就此作一综述。     

基因修饰的组织工程化骨研究进展

利用促进成骨的蛋白多肽基因转染体外培养扩增的种子细胞，构建基因修饰的组织工程化骨，通过种子细胞表达基因产物，可有效地促进新骨的形成，为骨缺损的修复提供一种理想的方法。本文就基因修饰组织工程化骨的构建及其促进成骨的研究作一综述。     

植入（注入）式药物缓释系统局部间质化疗的研究进展

将一定的赋形剂负载抗癌药物制备成缓释系统，经不同方式植（注）入肿瘤或瘤周组织间质中，或直接植入肿瘤术后瘤床，实施局部化疗，提高局部药物浓度，降低全身毒副反应，该给药方式称为间质化疗，可用于保存器官外形和功能而替代手术疗法，尤其适用晚期肿瘤的姑息治疗和瘤床植入预防肿瘤术后复发，口腔肿瘤大多位置表浅和直观，便于作间质缓释系统的植入，应为植（注）入式缓释系统局部间质化疗的最佳适用区域。     

中华口腔医学会第四届口腔修复学专业委员会第一次常委会会议纪要

中华口腔医学会第四届口腔修复学专业委员会第一次常委会会议于2010年7月5日在上海召开。出席会议的有中华口腔医学会口腔修复学专业委员会顾问刘洪臣,主任委员张富强,前主任委员冯海兰,候补主任委员王贻宁以及其它付主任委员和常委。会议由中华口腔医学会口腔修复学专业委员会主任委员张富强主持，讨论了专委会近一年来的工作及下一年度的工作计划。     

Runx2、Osterix转录因子过表达驱动内皮细胞成骨分化的机制探讨

目的:探讨Runx2和Osterix (OSX)过表达对人脐静脉内皮细胞(human umbilical vein endothelial cells,HUVECs)成骨分化的调控作用.方法:通过慢病毒载体,将Runx2和Osterix基因分别转染入HUVECs.通过碱性磷酸酶(ALP)染色、半定量活性检测,探讨过表达Runx2和Osterix对HUVECs成骨分化的影响.通过RT-PCR、蛋白免疫印迹、免疫荧光染色检测成骨相关标志物Runx2、OSX、ALP、骨涎蛋白(BSP)、骨桥蛋白(OPN)、骨钙蛋白(OCN)在HUVECs中的表达.采用GraphPad Prism 6.01软件包对数据进行统计学分析.结果:Runx2过表达有利于HUVECs的成骨分化,而Osterix过表达则无此作用.HUVECs转染Runx2过表达慢病毒后,成骨相关基因Runx2、OSX、ALP、BSP、OPN及OCN的转录水平上调,同时Runx2、OSX、OPN及OCN的蛋白表达水平亦有所上调.结论:Runx2过表达可促进HUVECs的成骨分化.     

骨髓基质细胞中Von Hippel-Lindau基因的siRNA表达载体构建及其检测

目的:构建骨髓基质细胞(bone marrow stromal cells BMSCs)中Von Hippel-Lindau(VHL)基因的siRNA表达载体并检测其对BMSCs细胞中VHL基因的干扰作用.方法:根据犬的VHL基因序列设计并合成4对siRNA oligo,然后用载体构建试剂盒进行重组克隆,将4对双链的siRNA oligo分别插人到siRNA表达载体pcDNATM6.2-GW/EmGFPmiR中,构建4个siRNA表达质粒(SR144-1,SR144-2,SR144-3,SR144-4).用载体通用引物进行菌落PCR筛选,筛选得到的阳性克隆进行测序,以验证重组克隆中插入片段序列是否与设计的oligo序列一致.干扰载体瞬时转染BMSCs,通过qPCR和Westerm印迹分别检测干扰载体对目的基因的沉默效果.为了提高转染效率及VHL基因的沉默效果,对SR144-4进行慢病毒干扰载体(pLenti-mi-VHL)构建.结果:通过对构建质粒克隆进行测序,证实重组克隆中插入片段序列与设计的oligo序列一致.转染BMSCs细胞24h和48h后分别用qPCR与Western印迹检测,显示SR144-4干扰效果最理想.通过测序结果比对,插入序列完全正确.pLenti-mi-VHL构建成功.结论:成功构建了BMSCS的siRNA-VHL表达载体,为进一步实验研究奠定了基础.