一株抗人BLys单克隆抗体的制备及其生物学功能研究

研究以稳定高表达BLys的基因转染细胞L-BLys为免疫原,常规免疫BALB/c小鼠,采用B淋巴细胞杂交瘤技术进行细胞融合,L-BLys细胞和天然表达BLys的HL60细胞为抗体筛选阳性细胞株,经免疫荧光标记分析反复筛选和以有限稀释法反复克隆化培养。将获得的克隆4F7培养细胞注射入经致敏的小鼠体内,-抽取的腹水经Protein G亲和层析柱纯化。将纯化所得的抗体作用于经BLys分子刺激的扁桃体B细胞,3H-TdR检测细胞的增殖效率。结果获得1株持续、稳定分泌鼠抗人BLys单克隆抗体的杂交瘤细胞株。该细胞株所分泌的抗体能阻断膜型和可溶性BLys分子对扁桃体B细胞的促增殖作用。对这株单克隆抗体生物学功能的研究表明,这株单抗能特异性识别人BLys分子及阻断膜型和可溶性BLys发挥生物学活性。     

山茱萸总苷抗类风湿关节炎免疫作用机理的初步研究

目的：探讨山茱萸总苷抗Ⅱ型胶原（CⅡ）诱导的类风湿关节炎的免疫作用机理。方法：建立Ⅱ型胶原诱导的类风湿关节炎（CIA）大鼠模型，对山茱萸总苷对大鼠在免疫诱导期、关节炎急性期、慢性缓解期血清中CⅡ抗体的水平、腹股沟引流淋巴结细胞IFN-γ的自发分泌和刺激性分泌以及淋巴结细胞的特异增殖能力的影响进行动态观察。结果：山茱萸总苷对类风湿关节炎有明显的防治作用，特异性抑制免疫大鼠抗CⅡ抗体的产生、腹股沟淋巴结Th1型细胞因子IFN-γ的分泌及细胞增殖。结论：山茱萸总苷抗类风湿关节炎的免疫作用机理之一是抑制CⅡ特异性体液免疫和Th1型细胞免疫。     

患者安全文化调查问卷HS-OPSC 2.0版的评价与思考

患者安全文化测评有助于评估医疗机构的安全状况。美国医疗健康研究与质量机构（AHRQ）发布的HSOPSC是患者安全文化测评工具的典型代表。2019年,AHRQ根据相关意见和建议修订完成了HSOPSC 2.0版,在保留1.0版优势的基础上精简了维度和条目数量,具有良好的信度和效度,可以作为我国医疗机构患者安全文化测评的有效工具。但由于测量结果的定量特征,建议辅以定性研究对潜在文化价值和更深层次文化假设进行深入分析,同时思考如何将测评结果与干预措施结合起来,以更好地评估干预效果。     

氯化钠诱导白木香悬浮细胞合成苯乙基色酮类成分的LC-MS分析

采用超高效液相色谱-串联四极杆静电场轨道阱质谱(UPLC-Q-Exactive-MS)结合超高效液相色谱-串联三重四极杆质谱(UPLC-QQQ-MS/MS)对氯化钠诱导的白木香悬浮细胞中苯乙基色酮类成分进行定性和定量分析。UPLC-Q-Exactive-MS和UPLC-QQQ-MS/MS均采用Waters T3色谱柱(2.1 mm×50 mm, 1.8μm),以0.1%甲酸水溶液(A)-乙腈(B)为流动相分别进行梯度洗脱色谱分离,质谱分析均采用电喷雾正离子模式采集。利用UPLC-Q-Exactive-MS从氯化钠诱导的白木香悬浮细胞样品中鉴定出苯乙基色酮类化合物47个,其中简单苯乙基色酮及其苷22个、四羟基四氢苯乙基色酮10个、三元氧环四氢苯乙基色酮15个。通过UPLC-QQQ-MS/MS技术对氯化钠诱导处理后白木香悬浮细胞中25个苯乙基色酮进行了定量。通过2种液质联用技术快速、高效地对氯化钠诱导白木香悬浮细胞中苯乙基色酮类成分进行定性、定量分析,为利用体外培养等生物技术制备沉香中主要的药效和香味物质苯乙基色酮提供重要参考。     

中药重肌灵片体内对EAMG大鼠IFN-γ、IL-4、TGF-β水平的影响

目的:探讨重肌灵片通过影响细胞因子水平治疗EAMG的作用机制。方法:用从电鳐电器官提取的含N2-AChR粗提液加完全弗氏佐剂免疫Lewis大鼠制成EAMG,ELISA法检测大鼠免疫后第7周血清及细胞培养上清中IFN-γ、IL-4、TGF-β含量以及血清中总IgG、IgG1和IgG2水平。结果:在血清及细胞培养液中:模型组与CFA组比较IFN-γ、IL-4升高(P<0.01);重肌灵大、中剂量组与模型组比较IFN-γ、IL-4含量均显著下降(P<0.01,P<0.05),而TGE-β含量均显著升高(P<0.05);在血清中:模型组与CFA组比较,血清各抗体含量均显著增高(P<0.01);重肌灵大、中剂量组总IgG、IgG1、IgG2水平均低于模型组(P<0.01或P<0.05)。结论:IFN-γ异常增高与EAMG发病相关,重肌灵通过上调TGF-β含量,抑制IFN-γ、IL-4过量分泌,从而降低抗N2-AChR总IgG、IgG1和IgG2水平。     

瓦氏位摄影方法的改进

0　引言　以往对于鼻窦、上颌窦检查时 ,大都采用俯卧式瓦氏位摄片检查 [1 - 3] ,将患者俯卧在摄影台上 ,X线垂直拍照 .该方法较为传统 ,摆放时操作人员和患者都不方便 .因此 ,照片上经常出现鼻窦或上颌窦显示不很清楚 ,影响诊断结果 .经过反复实践我们改用立位后 ,效果良好 ,且摆放位置方便准确、迅速 ,患者舒适、容易配合 .提高照片的成功率 ,对疾病的诊断具有重要的意义 .现将拍摄方法介绍如下 :1　材料和方法1.1　材料　采用 GENDEX,ATC5 2 5 ,X光机 ,高速增感屏 ,收稿日期 :2 0 0 1-0 7-0 1;　修回日期 :2 0 0 1-0 8-10作者简介 :…     

肾上腺螺旋CT扫描技术

0　引言　肾上腺体积小 ,上下极直径仅 5 cm[1 ] .常规 CT对肾上腺的扫描因呼吸动度的影响 ,常造成同一层面重复扫描或病变部位漏扫 ,而螺旋 CT(Spiral CT,SCT)广泛应用于临床以来 ,克服了呼吸运动的影响 ,弥补了常规 CT扫描中的缺陷 ,已成为肾上腺疾病的重要检查方法 .1　对象和方法　本组患者 40 (男 2 3,女 17)例进行肾上腺扫描 ,年龄 14～ 70 (平均 47.7)岁 . 2 0例患者使用西门子 SO-MATOM AR.C CT扫描仪 ;另外 2 0例患者使用 PQ6 0 0 0 SCT扫描仪 .两组均使用的是 Nemoto高压注射器 ,非离子造影剂 . 40例患者扫描前均行肠…     

脑胶质瘤中P16、P15蛋白表达的研究

目的 :研究脑胶质瘤发生、演化及预后与P16、P15蛋白表达的关系。方法 :采用免疫组织化学技术对 45例石蜡标本中P16、P15蛋白进行了检测。结果 :Ⅲ～Ⅳ级胶质瘤中P16、P15蛋白表达阴性率 (6 0 %、6 5 % )高于Ⅰ～Ⅱ级 (2 8%、2 0 % ) ,P <0 .0 5、P <0 .0 1。 结论 :胶质瘤发生、演化及恶性程度可能与P16、P15蛋白阴性表达有关 ;P16、P15蛋白阴性表达在一定程度上反映了胶质瘤细胞的恶性生物学行为。     

IL-8单抗对炎症性中性粒细胞浸润的阻断作用

目的　建立可特异性识别IL - 8抗原并具有拮抗IL - 8生物学活性的单抗 ,观察抗体对炎症性损伤的保护作用。方法　采用常规方法免疫和细胞融合 ,经间接ELISA检测和有限稀释亚克隆、筛选 ,建立稳定分泌抗人IL - 8的杂交瘤细胞株。通过趋化阻断实验 ,观察抗体在体外拮抗IL - 8生物学活性的作用 ;以家兔为模型 ,通过皮肤注射LPS诱导局部产生炎症反应 ,同时静脉注射IL - 8抗体 ,观察抗体对炎症性损伤的保护作用。结果　经筛选获得 3株稳定分泌IL - 8单抗的杂交瘤细胞株 ,一株为IgG1(SI98) ,另两株为IgM (SI96、SI97)。这 3株单抗在体外具有阻断IL - 8对中性粒细胞的趋化作用 ;在体内 ,皮肤局部注射LPS产生的炎症反应 ,导致大量中性粒细胞的浸润 ,体内预先注射IL - 8抗体后 ,可明显阻断中性粒细胞在炎症部位的浸润。结论　 3株单抗均可作为拮抗IL - 8生物学功能的拮抗剂 ,阻断炎症反应过程中中性粒细胞的浸润。