荧光定量聚合酶链反应检测儿童病毒性脑炎病原体的研究

目的 探讨荧光定量聚合酶链反应(FQ PCR)检测儿童病毒性脑炎脑脊液(CSF)中的病原体的价值。方法 应用定性聚合酶链反应(PCR)对2002年1月至2004年10月保定市儿童医院收治的病毒性脑炎患儿78例的CSF标本筛选,检测最常见的引起病毒性脑炎的6种病毒,对单纯疱疹病毒(HSV)，柯萨奇病毒(CV)，埃可病毒(EV)阳性者做FQ-PCR检测，其中HSV分别在3个时点(治疗前、治疗中、出院时)检测DNA拷贝数。结果 定性聚合酶链反应阳性标本FQ PC检测100%阳性,HSV-DNA拷贝数在3个时点有统计学差异，病毒核酸拷贝数与临床表现一致。结论 FQ-PCR可作为儿童病毒性脑炎早期诊断的有效方法之一，动态观察HSV-DNA含量有助于指导治疗，估计疾病的发展和预后. Abstract Objective To discuss the value of using FQ-PCR to check pathogen in children viral encephalitis.Methods From Janurary,2002 to October,2004,PCR was used to select the children of viral encephalitis and check the six kinds of common virus which cause viral encephalitis and then we used FQ-PCR to check the children with HSV(+),CV(+)EV(+) while checking the copied number of HSVE-DNA before,during and after treatment.Results It was 100% that FQ-PCR checked the sample of PCR (+).The number of HSV DNA was different at three time points. The copied number of virus DNA was consistent with clinical symptom.Conclusion FQ-PCR is one of the effective methods to diagnose the children's viral encephalitis.Observing the number of HSV DNA is beneficial for instructing,treating and estimating the development and future disease. Key words Children’viral encephalitis;Pathogen;FQ-PCR;PCR     

空肠浆膜层覆盖修补术治疗巨大十二指肠溃疡穿孔1例

患者男,62岁,农民。因上腹突发性剧痛,并扩散至全腹3d,拟上消化道穿孔、弥漫性腹膜炎收住,入院时T39.2℃,WBC21×10~9/L,N0.78,精神差,腹中度膨胀,全腹压痛与反跳痛并腹肌紧张,以右上中腹尤著,肠鸣音消失,未扪及腹块与肝脾。测P94次/min,BP12/6.5kPa,腹穿(右下腹)抽出混浊淡黄色脓性液。遂给输液,纠正水电解质。置胃肠减压管,作好术前准备后急行剖腹探查术,术中见腹腔内淡黄色脓性液约2500ml,抽吸干净后,见十二指肠球部前壁(幽门下2cm处)有一巨大穿孔,约2.7cm×2.5cm,强行溃疡切除术有困难,很可能损伤附近器官,故决定行空肠浆层覆盖修补术。打开胃结肠韧带后游离屈氏韧带,经横结肠后将空肠近端拉上去,在距离屈氏韧带30cm处,以小针、细线将空肠浆肌层间断缝于十二指肠球部穿孔周围,缝针间距约0.4 cm,距     

hTNFA-hPgnK5融合蛋白的原核表达及测定

目的　获得 h TNFα- h Pgn K5融合蛋白基因 ,在原核细胞中表达融合蛋白 ,探索其活性 .方法　 PCR法改造h TNFα基因 ,消除其终止密码子 ,构建 h TNFα- h Pgn K5融合蛋白基因 .在大肠杆菌 DH5α中表达该融合蛋白 ,测定其体外抑制肿瘤细胞或血管内皮细胞增殖的活性 .结果　 h TNFα基因经 PCR法改造 ,去除了终止密码子 ,并在 3 端引入 Bam HI位点 .h TNFα- h Pgn K5融合蛋白基因构建完成 ,并在原核系统中获得表达 ,免疫印迹反应表明该融合蛋白具有 h Pgn K5免疫活性 .体外实验表明该融合蛋白可抑制肿瘤细胞和血管内皮细胞的增殖 .结论　 h Pgn K5蛋白可与 h TNFα一起表达 ,该融合蛋白有抑制肿瘤细胞和血管内皮细胞增殖的活性     

含凝血酶切点的hTNFα—hPgnK5的原核表达及活性鉴定

目的 在原核细胞中表达融合蛋白hTNFα-hPgnK5并鉴定其活性,方法 构建hTNFα-hPgnK5基因的表达载体。并在大肠杆菌DH5α中进行表达,以MTT法测定该融合蛋白体外抑制肿瘤细胞或血管内皮细胞增殖的活性。结果 成功地构建了hTNFα-hPgnK5的免疫活性。体外实验表明,该融合蛋白具有抑制肿瘤细胞和血管内皮细胞增殖的活性。结论 hPgnK5蛋白可与fhTNFα可共同表达,表达产物可抑制肿瘤细胞和血管内皮细增殖。     

白念珠菌人工诱导耐药株唑靶酶三磷酸鸟苷环水解酶Ⅰ功能区的序列分析

目的:研究羊毛甾醇14α-脱甲基酶(14-DM)DNA序列中三磷酸鸟苷(GTP)环水解酶Ⅰ功能区域基因突变与白念珠菌对氟康唑耐药性的关系.方法:体外采用氟康唑结合阿苯达唑进行人工耐药性诱导1株白念珠菌标准菌株和2株临床分离对氟康唑敏感株,将获得的3株人工诱导耐药白念菌株和另外2株临床分离对氟康唑耐药的白念菌株,通过PCR扩增目的片段,并克隆到pMD-18T载体上,测序分析诱导前后基因序列碱基变化.结果:经体外人工耐药性诱导后,标准白念珠菌菌株和临床分离敏感白念珠菌菌株GTP环水解酶Ⅰ功能区域多处碱基突变,部分碱基变化引起了氨基酸的改变,与临床分离耐药白念珠菌在碱基变化及其导致的编码氨基酸变化相似.结论:14-DM GTP环水解酶Ⅰ功能区域基因突变与白念珠菌的耐药性有相关性.     

锁定钢板治疗肱骨外科颈粉碎性骨折28例

目的：观察锁定钢板治疗肱骨外科颈粉碎性骨折的临床疗效。方法回顾性分析2007年1月~2011年12月28例锁定钢板治疗肱骨外科颈粉碎性骨折病例的临床资料。结果术后随访6~12（平均8）个月,无伤口感染,无骨不连,未发现畸形愈合及肱骨头坏死。骨折愈合时间为4~8（平均4）个月。术后功能恢复：优19例,良7例,可2例。优良率为92.8%。结论锁定钢板治疗肱骨外科颈粉碎骨折具有并发症少、肩关节功能恢复好的优点。     

缩唇式腹式呼吸配合在减少PICC置管异位中的应用

目的：分析缩唇式腹式呼吸配合减少PICC置管异位的临床效果。方法选择300例行PICC置管治疗的肿瘤患者,随机分为观察组与对照组,各150例。对照组行常规PICC置管操作,观察组在对照组基础上指导患者侧头行缩唇腹式呼吸配合。置管术后均进行胸部正位X线照片,统计2组PICC导管异位发生情况。结果观察组发生PICC置管异位8例,发生率5.33%;对照组28例,发生率18.67%;观察组异位发生率低于对照组,差异有统计学意义（χ2=12.63,P<0.01）。结论在PICC置管中患者配合以缩唇式腹式呼吸,可使胸廓容积增大,胸腔负压增高,加速血液回流,能有效减少导管异位发生率,值得临床推广。     

高校青年教师网络思想政治教育工作探析

网络的快速发展,给思想政治教育带来了机遇和挑战。高校青年教师既是教师又是青年的身份特点,决定其在网络思想政治教育工作中有着特殊的地位和作用。要高度重视青年教师网络思想政治教育面临的困境,进一步更新工作理念,增强工作的互动性,提升工作的说服力,积极构建话语体系,切实推动高校青年教师网络思想政治教育工作的创新发展。     

党参微卫星引物筛选及群体遗传多样性研究

目的 利用筛选的党参多态性微卫星引物进行党参群体遗传多样性研究。方法 利用磁珠富集法分离党参核基因组微卫星引物,并选取党参4个野生居群48个样品进行遗传多样性分析。结果 筛选出了10个能成功扩增党参样品的微卫星引物;这些引物扩增产物的等位基因数目为5～14个,观察杂合度范围为0.446～0.833,期望杂合度范围为0.697～0.895;使用4个党参近缘物种（轮叶党参、球花党参、鸡蛋参和长叶党参）进行引物通用性检测,发现有5对引物（Cpi01、Cpi04、Cpi06、Cpi07和Cpi08）能同时在4个物种中成功扩增。结论 筛选出的多态性微卫星引物能用于党参的遗传多样性和群体遗传结构研究,同时也能够用于党参属其他近缘物种的群体遗传学研究。     

安乳颗粒质量标准研究

目的建立安乳颗粒的质量控制方法。方法采用薄层色谱法对方中赤芍、当归、丹参、香附、乳香、没药进行定性鉴别,采用高效液相色谱法分别对芍药苷及阿魏酸进行含量测定。芍药苷采用Agilent C18柱（4.6 mm×250 mm,5μm）色谱柱,流动相为乙腈-水（13∶87）,检测波长230 nm,流速1.0 mL/min,柱温30℃。阿魏酸采用Diamonsil C18（4.6 mm×150 mm,5μm）色谱柱,流动相为50%甲醇-乙腈-0.1%冰醋酸（25∶5∶70）,检测波长320 nm,流速1.0 mL/min,柱温35℃。结果在薄层色谱中能检测出上述6种主要药材;芍药苷在0.12～1.20μg范围内有良好的线性关系（r=0.999 8）,平均回收率为98.07%,RSD=1.03%。阿魏酸在0.021 6～0.129 6μg范围内有良好的线性关系（r=0.999 6）,平均回收率为99.52%,RSD=0.99%。结论本方法简便、准确,可用于安乳颗粒的质量控制。