抗震救灾大批量献血者标本ELISA自动化检验的实现

目的优化全自动酶免分析仪检测步骤,及时准确检测抗震救灾大批量献血者标本。方法在FAME全自动酶免分析仪用户软件中编制实验步骤,指定洗液洗板单元和试剂分配单元,优化工作表。结果实现4台FAME一次检验49个酶标板的目标。结论经优化设计FAME工作表,提高仪器使用效率,保证了抗震救灾大批量献血者标本ELISA自动化检验的质量和数量。     

结核分支杆菌分泌蛋白Mtb81克隆、表达、纯化及血清学诊断价值的初步研究

目的 通过结核分支杆菌Mtb81基因在大肠杆菌中的表达, 获得大量纯化的重组Mtb81蛋白.通过Western -blot和ELISA方法评价Mtb81抗原,检测血清中抗结核抗体的灵敏度和特异性,为进行结核病血清学诊断打下基础.方法 应用PCR技术扩增结核分支杆菌H37Rv Mtb81DNA序列;构建pET24b-Mtb81重组质粒,然后转化入表达宿主大肠杆菌BL21(DE3);通过Western-blot鉴定重组Mtb81蛋白,采用Chelating Sepharose Fast Flow纯化重组 Mtb81蛋白;将纯化的重组Mtb81蛋白通过Western-blot、酶联免疫吸附试验(ELISA)方法,检测结核病人及正常人血清中的抗体,应用Microsoft Excel软件统计分析实验数据.结果 pET24b-Mtb81在大肠杆菌BL21(DE3)细胞内以包涵体形式存在,表达量占菌体总蛋白的30%左右.纯化后的Mtb81样品经SDS-PAGE和光密度扫描分析表明其纯度为95%左右.纯化后的Mtb81蛋白通过Western-blot鉴定,结果显示:加入结核病人血清抗体于目的蛋白位置有一条显色带,而加入正常人血清组则无显色反应;酶联免疫吸附试验(ELISA)方法,检测30例结核病人及正常人血清中的抗体,结果显示:rMtb81的特异性和灵敏度分别为96%、93%.结论 pET24b -Mtb81大肠杆菌工程菌株能高效表达Mtb81蛋白,Western-blot结果证明表达蛋白具有很好的免疫反应性和抗原特异性;ELISA结果证明重组Mtb81检测结核病人血清中的抗结核抗体,具有较高的灵敏度和特异性.     

复合手术治疗颅内复杂破裂动脉瘤的效果分析

目的探讨应用复合手术治疗颅内复杂破裂动脉瘤的安全性及短期有效性。方法回顾性连续纳入2014年12月至2017年3月南方医科大学南方医院神经外科行复合手术治疗的复杂破裂动脉瘤患者14例,其中急性自发性蛛网膜下腔出血性动脉瘤13例,复发动脉瘤栓塞术中出血1例。12例动脉瘤行塑形夹闭术,术中均行DSA造影评估动脉瘤夹闭效果。2例动脉瘤行颅内外血管旁路移植并动脉瘤孤立术,DSA造影评估桥血管通畅性后行血管内球囊闭塞术孤立动脉瘤。结果 14例患者,11例造影后急诊行复合手术,2例择期手术,1例栓塞术中出血急诊行抢救性手术。12例动脉瘤夹闭术中造影提示3例需要调整动脉瘤夹,其中2例载瘤动脉狭窄,1例夹闭不全,调整后均夹闭满意。2例颅内外血管旁路移植术中造影均通畅,一期行动脉瘤孤立术。术后1例患者因严重血管痉挛,自动出院。1例术后出现灌注压突破,行血肿清除并减压术,出院时格拉斯哥预后评分(GOS)3分。余患者术后均无新发神经功能障碍。对13例患者术后3~24个月行临床随访,均无新发神经功能障碍,GOS 5分8例,4分5例。6例患者行DSA复查,其中4例动脉瘤夹闭未见动脉瘤复发,载瘤动脉通畅;2例血管旁路移植动脉瘤无复发,载瘤动脉及吻合血管通畅。结论初步观察,应用复合手术方式治疗颅内复杂破裂动脉瘤安全且有效。     

改进Tripure法提取鉴定小鼠组织总RNA

目的改进从新鲜动物组织提取、鉴定纯度及完整性较高总RNA的技术方法。方法实验于2005-05-16/08-25在解放军第三军医大学大坪医院创伤分子生物学实验室进行。用健康4～6周龄昆明种小鼠70只,颈椎脱臼法处死,取肺组织约100mg。在TripureIsolation试剂说明书基础上,对提取组织RNA的操作步骤进行调整改进,包括:①迅速组织取材,可不将组织切割成碎块而直接中速匀浆。②匀浆头夹层每次使用前后一定要彻底清洗干净;新鲜组织使用5mL离心管匀浆。③吸取含RNA的三相分层上清液时,吸取250μL即可。④RNA沉淀后,用无水乙醇再洗1次。并对常规琼脂糖凝胶电泳做适当改进用于鉴定RNA的质量,改进的电泳方法:①电泳RNA所用器械均用肥皂水、体积分数为0.03的H2O2清洗2遍,1g/L焦碳酸二乙酯处理的灭菌双蒸水冲洗,室温晾干备用。②用新配的0.5×TBE配制10g/L琼脂糖凝胶,倒胶时Goldview核酸染料直接加入凝胶中。③琼脂糖凝胶板放入电泳槽后再加入经灭菌的0.5×TBE。电泳电压5V/cm,电泳时间1.5h后凝胶成像系统拍照记录。结果①取提取的总RNA5μg进行电泳1.5h后,可见28S,18S,5S3条清晰的RNA条带,其中28S条带的亮度约为18S条带的2倍,5S条带隐约可见。②用该法提取的新鲜组织RNA,经电泳鉴定及反转录-聚合酶链反应检测,显示RNA的纯度及模板性较好。全部操作过程可在2.5h内完成。结论用改进方法提取的新鲜组织RNA质量稳定,电泳鉴定快速可靠。     

腺苷三磷酸结合盒转运蛋白A1在动脉粥样硬化中的作用及其受控特点

目的:分析腺苷三磷酸结合盒转运蛋白A1(ATP binding cassette transport proteion A1,ABCA1)在动脉粥样硬化中的作用及其受控机制。资料来源:以“腺苷三磷酸结合盒转运蛋白A1”为检索词,应用计算机在Pubmed、中文全文数据库CNKI中检索2000-01/2006-11腺苷三磷酸结合盒转运蛋白A1与人有关的期刊文献,前者限定语言种类为英文,后者限定语言种类为中文。资料选择:对英文文献390篇、中文文献58篇初审。纳入标准:①与ABCA1结构及功能有关的文献。②与核受体有关的文献。③与载脂蛋白AⅠ有关的文献。④与ABCA1基因的突变、单核苷酸多态性有关的文献。⑤ABCA1蛋白、核受体、ABCA1基因的突变、单核苷酸多态性与动脉粥样硬化有关的文献。排出标准:①与哮喘、癌症、代谢性疾病有关的文献。②相关文献中内容相似的文献。③综述文献。资料提炼:选取3篇涉及ABCA1结构、功能的基础内容;18篇涉及与核受体的内容;2篇涉及载脂蛋白AⅠ的内容;7篇涉及ABCA1基因的突变、单核苷酸多态性的内容;9篇涉及ABCA1蛋白、核受体、ABCA1基因的突变、单核苷酸与动脉粥样硬化的内容。其中30篇列为参考文献。资料综合:分析了腺苷三磷酸结合盒转运体A1的结构和功能的基本情况;文献显示腺苷三磷酸结合盒转运体A1在动脉粥样硬化发病过程中起重要作用;核受体对腺苷三磷酸结合盒转运体A1的表达有调节,且腺苷三磷酸结合盒转运体A1受基因调控。结论:腺苷三磷酸结合盒转运体A1可能是与动脉粥样硬化密切相关的重要候选基因;深入探讨其机制,有利于开发新药防治动脉粥样硬化。     

口腔科医生全程干预对头颈部恶性肿瘤放疗并发症影响的临床研究

目的 减少头颈部恶性肿瘤患者放疗并发症.方法 对247例治疗组头颈恶性肿瘤放疗患者实施口腔科医生全程干预并与213例对照组患者进行比较.结果 治疗组与对照组均有不同程度的黏膜反应及口干、味觉减退,但在远期并发症发生率及患者对痛苦感受度方面明显低于对照组.结论 口腔科医生全程干预可有效减少头颈部放疗并发症,提高患者生存质量.     

DXJ.2型电子血球计数仪的使用与维护

山东三联电子公司生产的DXJ．2型电子血球计数仪，结构简单，便于维修．操作方便，重复性好，现将我们使用与维护的体会介绍如下：1试剂1．l稀今液NaCIg克，NaN30．5克，加蒸馏水到1000毫升。用动细菌滤器滤过。长期保存，不长细菌。1．2溶血刑十六烷基三甲基漠化按4克，冰乙酸2毫升，无水乙醇30毫升，加蒸馏水至100毫升。G；细菌滤器过滤、本溶血剂在低室温下不会析出结晶。1．3管道清洗液聚乙二醇辛基本基醚30毫升，加生理盐水到1000毫升，用滤纸过滤。1．4白细胞计数质控液2使用2．l仪器校正DXJ．2电子血球计数仪一般调孔电流至“6…     

急性白血病骨髓基质细胞肿瘤坏死因子α分泌活性及其意义

目的：探讨急性白血病（ＡＬ）骨髓基质细胞肿瘤坏死因子α（ＴＮＦα）分泌活性。方法：应用体外骨髓基质细胞培养法及ＴＮＦα生物活性检测法，对ＡＬ患者２０例及正常对照者１０名的骨髓基质细胞培养上清中的ＴＮＦα活性水平进行检测，并同步检测了患者血清、骨髓白血病细胞培养上清中的ＴＮＦα活性。结果：ＡＬ骨髓基质细胞形成能力较差，但其ＴＮＦα活性明显高于对照组（Ｐ＜０．０５）；少部分急性髓系白血病（ＡＭＬ）骨髓白血病细胞能自发分泌ＴＮＦα；患者血清中的ＴＮＦα活性显著高于正常对照（Ｐ＜０．００１）。结论：ＡＬ患者骨髓基质细胞存在量和质的异常，ＴＮＦα的异常分泌可能是导致ＡＬ增殖的一个重要因素     

脑卒中维持性康复100例疗效观察

目的：探讨维持性康复对脑卒中预后的影响。方法;急性脑卒中患190例．随机分为康复组及对照组。康复组在临床治疗的同时进行早期康复及维持性康复,对照组仅给临床常规治疗．分别于第1～6周、3个月、6个月、12个月时对两组进行单盲评定。运动功能用Fugl-Meyer评分,日常生活活动(ADL)用Barthel指数评分．神经缺损用神经功能缺损程度评分标准评分。结果：康复组Fugl-Meyer及Barthel指数得分明显优于对照组(P<0.005),神经功能缺损程度康复组比对照组减少更显(P<0．001),一年后这种差异依然存在。结论：急性脑卒中患进行早期康复,能明显改善肢体运动功能及生活自理能力。维持性康复能影响远期疗效,有助于回归社会。     

住院病人自杀时值班护士心理状况的质性研究

[目的]了解病人自杀时值班护士的心理状况,为病人自杀时值班护士的心理干预提供重要参考和依据。[方法]选择现象学研究方法,深入访谈经历病人自杀的15名值班护士,并用Colaizzi 7步分析法分析资料。[结果]15名值班护士经历病人自杀事件后的心理体验提炼为3大主题:紧张与恐惧、自责与内疚、压力感。[结论]管理者要关注病人自杀时值班护士的心理状况,给予及时的心理辅导,避免产生职业疲溃和倦怠。同时强调护士要加强心理学知识与预防自杀相关知识的学习,并呼吁医院应重视和完善职业损害教育。