荷人肺癌小鼠皮下移植瘤模型的建立及其生物学特性初探

背景与目的 为了更好地研究肺癌的治疗方法,建立起可靠的动物评价模型迫在眉睫.本研究的目的是研究建立肺癌原代组织块小鼠移植瘤模型的成熟方法,观察移植瘤的肿瘤生物学特性,在建模方法及基本特征等方面来证明该肿瘤模型的合理性和科学性,以期为肿瘤研究提供更有效的实验动物模型.方法 取人新鲜完整肺癌组织块移植于NOD/SCID小鼠右侧前肢肩背部皮下,或经皮肺穿刺取得肿瘤小块移植于BALB/c裸小鼠肾包膜下.待皮下肿瘤增大,将其切下传代于裸小鼠右侧前肢肩背部皮下.观察移植瘤生物学特性,并取肿瘤行常规病理切片及CEA、细胞角蛋白、Ki67免疫组化检测,将原代肿瘤和移植瘤进行EGFR 18-21外显子和K-Ras 12,59外显子基因检测,采用流式细胞仪检测移植瘤细胞的细胞周期.结果 本研究进行了11例肺癌组织的NOD/SCID小鼠和裸鼠建模,建成3例可多次成功传代的腺癌、小细胞肺癌和鳞癌模型.传代移植成功率高.荷瘤小鼠生长情况良好,生存期长.各代移植瘤模型的组织病理学及免疫组化表型、EGFR和K-Ras基因检测均与来源肺癌组织相一致.移植瘤细胞周期中S期延长,提示瘤细胞有增殖活性.结论 本研究在国内首次利用新鲜的完整肺癌组织建成了荷肺癌NOD/SCID小鼠及裸鼠模型,并传代移植于裸鼠,建模成功率为27%.移植瘤较好地保留了人原发肺癌的恶性特征及组织病理学、生物学特性,是一种接近人体的肺癌模型,可为肺癌研究提供良好的实验平台.     

滋肾宁心胶囊治疗围绝经期失眠伴焦虑及抑郁55例临床观察

目的:观察滋肾宁心胶囊治疗围绝经期失眠伴焦虑及抑郁的临床疗效。方法:将100例围绝经期失眠伴焦虑及抑郁的患者分为2组,治疗组55例采用滋肾宁心胶囊治疗,对照组45例采用坤泰胶囊治疗,4周为1个疗程,2个疗程后,观察2组患者的睡眠质量、焦虑和抑郁改善情况。结果:失眠疗效总有效率治疗组为80.0%,对照组为82.2%,2组比较,差异无统计学意义(P0.05);2组睡眠质量改善情况比较,差异无统计学意义(P0.05);2组焦虑及抑郁改善情况治疗前后组内比较及治疗后组间比较,差异均有统计学意义(P0.05)。结论:滋肾宁心胶囊治疗围绝经期失眠伴焦虑、抑郁有较好的临床疗效。     

LEEP配合化湿清毒法治疗重度宫颈糜烂的临床研究

目的探讨利普刀(LEEP)配合田淑霄教授化湿清毒法治疗重度宫颈糜烂的临床疗效。方法将100例重度宫颈糜烂患者随机分为治疗组、对照组各50例,2组均予LEEP手术治疗,治疗组LEEP术后口服健脾益气、化湿清毒中药2周,治疗前及治疗后8周观察记录2组患者中医证候积分,比较宫颈创面愈合时间、阴道出血时间、排液时间及糜烂面恢复情况。结果术后8周,2组宫颈创面全部愈合,宫颈表面光滑。治疗组宫颈创面愈合时间、阴道分泌物持续时间、阴道出血时间均较对照组显著缩短(P均0.05)。治疗后2组中医证候积分均较治疗前显著降低(P均0.05),且治疗组明显低于对照组(P0.05)。治疗组中医证候疗效显著优于对照组(P0.05)。结论田淑霄教授化湿清毒法配合LEEP治疗重度宫颈糜烂疗效显著,可明显减轻患者临床症状,充分体现了中西医结合治疗的优势。     

卡介苗与羟基喜树碱预防国人膀胱癌复发的Meta分析

目的比较卡介苗（BCG）与羟基喜树碱（HCPT）膀胱灌注治疗对膀胱癌复发的预防作用及治疗毒性。方法收集关于BCG与HCPT膀胱灌注治疗膀胱癌的比较性研究文献,进行系统分析。采用优势比（OR）及95%可信区间（CI）作为评价比较疗效及毒性差异的指标。统计软件为RevMan5。结果共入选16个临床研究,包括705例接受BCG和905例接受HCPT膀胱灌注治疗的患者。Meta分析结果提示,BCG组1年内复发率高于HCPT组（P=0.009）,但2年内复发率和长期复发率差异无统计学意义（P值分别为0.84、0.99）。BCG组膀胱刺激症状、血尿和发热的发生率显著高于HCPT组（P均〈0.00001）。结论 HCPT膀胱灌注预防膀胱癌1年内复发率低于BCG,2年内复发率和长期复发率无差异,但治疗毒性明显低于BCG。     

可溶性尿激酶受体的免疫放射测定及其临床应用

目的　以免疫放射测定法（IRMA）,特异性地检测可溶性尿激酶受体（suPAR）,以了解其生理水平及在病理状态下的改变。方法　应用2株抗人suPAR的单克隆抗体,用氯胺T法以125I标记其中一株单抗,建立suPAR双抗夹心IRMA,测定健康成人、良性肿瘤及恶性肿瘤患者血清suPAR的水平,并比较健康成人和阵发性睡眠性血红蛋白尿（PNH）患者血浆suPAR的水平。结果　IRMA检测suPAR的最小可测值为1.95μg/L,单抗与重组人uPAR的亲和常数为4.75×109mol/L,平均回收率为1.013,批内及批间CV分别为(6.40±2.57)%和(10.48±2.65)%。62名健康成人血清suPAR水平为（2.71±1.12）μg/L,21名健康成人血浆suPAR水平为(1.73±0.96)μg/L。与健康成人相比,24例良性肿瘤患者血清suPAR水平增高,而47例恶性肿瘤患者血清suPAR水平则显著增高。PNH患者血浆suPAR水平也较健康成人增高。结论　suPAR以IRMA法检测敏感性、重复性好,准确性较高,恶性肿瘤患者和PNH患者血清（浆）suPAR水平明显增高。     

大肠异时多原发癌一例报告

1　临床资料患者男 ,6 8岁。 1986年因间歇性便血 1个月 ,在本院行纤维结肠镜及病理检查确诊为直肠高分化腺癌 ,病变距肛缘 10cm ,于 1986年 9月行直肠癌根治术 (Dixon术 ) ,术后病理证实为直肠高分化腺癌 (DuckB期 )。术后行静脉化疗FAM方案 ,化疗一年后失访。 1994年因右下腹肿块 1个月来本院就诊 ,经纤维结肠镜及病理检查确诊为升结肠中分化腺癌 ,于 1994年 12月行升结肠癌根治术 ,术后病理证实为升结肠中分化腺癌 (DuckC期 )。术后行腹腔化疗FDM方案 +静脉化疗FM方案 ,每次化疗时检测腹腔癌胚抗原 ,化疗两年后失访。 2 0 0 2年 10…     

神经内外科175例医院感染危险因素的调查

目的　神经内外科是医院感染的高危科室之一 ,为了有效地降低医院感染发病率 ,提高医疗质量 ,对其医院感染的危险因素进行探讨。方法　对 2 0 0 0～ 2 0 0 1年两年间收治的 1796例住院患者进行前瞻性加回顾性的医院感染调查。结果　 1796例住院患者查出 175例医院感染 ,医院感染发病率为 9.74 % ,与我院总的医院感染率3.36 %相比差异有显著性 (P<0 .0 1) ;感染例次数为 2 2 2例 ,感染例次发病率为 12 .36 % ,与我院总感染例次发病率 3.94 %相比差异有显著性 (P<0 .0 1) ;感染部位的构成比以呼吸道为最高 ,第 2位是泌尿道 ;危险因素有原发性疾病危重、老年患者多、侵入性操作多、抗生素使用不合理 (二联使用率高达 6 6 .6 7% ,未进行药敏试验而按经验用药的达 5 6 % ) ;病原体以 G- 杆菌为主 (6 0 .36 % ) ,对多种抗生素耐药。结论　需采取综合性的防范措施才能有效地降低高危病区的医院感染发病率。     

甘油三酯和高密度脂蛋白胆固醇比值与胰岛素抵抗的关系

目的分析甘油三酯（TG）、高密度脂蛋白胆固醇（HDL-C）的浓度比值与胰岛素抵抗的关系,为筛查胰岛素抵抗的高危人群提供依据。方法利用2012年江苏省慢性病及危险因素监测流动人口专题调查资料,采用问卷调查、体格测量、实验室检测等方法收集人口统计学信息、慢性病防治情况、行为危险因素情况及血脂等信息。采用多元线性回归分析指标的影响大小,采用受试者工作特征曲线（ROC）及非条件logistic回归分析指标的筛查价值。结果 TG/HDL-C比值对空腹胰岛素水平具有显著影响（标准化偏回归系数：男性为0.243,女性为0.254,P〈0.01）,对于胰岛素抵抗的ROC曲线下面积：男性为0.73（95%CI：0.69-0.77）,女性为0.63（95%CI：0.58-0.67）。以TG/HDL-C比值男性≥1.12、女性≥0.71作为筛查胰岛素抵抗的适宜切点,比值高于切点人群的胰岛素抵抗患病率是比值低于切点人群的2.43倍,患病风险是低于切点人群的2.7倍（95%CI：2.1-3.5）。结论 TG/HDL-C比值与空腹胰岛素水平密切相关,对于在成年非糖尿病人群中筛查胰岛素抵抗具有一定价值。     

A组链球菌M蛋白二价DNA疫苗表达载体的构建与鉴定

目的构建含A组链球菌M蛋白基因(emm基因)1型和3型特异性抗原决定簇基因的重组质粒。方法用PCR技术从40381137(T1)型和31281187(T3)型A组链球菌中分别扩增emm基因,插入T 载体后测序、blast后分别确定为emm1和emm3基因型,再从emm1和emm3基因分别扩增105 bp目的基因,用聚合酶链反应(polymerase chain reaction,PCR)技术将两目的片段连接起来。插入真核表达载体 pSecTaqB中,阳性质粒克隆经酶切和测序鉴定。结果从40381137(T1)和31281187(T3)A组链球菌株的基因组成功克隆emm基因,经测序及blast后分别确认为emm1型和emm3型;用pst I和BamH I酶切重组质粒pSemml-3、测序均显示插入正确。结论成功构建A组莲球菌的emm1型和emm3型二价真核表达载体,为下一步研究表达功能及表达蛋白的生物活性打下基础。     

人血清反应因子基因的原核表达及鸡卵黄多克隆抗体的制备

目的 在原核系统中表达人血清反应因子(serum response factor,SRF)基因,制备鸡卵黄抗SRF抗体并鉴定其特性.方法 构建SRF表达载体PGEX-T-2-SRF,并在大肠杆菌中以异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(isopropy-β-D-thiogalactoside,IPTG)诱导表达.表达产物经谷胱甘肽-S转移酶(glutathione-S-transferase,GST)亲和层析柱纯化后,用十二烷基硫酸钠聚丙烯酰胺凝胶电泳(sodium dodecyl sulphate polyacrylamide gel electrophoresis,SDS-PAGE)进行鉴定.用纯化的SRF免疫海蓝白母鸡,制备鸡抗SRF抗体.抗体的效价及特异性用蛋白质印迹技术进行测定和分析,免疫荧光鉴定其在心肌细胞中的定位.结果 构建的重组质粒PGEX-4T-2-SRF在大肠杆菌中得到高表达,诱导表达的蛋白存在于包涵体和细菌裂解上清液中,纯化的SRF经SDS-PAGE鉴定呈单一条带.以纯化的SRF免疫制备了鸡抗SRF抗体.蛋白质印迹技术结果表明,该抗体可与原核表达的SRF特异性结合,抗体效价为1:5000.免疫荧光证实该抗体可以和心肌细胞的细胞核特异性结合.结论 在原核细胞中表达了SRF制备的鸡抗SRF的抗体对SRF能进行特异性结合.