TGF-β1对大鼠高危角膜移植免疫排斥反应中植片IL-10表达的影响

目的 研究重组腺相关病毒介导的转化生长因子-β1(recombinant adeno-associated virus mediated transforming growth factor-β1,rAAV-TGF-β1)对大鼠高危角膜移植免疫排斥反应的抑制作用以及对白细胞介素-10(interleukin-10,IL-10)表达的影响.方法 构建rAAV-TGF-β1真核表达质粒载体.40只角膜新生血管化的SD大鼠行穿透性角膜移植术.实验组(20只):角膜植片预浸泡在rAAV-TGF-β1(10×1012v.g·L-1)的达尔伯克必需基本培养液F12混合培养液中37℃孵育30 min;对照组(20只):角膜植片预浸泡在0.1 mol·L-1磷酸盐缓冲液中37 ℃孵育30 min.裂隙灯观察TGF-β1对大鼠角膜植片存活时间、排斥反应指数的影响.术后第1周、第2周、第4周、第2个月对角膜植片行组织病理学检查,免疫组织化学方法检测角膜组织中IL-10的表达.结果 对照组角膜植片平均存活时间为(10.40±2.45)d,实验组为(18.70±1.51)d,比对照组显著延长,差异具有显著统计学意义(P＜0.01);术后第2周实验组角膜植片排斥反应指数(3.48±0.86)明显低于对照组(7.65±0.42),差异具有显著统计学意义(P＜0.01).IL-10在术后主要表达于角膜的上皮层与内皮层.术后各时期实验组IL-10的表达明显高于对照组,差异具有统计学意义(P＜0.05).结论 rAAV-TGF-β1能显著延长角膜植片存活时间,抑制大鼠高危角膜移植免疫排斥反应,其机制与提高角膜组织中IL-10的表达有关.重组腺相关病毒是眼科基因治疗的有效载体.     

高糖对原代培养的视网膜神经节细胞中Toll样受体4表达的上调作用及其意义

背景 研究发现糖尿病性视网膜神经病变的发生早于糖尿病视网膜病变(DR),视网膜神经节细胞(RGCs)的损伤是DR的早期特征性改变.研究表明,Toll样受体4(TLR4)在糖尿病大鼠视网膜中呈高表达,但TLR4与糖尿病性RGCs损伤的关系尚不明确. 目的 研究高糖对原代培养的大鼠RGCs中TLR4表达的影响,为糖尿病性视网膜神经病变的预防和治疗以及靶向药物研究提供依据. 方法采用木瓜蛋白酶消化法从出生后1 ～3d的SPF级大鼠视网膜中分离RGCs并进行纯化培养,采用免疫荧光技术检测RGCs特异性标志物Brn3a的表达以鉴定培养的细胞.将培养的细胞分为正常对照组及10、20、30 mmol/L葡萄糖组,分别于不同浓度葡萄糖培养后24 h及48 h收集细胞,分别采用实时荧光定量PCR法和Western blot法测定RGCs中TLR4 mRNA及其蛋白的相对表达量.结果 细胞接种后贴壁生长并呈近圆形,纯化培养后24 h细胞体积逐渐增大且呈聚集样岛状生长,可见突触和轴突.培养的细胞中Brn3a为阳性表达.葡萄糖培养后24 h岛样细胞群周边细胞轮廓不清,反光弱,葡萄糖培养后48 h部分细胞内结构消失,仅残留细胞轮廓,可见大量细胞碎片.细胞培养后24 h,10、20和30 mmol/L葡萄糖组RGCs中TLR4 mRNA相对表达量分别为0.945±0.237、1.180±0.193和0.827±0.213,培养后48 h分别为1.509±0.422、2.433±0.617和1.435±0.410,均明显高于正常对照组的0.600±0.099和0.724±0.302,差异均有统计学意义(均P＜0.01).细胞培养后24 h,10、20和30 mmol/L葡萄糖组RGCs中TLR4蛋白相对表达量分别为0.442±0.147、0.626±0.128和0.330±0.153,培养后48 h分别为0.464±0.121、0.930±0.441和0.394±0.158,均明显高于正常对照组的0.090±0.050和0.094±0.070,差异均有统计学意义(均P＜0.01).结论 高糖环境下大量体外培养的RGCs细胞内结构消失,同时细胞中TLR4表达量上调,提示RGCs中TLR4的过量表达可能与高糖诱导的RGCs损伤有关.     

人工晶状体植入治疗白内障后准分子激光上皮下角膜磨镶矫治的安全性

背景：白内障摘除联合人工晶状体植入部分患者晶状体植入后依然存在不同程度屈光不正现象,可以采用准分子激光上皮下角膜磨镶或准分子激光原位角膜磨镶矫正屈光不正。 目的：观察应用准分子激光上皮下角膜磨镶矫治白内障摘除联合人工晶状体植入后残留屈光不正的效果。 方法：纳入白内障摘除联合人工晶状体植入后残留屈光不正38例(45眼),其中男22例,女16例;年龄24-74岁;角膜中央厚度490-590 μm,准分子激光上皮下角膜磨镶前裸眼视力为0.1-0.3,矫正视力为0.6-1.0。均应用准分子激光上皮下角膜磨镶进行矫治,术后随访12个月,观察裸眼视力、最佳矫正视力、屈光度、眼压等情况。 结果与结论：大部分患者于术后3-6 h后有异物感、疼痛等眼部刺激症状,术后2 d内有不同程度的眼痛、畏光、流泪等角膜刺激症状,术后7 d左右角膜上皮基本愈合,20 d左右视力基本恢复到最佳。术后12个月时裸眼视力均≥0.6,其中26眼视力达到或超过1.0(58%),35眼(78%)术后裸眼视力达到或超过术前最佳矫正视力。术后12个月裸眼视力为0.6-1.2。球镜度数从术前平均-2.5 m^-1降至术后-0.5 m^-1,柱镜度数从术前平均-3.85 m^-1降至术后-0.53 m^-1。12眼发生眼压偏高,5眼有0.5级角膜上皮下雾状混浊形成。结果说明准分子激光上皮下角膜磨镶治疗白内障摘除联合人工晶状体植入后屈光不正是安全有效的。 中国组织工程研究杂志出版内容重点：生物材料;骨生物材料; 口腔生物材料; 纳米材料; 缓释材料; 材料相容性;组织工程全文链接：     

亲水性丙烯酸酯人工晶状体植入后的生物相容性和并发症

背景：亲水性丙烯酸酯材料的生物相容性良好,在临床得到广泛的应用。但随着亲水性丙烯酸酯人工晶状体临床应用的时间延长,其长期的生物相容性及稳定性问题逐渐显现。目的：讨论亲水性丙烯酸酯人工晶状体植入后的生物相容性及稳定性问题和处理方法。方法：应用计算机检索万方数据库及PubMed数据库2005至2014年与亲水性丙烯酸酯人工晶状体临床应用相关的文献,中文检索词为“亲水性丙烯酸酯,人工晶状体/人工晶体”;英文检索词为“hydrophilic acrylic,intraocular lens”。检索得到618篇中英文文献,根据纳入排除标准选择35篇文献进行总结。结果与结论：亲水性丙烯酸酯人工晶状体具有良好的柔性可折叠性,折叠后能柔软而缓慢的展开,因此植入时所需切口小,手术操作简便时间段,患者损伤小。而且亲水性丙烯酸酯材料的细菌及炎性细胞的黏附性差,所以亲水性丙烯酸酯人工晶状体植入后的感染性眼内炎发生的概率低,但其植入后的后囊混浊发生率高,植入后也存在一定的屈光不正和视觉质量问题,这些问题的解决有赖于人工晶状体材料和设计的不断改进和更新。中国组织工程研究杂志出版内容重点：组织构建;骨细胞;软骨细胞;细胞培养;成纤维细胞;血管内皮细胞;骨质疏松;组织工程     

外伤性白内障摘除人工晶體植入临床观察

本文报告外伤性白内障摘除人工晶體植入術78例78眼。外伤至手術时间为5天到7年。Ⅰ期后房型人工晶體植入76眼,其中聯合小梁切除1眼,聯合玻璃體前段切除1眼;Ⅱ期后房型人工晶體植入2眼。術后随访3個月至3年,視力在0.4以上者54眼,占70％。術后常見并發症为角膜水腫、前房滲出物、前房出血,后期为后囊混濁。对手術时期的選择,并發症及其处理進行了讨论。     

自杀的神经生物学研究近况

自杀是人类有意自我毁灭而采取的伤害自身的一种行为,常导致躯体受伤,甚至造成死亡,因而严重危害人类健康和生命安全.目前研究结果表明,自杀不是一种简单的应激反应,日益增多的证据表明自杀行为与神经生物学因素密切相关,本文对近年自杀行为的神经影像学、神经生化、神经电生理学、神经内分泌及分子遗传学等方面的研究进展做一综述.     

助手照明四切口双手操作玻璃体切割手术

目的:评估助手照明四切口双手操作玻璃体切割手术的临床应用效果。方法:对本院53例需行双手操作法玻璃体切割手术患者行助手照明下四切口双手操作玻璃体切割手术,术后随访6-16月,平均13.2月,对手术效果及术中、术后并发症进行评估。结果:53例患者中术后视网膜成功复位51例(96.2%),未复位2例(3.8%);53例中发生医源性视网膜裂孔1例(1.9%),术中玻璃体出血8例(15%);53例术中均未发生巩膜切口并发症;视网膜复位的51例中6例发生复发性视网膜脱离(12%),但均与巩膜切口无关。结论:助手照明四切口双手操作玻璃体切割手术术中、术后未发现明显的并发症,且具有较多术中操作优势,故有较大的临床应用前景。     

重庆市大学生自杀未遂及相关因素分析

目的了解重庆市大学生自杀未遂的特征、发生率及其危险因素。方法采用北京回龙观医院北京心理危机研究与干预中心提供的《自杀态度与心理健康状况问卷(大学版-Ⅳ)》在重庆市随机抽取的11所大学中调查了9808名大学生,了解自杀未遂发生情况及相关因素,并通过多因素logistic模型分析其危险因素。结果大学生自杀未遂报告率为1.7%(169/9808),男女性别构成比为1∶1.8;多因素logistic回归分析显示,其危险因素排列为:近一年感到绝望的频率高(OR=4.2,95%CI:3.1～5.9)、一级亲属有过自杀行为(OR=2.8,95%CI:1.7～4.7)、认识的人有过自杀行为(OR=2.8,95%CI:2.1～3.9)、已发生性行为(OR=2.7,95%CI:1.9～3.9)、近1个月心理问题对学习及日常生活的影响(OR=2.5,95%CI:1.8～3.6)、女性(OR=2.5,95%CI:1.8～3.5)、其他血缘关系亲属有自杀行为(OR=2.4,95%CI:1.6～3.4),P值均小于0.001。结论大学生自杀现象并不罕见,应在高校制定和执行有针对性的自杀预防计划。     

塞来昔布对糖尿病大鼠视网膜组织生长相关基因的影响

目的:使用选择性环氧合酶-2(COX-2)抑制剂塞来昔布对实验性糖尿病大鼠视网膜生长相关基因(GRO-α)影响。方法:40只SD雄性大鼠随机分为4组,即正常组、糖尿病组、糖尿病+蒸馏水灌胃组、糖尿病+塞来昔布灌胃组,每组10只。通过腹腔注射1%链脲佐菌素(STZ)建立糖尿病动物模型,饲养3月后,处死大鼠取视网膜,HE染色观察视网膜形态学变化,SYBR荧光实时定量PCR检测视网膜组织中COX-2、血管内皮生长因子(VEGF)、GRO-α mRNA的表达变化,Western blot检测大鼠视网膜中COX-2、VEGF、GRO-α蛋白的表达变化。结果:3月后,COX-2、VEGF、GRO-α mRNA和蛋白质在糖尿病组和糖尿病+蒸馏水灌胃组表达最多,糖尿病+塞来昔布灌胃组表达多于正常组,而少于糖尿病组和糖尿病+蒸馏水灌胃组,组间两两比较,糖尿病组和糖尿病+蒸馏水灌胃组无统计学差异(P=0.121),其余各组间比较均有显著性差异(P<0.05)。结论:塞来昔布可能可以通过抑制糖尿病视网膜GRO-α mRNA及蛋白的表达来抑制糖尿病视网膜组织VEGF的表达。     

二十二碳六烯酸对视网膜光感受器细胞超微结构影响的实验研究

目的观察二十二碳六烯酸（DHA）对大鼠视网膜光感受器细胞超微结构的影响。方法 14只雌性SD大鼠随机分成正常组、造模组、DHA组,灌胃15d后造模,分别在造模后12h、24h和48h处死动物,取眼球行电镜观察。结果腹腔内注射一定量的MNU可以明显损伤视网膜光感受器细胞的超微结构。而DHA可抑制MNU对视网膜光感受器细胞超微结构的损伤。结论 DHA对视网膜光感受器细胞有较好的保护作用,有望成为一种延缓视网膜色素变性病程进展的有效药物。