苦参碱对对乙酰氨基苯酚诱导的小鼠药物性肝损伤的保护作用及机制

目的 探讨苦参碱（KSJ）对对乙酰氨基苯酚（APAP）诱导的小鼠药物性肝损伤的保护作用及机制。方法 雄性C57BL/6小鼠40只,随机分为空白对照组、APAP组、KSJ大剂量组［2.8 mg/（kg·d）］、KSJ中剂量组［1.4 mg/（kg·d）］和KSJ小剂量组［0.7 mg/（kg·d）］,每组8只。空白对照组和APAP组小鼠尾静脉注射10%葡萄糖溶液10 ml/（kg·d）;KSJ大剂量组、KSJ中剂量组和KSJ小剂量组分别注射相应浓度的KSJ葡萄糖溶液10 ml/（kg·d）,连续给药7 d。末次给药后1 h,除空白对照组外其他各组小鼠腹腔注射APAP 400 mg/kg,复制急性药物性肝损伤模型,空白对照组小鼠予以等量无菌生理盐水进行一次性腹腔注射,模型复制结束后禁食不禁水24 h。24 h后,小鼠眼球采血,检测天门冬氨酸氨基转移酶（AST）、丙氨酸氨基转移酶（ALT）、超氧化物歧化酶（SOD）和丙二醛（MDA）水平;酶联免疫吸附试验（ELISA）检测IL-6、TNF-α水平;取肝脏组织行苏木精-伊红（HE）染色,观察小鼠肝脏病理学改变。结果 与APAP组比较,KSJ对APAP诱导的小鼠药物性肝损伤具有一定的保护作用,包括降低血清AST和ALT水平（P <0.05）,提高SOD活力,降低MDA含量（P <0.05）,以及减轻肝脏病理损伤程度和肝细胞凋亡程度。同时KSJ对APAP刺激诱导产生的TNF-α和IL-6具有抑制作用（P <0.05）,并且呈剂量依赖性。结论 KSJ对APAP诱导的小鼠药物性肝损伤具有保护作用,其机制与降低炎症因子水平,降低氧化应激,提高抗氧化能力有关。     

不同类型HBV感染者外周血Treg/Th17细胞的变化及意义

目的:探讨不同类型HBV感染者外周血中CD4+ Foxp3+ Treg/Th17细胞的变化及意义.方法:选取15例急性乙型肝炎(Acute Hepatitis B,AHB)患者、40例慢性乙型肝炎(Chronic hepatitis B,CHB)患者、40例无症状携带者(Asymptomatic HBV carriers,AsC)及30例健康对照者,分别采用流式细胞术、RT-PCR和ELISA检测外周血CD4+ Foxp3+ Treg/Th17细胞百分率、核转录因子foxhead winged-helix box protein 3 (Foxp3)/retinoid-related orphan receptor gamma-t (RORγt) mRNA的表达以及血浆转化生长因子-β1(Transforming growth factor-31,TGF-β1)/IL-17的水平.结果:AHB组患者CD4+ Foxp3+ Treg/CD4+T细胞百分率、Foxp3 mRNA及TGF-β1水平与正常对照组相比无明显差异(P＞0.05);而CD4+ IL-17 +/CD4+T细胞百分率、RORγtmRNA及IL-17水平与正常对照组相比明显升高,差异有统计学意义(P＜0.05).CHB组患者CD4+ Foxp3+ Treg/CD4+T细胞百分率、Foxp3 mRNA、TGF-31水平及CD4+ IL-17 +/CD4+T细胞百分率、RORγt mRNA、IL-17水平与正常对照组相比均明显升高,差异有统计学意义(P＜0.05);与正常对照组相比,AsC组患者CD4+ Foxp3+ Treg/CD4+T细胞百分率、Foxp3 mR-NA、TGF-β1水平及CD4+ IL-17 +/CD4+T细胞百分率、RORγt mRNA、IL-17水平无明显差异(P＞0.05).结论:在不同类型HBV感染者外周血中Treg/Th17细胞失衡,Treg/Th17细胞可能与HBV感染的状态有关.     

朱砂七总蒽醌对S180、H22、EAC动物移植瘤的影响

目的研究朱砂七总蒽醌的体内抗肿瘤作用。方法将昆明小鼠移植S180、H22、艾氏腹水瘤（EAC）肿瘤细胞后,分为模型组,环磷酰胺组,朱砂七总蒽醌低、中、高剂量组,观察朱砂七总蒽醌对荷S180、H22小鼠实体瘤的抑瘤率和艾氏腹水瘤（EAC）小鼠的生存时间。结果朱砂七总蒽醌具有抑制S180、H22小鼠肿瘤的作用,抑制率在40％以上,与对照组比较差异有显著性意义（P〈0．01）;朱砂七总蒽醌也能明显延长艾氏腹水瘤（EAC）小鼠的生存时间,各剂量组呈现出量最茭系,生命延长率在50％以上。结论朱砂七总蒽醌在体内对S180、H22艾氏腹水瘤（EAC）均有抑制作用。     

非酒精性脂肪肝小鼠肝内PPARα与Bax的表达及脂代谢变化

以高脂饮食诱导小鼠建立非酒精性脂肪肝模型,通过检测肥胖抵抗型非酒精性脂肪肝(nonalcoholic fatty liver disease,NAFLD)小鼠肝内PPARα及Bax基因的表达及脂肪酸氧化代谢的水平,初步探讨非酒精性脂肪肝小鼠体内脂代谢变化的分子生物学机制。结果显示,与空白对照组相比,高脂模型组中小鼠体重下降,但肝湿重及肝指数却明显上升,肝脏内PPARα基因表达受抑制,脂质代谢能力减弱,且NAFLD小鼠中PPARα基因的表达随着脂肪肝的病变程度而变化;Bax基因在高脂饮食组中表达量上调,肝细胞凋亡水平上升。说明非酒精性脂肪肝小鼠体内PPARα基因表达减少而Bax基因表达上调,肝脏脂肪病变加重,从而引起脂肪酸代谢水平的下降,增加脂质的异位沉积,增强了肝细胞的凋亡。     

山仙颗粒含药血清诱导S-180肉瘤细胞凋亡及其对bcl-2、Bax基因表达的影响

目的:探讨山仙颗粒(SXG)含药血清诱导体外培养S-180肉瘤细胞的凋亡作用及其对凋亡相关基因bcl-2及Bax表达的影响。方法:以不同浓度的山仙颗粒含药血清作用于体外培养的S-180肉瘤细胞,待24、48、72h后倒置显微镜下观察细胞形态变化并制备细胞涂片,采用TUNEL法检S-180肉瘤细胞凋亡率,免疫细胞化学(SABC)检测S-180肉瘤细胞中凋亡相关基因bcl-2、Bax表达的变化。结果:SXG含药血清可明显诱导S-180肉瘤细胞凋亡,导致其细胞形态改变,并能使bcl-2表达降低(P<0.01)、Bax表达增强(P<0.01),且呈浓度和时间依赖性。结论:SXG含药血清能有效诱体外培养的S-180肉瘤细胞凋亡,其机制可能与抑制bcl-2表达,促进Bax表达有关。     

红景天苷抗肿瘤机制的研究概况

红景天苷(salidroside)作为一类天然植物源中药,有着治病范围广、低毒且高效等优点,大量研究已表明,红景天苷可以通过不同途径抑制肿瘤的增殖,从而达到治疗肿瘤的目的。通过对有关红景天苷抗肿瘤机制的研究,总结红景天苷可以阻滞癌细胞周期、诱导癌细胞向正常细胞分化、诱导癌细胞发生凋亡或自噬等多个方面在抗癌中发挥作用。     

小鼠胸膜间皮细胞免疫相关基因表达谱与中医藏象理论相关性研究

目的:研究小鼠胸膜间皮细胞(pleural mesothelial cell,PMC)免疫相关基因表达谱的状况。从而探索用现代免疫及基因芯片技术评价解释中医藏象理论的新方法。方法:取8只BALB/c小鼠胸膜组织块剪切成碎块,提取mRNA,经标记、杂交、清洗、芯片扫描、图象采集与数据分析等过程获得基因表达谱。结果:共筛选出小鼠胸膜间皮细胞免疫相关表达基因204条。其中主要有免疫应答及调节基因56条;炎性反应基因32条;非特异性免疫基因14条;T细胞增殖、活化、调节等相关基因23条,B细胞活化、分化、调节等相关基因9条;急性反应期基因5条;抗原加工与提呈基因4条;Ⅱ型超敏反应正向调节基因5条。结论:胸膜间皮细胞既表达免疫相关的正向调节基因亦表达负向免疫相关的调节基因。提示胸膜可能为一免疫协调器官,这对丰富中医藏象理论与肺气的实质将提供分子生物学的基础研究依据与新的思路。     

“健脾益气、解毒通络”方保留灌肠对溃疡性结肠炎患者血清IL-8、TNF-α含量变化及生存质量的影响

目的探讨"健脾益气、解毒通络"方保留灌肠对溃疡性结肠炎患者血清IL-8、TNF-α含量变化及生存质量的影响。方法将符合入选标准的140例溃疡性结肠炎患者采用随机数字表法分为两组,每组70例。对照组给予枯草杆菌二联活菌肠溶胶囊配合美沙拉嗪肠溶片;治疗组在对照组基础上给予"健脾益气、解毒通络"方,两组均1个月为1个疗程;分别对治疗前后血清IL-8、TNF-α、IBDQ生存质量、中医症状评分进行对比分析;并对综合疗效进行评价。结果两组治疗后TNF-α、IL-8均较本组治疗前明显降低,且治疗后两组间比较差异有统计学意义(P0.05)。两组病例治疗后肠道症状、全身症状、情感功能、社会功能和总评分均较本组治疗前明显升高(P0.05)。治疗组治疗后肠道症状、全身症状、情感功能和总评分均较对照组治疗后明显升高(P0.05),而社会功能有升高趋势(P0.05),但差异无统计学意义。两组病例治疗后腹痛腹泻、里急后重、脓血便、肛门灼热、发热评分均较本组治疗前明显降低(P0.05)。治疗组治疗后腹痛腹泻、里急后重、脓血便、肛门灼热均较对照组治疗后明显降低(P0.05),而发热评分有降低趋势(P0.05),但差异无统计学意义。治疗组治疗后总有效率明显高于对照组(P0.05)。结论 "健脾益气、解毒通络"方保留灌肠可改善患者的生存质量、中医临床症状评分,提高临床疗效,主要的作用机制可能与降低血清TNF-α、IL-8水平相关。     

山仙颗粒对S-180荷瘤小鼠T细胞活性及Caspase-3的影响

目的:探讨山仙颗粒(SXG)对S-180荷瘤小鼠T细胞活性及Caspase-3的影响。方法:将60只昆明种小鼠随机选取12只作为空白对照组,其余48只建立S-180荷瘤小鼠模型后随机分为模型组及SXG低(0.025g/m L)、中(0.05g/m L)、高(0.1g/m L)剂量组各12只,空白对照组、模型组每日早晚灌胃生理盐水0.4 m L,其余各组每日早晚灌胃相应剂量药物,连续30天。末次给药24小时后,采用颈椎脱臼法处死小鼠,游离脾脏,剥离肿瘤组织;应用MTT比色法及免疫组织化学法检测荷瘤小鼠脾脏T细胞毒效应及S-180实体瘤组织中Caspase-3的表达。结果:SXG低、中、高剂量组小鼠脾脏T细胞对于S-180荷瘤小鼠细胞的抑制率高于模型组(P0.01),且与SXG浓度呈正相关;各组效应细胞与靶细胞的比例不同,对S-180荷瘤小鼠细胞的抑制作用也不同(P0.01),且与T细胞浓度呈正相关。SXG低、中、高剂量组S-180荷瘤小鼠肿瘤组织中Caspase-3表达率高于模型组(P0.01),且与SXG浓度呈正相关。结论:SXG具有抑制肿瘤生长的作用,其机制可能与其增强T细胞活性进而抑制肿瘤细胞增殖及促进Capase-3介导的肿瘤细胞凋亡有关。     

癌毒清颗粒对肝癌模型小鼠HIF-1α、VEGF、bFGF的影响

目的:研究癌毒清颗粒(AG)对肝癌(HCC)模型小鼠HIF-1α、VEGF、b FGF的影响,探讨AG抗HCC的作用机制。方法:昆明小鼠50只,腋下接种H22肝癌细胞,建立肝癌异位移植瘤模型。于接种24h后,将动物随机分为模型组,AG高、中、低剂量组,氟尿嘧啶组。AG各组给予AG灌胃,氟尿嘧啶组腹腔注射氟尿嘧啶。给药12d后,摘取眼球采血,剥取瘤组织,称取瘤重,瘤组织进行病理组织学检查;ELISA法检测小鼠血清中HIF-1α、VEGF、bFGF的水平。结果:H22肝癌小鼠异位移植瘤模型中,各组体重变化无统计学意义(P0.05)。AG高、中、低剂量组抑瘤率分别为50.91%,35.25%,20.10%,氟尿嘧啶组为43.99%,与模型组比较差异有统计学意义(P0.05),其中AG高剂量组抑瘤效果最佳。与模型组比较,各组小鼠血清HIF-1α、VEGF、b FGF浓度均下降,差异有统计学意义(P0.05)。病理组织显示,AG三组肝癌细胞大小不等,肝癌细胞密度减少,肝癌细胞排列较分散,间质新生血管分布较少,肿瘤细胞坏死数量较多,细胞核着色欠均匀。结论:癌毒清颗粒能遏制H22肝癌小鼠异位移植瘤的生长,遏制程度和药物的剂量有关。癌毒清颗粒抗癌作用机制之一可能是通过下调缺氧微环境中血管生成促进因子VEGF、HIF-α、bFGF的表达,遏制肝癌移植瘤微血管生成。