基因芯片技术在药物毒理学研究中的应用

随着基因芯片技术的发展,逐渐被应用于研究药物的毒性作用及其作用机制。与传统的药物毒理学研究方法比较,基因芯片技术具有周期短、高通量的优势,基因芯片技术的介入也进一步推动了药物毒理学研究的发展。从新药的筛选、毒理安全性评价到临床应用,基因芯片技术将成为贯穿整个药物毒理学研究的重要技术。就近期基因芯片技术在药物毒理学研究中的应用成果进行了回顾总结。     

胃散对胃溃疡模型大鼠胃黏膜保护作用的研究

目的 研究胃散对胃溃疡大鼠胃黏膜的保护作用。方法 采用乙酸烧灼型胃溃疡模型、幽门结扎型胃溃疡模型、乙醇损伤型胃溃疡模型,检测溃疡指数、胃酸总酸度、胃酸分泌速度和胃蛋白酶活性,综合考察胃散对胃溃疡模型大鼠胃黏膜的保护作用。结果 胃散在1、0.5、0.25 g/kg剂量下,对乙酸烧灼型胃溃疡有非常显著的促愈合作用;对幽门结扎型胃溃疡的形成有显著的抑制作用;对乙醇损伤的胃黏膜也有显著的保护作用;对胃液总酸度、胃酸分泌速度和胃蛋白酶活性有明显抑制作用,显著增加胃液分泌量。结论 胃散具有增加胃液分泌、抑制胃酸分泌、抑制胃蛋白酶活性、保护胃黏膜和防止胃溃疡的作用。     

调经补血丸主要药效学研究

目的研究调经补血丸的补血养血、理气通经及镇痛作用。方法采用大鼠气滞血瘀模型、失血性血虚小鼠模型、缩宫素疼痛模型及缩宫素引起的大鼠子宫条收缩模型,考察调经补血丸的药理作用。结果调经补血丸在0.3~2.4 g/kg剂量下,ig给药能够非常显著地降低气滞血瘀模型大鼠的全血黏度和血浆黏度;能够显著增加失血性血虚小鼠红细胞数量和血红蛋白量;能够显著地减少缩宫素所致小鼠扭体次数;在终质量浓度3.6×10-5、1.2×10 4、3.6×10 4、1.2×10 3g/mL对缩宫素引起的大鼠子宫条收缩有非常显著的拮抗作用。结论调经补血丸具有较好的活血化瘀、补血养血、理气通经及镇痛作用。     

元胡止痛滴丸对痛经模型镇痛作用的配伍合理性和比较优势研究

目的 通过观察元胡止痛滴丸及其组分对缩宫素痛经模型的影响,并与临床上同类药月月舒对比,探讨其配伍的合理性及比较优势。方法 通过ip缩宫素诱发大鼠痛经模型,观察元胡止痛滴丸及其组成成分延胡索浸膏、白芷浸膏对扭体反应潜伏期及次数的影响;ELISA法检测与疼痛相关血浆中5-羟色胺（5-HT）、去甲肾上腺素（NA）、β-内啡肽（β-EP）、前列腺素F_2α（PGF_2α）、前列腺素E₂（PGE₂）水平,脑组织中多巴胺（DA）水平;金氏概率相加法计算Q值,根据Q值是否大于1判断元胡止痛滴丸的效果是否优于组分单用。结果 与模型组比较,元胡止痛滴丸、延胡索浸膏和白芷浸膏能够显著减少扭体次数、延长扭体反应的潜伏期（P<0.05、0.01、0.001）,Q值均大于1;与月月舒比较,元胡止痛滴丸作用显著增强（P<0.05、0.01）。与模型组比较,元胡止痛滴丸和延胡索浸膏可显著升高β-EP、PGE₂水平（P<0.05、0.01）,显著降低5-HT、NA、DA、PGF_2α水平及PGF_2α/PGE₂比值（P<0.05、0.01、0.001）;白芷浸膏可显著降低5-HT、DA水平（P<0.05、0.01）;β-EP、NA、DA和PGE2的Q值均大于1;与月月舒比较,元胡止痛滴丸可显著升高β-EP、PGE₂水平,显著降低5-HT、PGF_2α水平及PGF_2α/PGE₂比值（P<0.05、0.01）。结论 元胡止痛滴丸对痛经模型具有显著的镇痛作用,作用强度优于组分单用,配伍具有合理性,与月月舒比较具有起效早、作用强的特点。     

丹参滴丸对二甲基亚硝胺诱导大鼠肝纤维化的治疗作用

目的观察丹参滴丸对二甲基亚硝胺诱导的大鼠肝纤维化的治疗作用。方法除对照组外,其余大鼠采用ip二甲基亚硝胺4周诱导大鼠肝纤维化,造模结束后,ig丹参滴丸175、350、700 mg/kg,设扶正化瘀胶囊为阳性对照组(1 500 mg/kg),对照组、模型组给予同体积蒸馏水,1次/d,连续给药4周。末次给药后1 h剖杀动物,测定血清生化(ALT、AST活性及TP、ALB、TBIL含量)、血清胶原(HA、LN、Ⅲ型前胶原、IV型胶原)水平、肝组织中蛋白、Hyp的含量。取肝组织固定,进行HE、Masson染色,镜下观察肝细胞组织结构和肝纤维化程度。结果丹参滴丸能够显著增加血清中TP和ALB水平,降低ALT、AST活性和TBIL水平;能显著降低LN、Ⅳ型胶原含量,明显降低HA含量,对Ⅲ型前胶原含量有一定的降低趋势;肝匀浆检测显示能显著增加肝组织中蛋白含量,对Hyp含量有一定的降低趋势;肝组织病理学HE染色和Masson染色显示,丹参滴丸能够改善弥漫性肝细胞变性、坏死及炎症反应,能显著抑制胶原增生、减轻肝纤维化程度。结论丹参滴丸能显著改善大鼠的肝功能、减少肝组织纤维的增生、对二甲基亚硝胺诱导的大鼠肝纤维化有一定的治疗作用。     

六经头痛片的二次开发研究

中药大品种二次开发研究是中药创新研究的重要内容,是继承和发展中医药理论,突破制约中医药理论和中药产业发展瓶颈的重要路径。以六经头痛片为研究对象,进行系统的二次开发研究,通过药材、成品以及口服入血成分的辨识和表征,阐释了六经头痛片的化学物质组,进一步通过G-蛋白偶联受体结合实验以及网络药理学分析,筛选和明确了主要药效物质基础;通过与头痛相关的整体及动物模型、离体器官、细胞、相关功能受体以及网络药理学研究,揭示六经头痛片的作用机制;通过拆方研究并与同类中药以及化学药比较,阐释该药的组方特点和配伍规律,提炼和发现其作用特点、比较优势和临床核心价值;通过从化学物质组的辨识与指认、成品质量信息的各原料药材的来源与归属、多指标成分的定量测定、指纹图谱共有模式的建立以及多批样品测定等方面进行系统研究,建立六经头痛片的药材与成品的质量控制体系,对原有的质量标准进行了全面的提升,保证产品的质量均一、稳定、可控。为该品种的临床推广应用和指导临床实践提供了重要的理论和实验依据,并为其他中药大品种的二次开发研究提供了可参考的思路与模式。     

六经头痛片治疗大鼠偏头痛的作用及机制研究

目的探讨六经头痛片治疗偏头痛的作用及可能的机制。方法通过sc硝酸甘油复制大鼠偏头痛模型,观察大鼠搔头次数和搔头反应潜伏期;采用酶联免疫实验(ELISA)检测脑组织中5-羟色胺(5-HT)、去甲肾上腺素(NE)、多巴胺(DA)水平及血清中β-内啡肽(β-EP)、降钙素基因相关肽(CGRP)、内皮素(ET)的量,采用生化法测定血清中一氧化氮(NO)量及一氧化氮合酶(NOS)活性。结果模型组大鼠在sc硝酸甘油后1~3 min即出现搔头,且次数频繁。与模型组比较,六经头痛片1.4、0.7 g/kg组可显著减少偏头痛模型大鼠的搔头次数(P0.001),并呈剂量相关性,能够明显延长大鼠搔头反应的潜伏期(P0.01);六经头痛片1.4、0.7 g/kg组可显著升高模型大鼠血清β-EP、ET及脑内DA的量,显著降低血清CGRP的量和NOS活性,六经头痛片1.4 g/kg组可明显降低血清NO的量,对脑内5-HT、NE的量基本无影响。结论六经头痛片有显著的治疗偏头痛作用,可以升高血清β-EP、ET、DA的量,降低CGRP、NO的量及NOS活性,其作用机制与收缩血管及中枢镇痛有关。     

注射用益气复脉(冻干)对环磷酰胺诱导小鼠免疫低下的改善作用

目的 探索注射用益气复脉（冻干,YQFM）对环磷酰胺致免疫低下小鼠的影响。方法 ICR小鼠随机分为5组：对照组,模型组,注射用益气复脉高、中、低剂量（1417.00、708.50、354.25 mg/kg）组,尾iv给药,每天1次,连续6 d,于第2天给药后,ip环磷酰胺100 mg/kg制备小鼠免疫低下模型。尾iv印度墨汁检测小鼠炭廓清功能;检测小鼠脾脏指数;ip 5%鸡红细胞悬液检测血清溶血素水平;采用2,4-二硝基氯苯（DNCB）建立耳廓迟发型超敏反应模型,观察各组小鼠耳肿胀度的变化;动物血液分析仪测定小鼠白细胞数和骨髓有核细胞数变化。结果 与对照组比较,高、中、低剂量的YQFM均可显著促进免疫低下小鼠的炭廓清功能,显著增加脾脏指数、骨髓有核细胞数和白细胞数（P<0.05、0.01、0.001）;高剂量可显著增加溶血素的生成（P<0.05）;中、低剂量显著增强迟发型超敏反应（P<0.05、0.01）。结论 YQFM可显著改善环磷酰胺导致的小鼠免疫低下,有望成为一种新的抗肿瘤辅助用药。     

功能性消化不良动物模型的中医证型及其评价指标研究进展

功能性消化不良（FD）作为功能性胃肠病,中医临床通过病症结合的方式进行治疗,将其分为脾虚气滞证、肝胃不和证、脾胃湿热证、脾胃虚寒证、寒热错杂证、肝郁脾虚证、肝郁气滞证等证型。FD动物模型的构建依据证型特定的发病机制来模拟人体症状,检测指标常采用行为学、胃肠动力学及相关蛋白水平等评估模型与FD患者的相似度。符合病症的动物模型是开展药效研究和药效评价的前提和基础,对FD中医证型的造模方法及检测指标进行整理和分析,旨在完善和优化动物模型,为后续的药物研究提供支持。     

H10N8禽流感病毒血凝素中和抗体的结合位点鉴定

目的制备并筛选H10N8型禽流感病毒血凝素蛋白的中和抗体,并对其抗原结合位点进行鉴定。方法采用基因工程技术制备H10N8血凝素蛋白单克隆抗体,通过假病毒微量中和实验筛选中和抗体,ELISA和Western blot实验确定抗体结合血凝素蛋白的区域,Discovery Studio 3.5模拟与对接分析软件预测抗原结合位点,进而研究其在H10亚型内的保守性。结果获得1株具有假病毒中和活性的H10N8单克隆抗体,该抗体的结合表位在HA1上,且具有H10亚型内的保守性。结论成功制备1株中和抗体,为H10N8禽流感疫苗和单克隆药物的研究提供了基础。