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基因敲除是一项20世纪80年代末发展起来的新型分子生物学技术,在微生物领域的机制和功能研究中,具有极其重要的意义。经过数十年的发展,基因敲除技术从最传统的同源重组策略发展出λRed重组系统、Cre-loxP重组系统等方法,近年又诞生了成簇的规律间隔的短回文重复序列/Cas9等基于核酸内切酶原理的高效打靶技术,将微生物基因功能研究推向新的高度和方向。本文就这些应用于原核微生物的基因敲除策略的原理、现状和前景等研究进展作一综述。 相似文献
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目的探讨1H-MRS检测早期帕金森病(PD)患者纹状体和黑质代谢变化的可能性。材料与方法 44例经临床确诊的双侧肢体症状不伴痴呆的早期PD患者纳入研究,32名年龄、性别等相匹配的健康志愿者作为对照组,两组均进行纹状体单体素1H-MRS及黑质多体素1H-MRS检查。PD患者33例获得纹状体MRS谱线,32例获得黑质MRS谱线;志愿者31名获得双侧纹状体MRS谱线,28名获得双侧黑质谱线。测量豆状核、黑质区域NAA、Cho、Cr及各参数比值,并进行比较分析。结果 PD组及对照组左右侧纹状体、黑质NAA、Cho、Cr各参数比值的差异均无统计学意义(P值均0.05)。PD组纹状体NAA/Cr较对照组降低(P0.05),其余各参数比值与对照组无明显差异(P0.05);黑质各参数值两组间的差异无统计学意义(P值均0.05)。结论 1H-MRS能检测双侧症状不伴痴呆的早期PD患者纹状体代谢异常,有助于早期PD的诊断。 相似文献
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目的 研究栀续烫伤膏对深Ⅱ度烧伤模型大鼠皮肤的修复作用及机制。方法 采用控温烫伤仪构建深Ⅱ度烧伤模型大鼠,将造模成功的大鼠随机分为模型组、京万红软膏组和栀续烫伤膏高、中、低剂量组(规格分别为20 g药芯+20 mL润湿剂、10 g药芯+20 mL润湿剂、5 g药芯+20 mL润湿剂),另设空白对照组(只进行脱毛处理,不造模),每组10只。各给药组大鼠分别给予相应药物,空白对照组大鼠不作任何处理,模型组大鼠给予生理盐水,每天1次,连续21 d。观察各组大鼠烧伤创面愈合情况和烧伤皮肤组织病理形态学变化,并计算创面愈合率;采用酶联免疫吸附测定法检测大鼠烧伤皮肤组织中血管内皮生长因子(VEGF)、白细胞介素1β(IL-1β)、IL-6、肿瘤坏死因子α(TNF-α)的水平;采用免疫组化法检测大鼠烧伤皮肤组织中VEGF和血小板内皮细胞黏附分子1(CD31)蛋白的表达水平。结果 与模型组比较,京万红软膏组和栀续烫伤膏各剂量组大鼠创面面积逐渐缩小,且在第21天时已极大幅度愈合,创面愈合率均显著升高(P<0.05或P<0.01);皮肤组织可见较厚的新生表皮层,真皮层中结缔组织和新生血管均明显... 相似文献
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20 0 3年 9月 18~ 2 1日 ,由全国副省级城市口腔医学协作组主办 ,成都医学会和四川大学华西口腔医学院承办的第九次全国副省级城市口腔医学学术会议在成都太成宾馆隆重举行。在开幕式上 ,全国副省级城市口腔医学协作组名誉组长 ,现年 86岁高龄的蒋长椿教授回顾了全国副省级城市口腔医学协作组自 1984年创立以来 ,在接近 2 0年的时间里 ,各协作组成员团结一心 ,使副省级城市之间的口腔医学交流从无到有 ,从小到大的发展历程 ,赢得了全体参会代表的热烈掌声。全国副省级城市口腔医学协作组组长、第四军医大学口腔医学院史俊南一级教授 ,成都… 相似文献
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恒磁场对人脐静脉内皮细胞增殖的影响——实验证据支持磁场效应可降低RS发生率 总被引:1,自引:2,他引:1
目的 观察恒磁场(static magnetic field,SMF)对人脐静脉内皮细胞(human umbilical vein endothelium cell,HUVEC)增殖的影响,以探讨SMF能否用于经皮腔内冠状动脉成形术(perculaneous transluminal coronary angioplasty,PTCA)及支架植入术后冠脉再狭窄(restenosis,RS)的防治。方法 用含100g/L小牛血清的DMEM培养液体外培养人脐静脉内皮细胞(ECV304),分别在给予SMF和无SMF条件下培养,用^3H—胸腺嘧啶脱氧核苷(^3H—TdR)掺入法和流式细胞技术分析SMF对HUMEC的DNA合成及细胞周期的影响。结果 对照组cpm值为1194.669&;#177;287.250,恒磁场组cpm值为1356.578&;#177;363.845,差异显著(P<0.05)。恒磁场组S期细胞高于对照组,G:期细胞较对照组降低,增殖指数P1值(S+G2M)%增高,差异显著(P&;lt;0.05)。结论 SMF对HUMEC的增殖具有明显的促进作用。SMF对PTCA支架植入术后的冠脉RS可能具有防治作用。 相似文献
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恒磁场对人脐静脉内皮细胞一氧化氮合酶活性的影响 总被引:5,自引:4,他引:5
目的:观察恒磁场(staticmagneticfield,SMF)对培养的人脐静脉内皮细胞(humanumbilicalveinendotheliumcell,HUVEC)一氧化氮合酶(nitricoxidesynthase,NOS)活性表达的影响,以探讨SMF能否用于经皮腔内冠状动脉成形术(percutaneoustransluminalcoronaryangioplasty,PTCA)及冠脉内支架植入术后冠脉再狭窄(restenosis,RS)的防治。方法:用含100g/L小牛血清的DMEM培养液体外培养人脐静脉内皮细胞(ECV304),分别在给予SMF和无SMF条件下培养,行ABC免疫酶染色法,采用图像分析法分析SMF对HUVEC的NOS活性的影响。结果:实验组内皮细胞结构型NOS(endotheliumconstructiveNOS,ecNOS)表达较对照组增强,差异显著(P<0.01),实验组与对照组诱生型NOS(inducedNOS,iNOS)均无表达。结论:恒磁场增强了培养的HUVEC的ecNOS的表达;恒磁场对PTCA支架植入术后的冠脉再狭窄可能具有防治作用。 相似文献