腹腔镜胃肠手术治疗2型糖尿病的血清蛋白质组学初步研究

目的 探讨腹腔镜胃肠手术前后2型糖尿病患者血清蛋白质表达的差异.方法 收集2008年6月至2010年9月第二军医大学附属长海医院行腹腔镜胃肠手术治疗的12例2型糖尿病患者的血清标本,双向凝胶电泳分离2型糖尿病患者术前、术后1周及术后1个月的血清总蛋白,对手术前后差异表达明显的蛋白点行质谱鉴定及生物信息学分析.结果 建立了稳定、重复性好的血清凝胶蛋白图谱.筛选出2型糖尿病患者胃肠手术前后血清中差异表达明显的20个蛋白点,并成功鉴定出8个蛋白点,其中术后表达增高的有5个,分别是Rho GDP-dissociation inhibitor 1、Prohibitin、Alpha-1-antitrypsin precursor、Serotransferrin precursor和Fibrinogen gamma chain precursor;术后表达降低的有3个,分别是MAP3K12-binding inhibitory protein 1、Coronin-1A和Isovaleryl-CoA dehydrogenase.结论 2型糖尿病患者行腹腔镜胃肠手术后的血清蛋白质与术前比较,存在着明显的差异.共成功鉴定出8个蛋白点.

Abstract：

Objective To investigate the impact of laparoscopic gastrointestinal surgery on serum protein expression in patients with type 2 diabetes mellitus(T2DM).Methods Twelve patients with T2DM received gastrointestinal surgery at Changhai Hospital of the Second Medical University from June 2008 to September 2010.Their serum samples were collected at different time points(before surgery,1 week and 1 month after surgery).Total proteins were seperated by two-dimensional(2D)gel electrophoresis.The differentially expressed proteins were analyzed by mass spectrometry and bioinformatics.Results Protein extracts of the serum samples were separated on 2D gels successfully.Twenty differentially expressed proteins in the serum after surgery were screened out.Eight proteins were successfully identified,in which the expression of 5 proteins(Rho GDP-dissociation inhibitor 1,Prohibitin,Alpha-1-anfitrypsin precursor,Serotransferrin precursor and Fibrinogen gamma chain precursor)was increased after operation,and the expression of 3 proteins(MAP3K12-binding inhibitory protein 1,Coronin-1A and Isovalery1-COA dehydrogenase) was decreased.Conclusions The expression of 20 proteins have been changed significantly in serum samples after laparoscopic gastrointestinal surgery in patients with T2DM,and 8 proteins were successfully identified.     

经典名方枇杷清肺饮的UPLC指纹图谱及多指标成分含量分析

目的 建立枇杷清肺饮物质基准的超高效液相色谱法（UPLC）指纹图谱，并建立同时测定其5种指标成分含量的定量分析方法，为该经典名方的质量控制及评价提供参考。方法 采用ACQUITY UPLC^? CSH^TM C₁₈色谱柱（2.1 mm×100 mm，1.7 μm），以乙腈（A）-0.1%甲酸水溶液（B）为流动相梯度洗脱（0~7 min，5%~7%A；7~11 min，7%~8%A；11~22 min，8%~14%A；22~30 min，14%~15%A；30~35 min，15%~25%A；35~42 min，25%~40%A；42~45 min，40%~50%A；45~50 min，50%~60%A），流速0.35 mL·min^-1，柱温25 ℃，检测波长278 nm和248 nm。建立15批枇杷清肺饮物质基准的UPLC指纹图谱，应用“中药色谱指纹图谱相似度评价系统”软件（2012版）进行相似度分析，并对共有峰进行归属。采用聚类分析（CA），主成分分析（PCA）及正交偏最小二乘法-判别分析（OPLS-DA）对指纹图谱数据进行评价。利用UPLC指纹图谱方法测定5种成分的含量。结果 指纹图谱及含量测定方法的各项方法学验证均良好，15批枇杷清肺饮物质基准与对照指纹图谱的相似度均≥0.997，共标定了23个共有峰，指认出了11个色谱峰。CA，PCA及OPLS-DA可将15批物质基准分为两类。盐酸黄柏碱、绿原酸、盐酸小檗碱、盐酸巴马汀、甘草酸铵5种成分在一定质量浓度范围内与峰面积呈良好线性关系（R²均>0.999），平均加样回收率96.47%~101.16%，在各物质基准中的质量分数范围分别为0.87~2.00，1.53~5.95，18.45~33.97，3.87~6.29，1.02~4.12 mg·g^-1。结论 建立的枇杷清肺饮UPLC指纹图谱及多指标成分含量测定方法专属性强、分离度好、灵敏度高，除人参药味以外均有表征，可为该方剂复方制剂的质量控制与评价提供参考。     

中药药理实验教学改革的探索

本文从虚拟实验教学体系的建立、抓好预习与实验记录、开设设计性实验、建立开放式实验教学模式四方面,阐述了中药药理实验教学改革的探索,以提高中药药理学的实验教学质量.     

清伙灵对大鼠积滞化热证干预作用的代谢组学研究

目的：运用代谢组学方法研究积滞化热模型大鼠机体代谢表型的变化及清伙灵发挥干预作用的相关代谢途径。方法：实验分正常组、模型组和清伙灵组。模型组和清伙灵组给予特制饲料并ip阿托品（0.25 mg·kg^-1）,每日2次,连续造模7 d,从造模第4天开始,ig清伙灵（2.64 g·kg^-1）,每日1次。大鼠血清和尿液的代谢指纹利用核磁共振氢谱（¹H-NMR）进行表征。综合使用主成分分析、正交偏最小二乘判别分析和单变量统计分析方法探讨积滞化热证引起的机体代谢表型的变化,鉴定及比较相关的代谢标志物。结果：与正常组比较,模型组的肛温、饮水量、饮食量等有明显改变（P<0.05）。在血清和尿液中分别筛选得到6种和7种与积滞化热证相关的代谢标志物。模型组大鼠机体代谢表型发生了明显的改变,脂质代谢、糖吸收和代谢、肠道菌群都受到不同程度的影响。清伙灵组与模型组比较差异有统计学意义（P<0.05）。结论：清伙灵能有效改善积滞化热证候大鼠的脂质和糖代谢失衡,并可调节肠道菌群。     

三丫苦抗炎镇痛作用及机制研究

目的:研究三丫苦不同提取物的抗炎镇痛作用并探寻其时效关系及部分机制。方法:通过二甲苯致小鼠耳肿胀、热板法观察小鼠痛阈值、醋酸致小鼠扭体、角叉菜胶诱导小鼠足爪肿胀观察三丫苦不同提取物的抗炎镇痛作用;采用紫外分光光度法和酶联免疫吸附法分别检测炎性组织中前列腺素E2(PGE2,prostaglandin E2)和血清中环氧化酶-2(cyclooxygenase,COX-2)含量。结果:三丫苦茎水提物、根醇提物对二甲苯诱导的小鼠耳肿胀、醋酸致小鼠扭体、角叉菜胶诱导小鼠足爪肿胀具有抑制作用,对炎性组织中PGE2和血清中COX-2含量也有一定的降低作用。结论:三丫苦有较强的抗炎作用,抗炎机制与抑制PGE2生成及COX-2含量有关。     

痛泻要方是否配伍防风治疗肝郁脾虚腹泻型肠易激综合征35例临床观察

目的：观察痛泻要方有无配伍防风对肝郁脾虚腹泻型肠易激综合征的临床疗效。方法：将105例患者分为3组各35例,治疗1组用痛泻要方治疗,治疗2组用痛泻要方去防风治疗,2组均随症加减;对照组用匹维溴胺片治疗。3组均以28天为1疗程,2疗程后观察临床疗效,腹痛缓解时间和大便恢复正常时间及治疗前后中医症状积分变化。结果：治疗1组、治疗2组和对照组总有效率分别是88．6％、68．6％、62．9％,治疗1组与治疗2组、对照组比较,差异均有显著性意义（P〈0．05）。腹痛缓解时间、大便恢复正常时间治疗1组与治疗2组、对照组比较,差异均有显著性意义（P〈0．05）。治疗后治疗1组中医症状积分均有显著改善（P〈0．05）．治疗2组仅腹痛、腹胀、焦虑紧张积分有改善（P〈0．05）,对照组仅腹泻、排便急迫积分有改善（P〈0．05）。结论：痛泻要方治疗腹泻型肠易激综合征疗效显著,可改善临床症状和中医症状积分;痛泻要方去防风则临床疗效和改善中医症状作用明显下降,防风在方中具有重要的佐助意义。     

痛风性关节炎患者的健康教育在护理中的应用

目的：探讨健康教育在痛风性关节炎中护理中重要性。方法：通过21例长期病患者中的护理和健康教育。结果：发现对痛风性关节炎进行有关知识宣教，从而大大减少复发的次数。结论：开展痛风性关节炎知识宣教及早预防和治疗痛风性关节炎是关键。     

172例单纯性肥胖患者行腹腔镜可调节胃束带术后随访结果分析

目的探讨腹腔镜可调节胃束带术治疗单纯性肥胖的减重效果及并发疾病的改善情况。方法对2003年6月至2009年6月间行腹腔镜可调节胃束带术的172例肥胖症患者的随访资料进行总结分析。结果本组患者体质量指数平均38．5kg／m^2,合并糖尿病28例,高血压36例,高血脂85例,呼吸睡眠暂停综合征56例,脂肪肝138例。术后1、3、6、12、24、36和48个月检测体质量指数分别为平均37．2、35．9、34．5、32．9、30．7、29．2和28．1kg／m^2,多余体质量减少率平均分别为10．1％、16．2％、25．1％、37．4％、51．3％、59．0％和62．1％。在术后24、36和48个月时,分别有50．7％、63．6％和70．0％的患者多余体质量减少率大于50．0％。21例（12．2％）术后出现并发症,包括调节泵处感染6例．调节泵翻转2例,调节泵处不愈性溃疡1例,胃小囊扩张7例,胃束带滑脱4例和慢性肠梗阻1例;5例行胃束带取出术。没有围手术期死亡。合并糖尿病者术后17例（60．7％）不服药即可控制血糖：合并高血压者22例（61．1％）血压恢复正常;合并高血脂者49例（57．6％）血脂恢复正常;合并呼吸睡眠暂停综合征患者29例（51．8％）症状消失;所有脂肪肝患者均有不同程度的好转。结论腹腔镜可调节胃束带术能取得良好的减肥效果,并发症较少,肥胖伴发疾病能得到治愈或症状明显改善。     

WebQuest教学模式在临床教学中的应用

通过对WebQuest在临床教学中的设计、制作和实践,探讨了WebQuest主题探究性学习模式在医学教学中的应用。理论和实践证明,运用WebQuest进行临床教学,可使学生自主地建构所需的知识体系,有效地培养临床思维能力和创造性解决问题的能力,在实际应用中真正做到"胸有成竹";而且,该教学模式适合大班教学,是一种较好的大范围培养创新型医学人才的教学模式。     

健脾疏肝方对IBS模型大鼠的治疗作用

目的:探讨健脾疏肝方对乙酸法复制IBS模型大鼠的治疗作用。方法:新生SD大鼠从第8～21天每天给予直肠内醋酸刺激复制IBS大鼠模型,分别在出生后第6周及8周进行直肠扩张,测定其腹部收缩反射(AWR)的阈值作为肠道敏感性评估。从第9周开始分别给健脾疏肝方6.08g/kg、3.04g/kg、1.52g/kg或泽马可4mg/kg灌胃,每日一次,连续两周,治疗后再次评估AWR阈值。结果:IBS模型大鼠AWR值明显降低,健脾疏肝方能够升高IBS模型大鼠的AWR阈值。结论:健脾疏肝方有降低IBS大鼠肠道敏感性的作用。